por
BEATRIZ ELENA
Instituto Nacional de Investigación y Desarrollo Pesquero (INIDEP).
Paseo Victoria Ocampo N° 1, 7600 - Mar del Plata, Argentina. (e-mail: elena@inidep.edu.ar) Summary
Age and growth of the Argentine shortfin squid Illex argentinus were estimated by examining growth increments in paralarva, juvenile and adult statoliths. In the late seventies and early eighties it was confirmed that growth increments in the statoliths are formed daily. The disadvantage of age and growth determination from squid statoliths is the laborious procedure of statolith sampling and processing. A detailed description of the statolith preparation and ageing technique is given below.
Intoducción
Los cefalópodos, asi como otras criaturas que poseen predadores voraces, necesitan monitorear sus rotaciones, controlando sus aceleraciones angulares y asi corregir su visión. El cartílago cefálico que rodea al cerebro, posee dos cápsulas llamadas estatocistos. Estas presentan en su interior proyecciones cartilaginosas, anticrista, que penetrando en la endolinfa forman "canales semicirculares". En su superficie presenta capilares, relacionadas con dos sensores: la mácula, como receptor de la fuerza gravitacional, y la crista relacionada con la aceleración angular.
Unidos a las máculas de cada estatocisto se encuentran los estatolitos.
Material y métodos
La edad de diferentes cohortes (1989, 1991, 1993, 1994, 1996) y estadios ontogénicos (larvas, juveneles y adultos) de Illex argentinus fue estimada a partir de incrementos observados en los estatolitos (Fig. 1).
Extracción
La extracción de los estatolitos se efectua en ejemplares frescos o congelados. Usando métodos quirúrgicos, se realizan cortes transversales en el cartílago cefálico hasta poder extraer de las cavidades de los estatocistos estas estructuras.
Conservación y montaje
Una vez extraídos se colocan en alcohol 96%, para la fijación de la matriz proteica. Son conservados en policubetas con parafina líquida hasta su montaje. Previo a éste se lavan con xilol y alcohol y se colocan en hipoclorito de sodio de 7 a 20 minutos según el tamaño de los mismos, para eliminar restos orgánicos. Se montan en el extremo superior derecho de un portaobjeto con una pequeña gota de PROTEXX situándolos con la cara posterior (convexa) hacia arriba. Una vez seco el medio montante se pulen con papeles esmerilados de diferente densidad (12 um, 9 um, 3 um, 0.3 um, 0.1 um). Recientemente se ha incorporado al tratamiento el uso de un
micrótomo de histología adaptado por el Dr.
Christiansen1 a este fin. El pulido se controla periódicamente bajo el microscopio para evitar la destrucción del núcleo y de anillos cercanos a el.
Para su lectura se clarifican con una gota de xilol.
Fig. 1. A - Estatolito de paralarva - LM: 9 mm B - Estatolito de juvenil - LM: 73 mm C - Estatolito de adulto - LM: 213 mm.
Resultados
Microestructura de los estatolitos
Cuatro regiones fueron reconocidas en los estatolitos pulidos de calamares adultos. El núcleo redondeado y transparente (25- 35 um), contiene el foco (10 um) no transparente debido, como en el ala, a los cristales modificados que lo componen. La zona postnuclear transparente y de forma oval con finos incrementos (1.31). La zona oscura, más extensa con incrementos mayores (3.1 um). La zona marginal, translúcida, conteniendo finos incrementos (1.4 um). En la región de intersección entre las zonas postnuclear y oscura se encuentran cristales no transparentes que ocultan algunos incrementos. El eje de
crecimiento se extiende desde el foco hasta la región postnuclear, cambiando aquí su dirección (45°) hacia el margen del domo dorsal.
Microscopía electrónica
Con el fin de estudiar la estructura interna del estatolito y fografiarla, se limpian , secan y fracturan, siendo la superficie fracturada grabada (7% EDTA ), y cubriéndolos con palladium (Fig. 2).
Fig. 2. Fotografias de un corte frontal (SEM).
A - Foco y núcleo
B - Núcleo y zona postnuclear C - Zona oscura y zona marginal Referencias
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92 Sesión 2: Estudios sobre edad y crecimiento de calamares y peces
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C
C
1Dr. Haraldo E. Christiansen, Laboratorio de Histología, INIDEP.
Brunetti, N. E. , Ivanovic M. L., Elena, B. & A.
Aubone (MS) prep.-Distribution, abundance and growth of early life stages of Illex argentinus.
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Introduction
There were few validation studies on daily increment formation in statolith of Illex argentinus (Uozumi and Shiba, 1993). Our attempts in this papar are to validate the formation in statolith and another aging characteristic for the laboratory-hatched paralarvae and wild paralarvae and juveniles.
Materials and methods
Hatchlings were obtained by the artificial fertilization techniques (Sakai and Brunetti, 1997) for the rearing experiments in several temperature units under a 16L/8D photoperiod. Statolith maximum radii (MSR) were measured for laboratory-reared paralarvae and wild paralarvae and juveniles.
Results and discussion
It was observed that several growth increments in a statolith had already formed at the
time of hatching for a 0-day-old paralarva. And more than 25 increments were counted in a statolith of a 7-day-old paralarva (Fig.1). The paralarval statolith has a growth structure in which several narrow increments appeared between wide increments. When we count the narrowest increments as daily increments, the average of increment widths will be 1.2 mm per day.
Fig 1. Statoliths of a 0-day-old hatchling and a 7-day-old paralarva reared in 15 °C .