3 Material und Methoden
7.1 Xenopus laevis p170 cDNA- und Proteinsequenz
Die X.l. p170 cDNA Sequenz besteht aus 4441 Basenpaaren, das p170 Protein besteht aus 1335 Aminosäuren. Der Überlappungsbereich der durch „Screening“ und „RACE-PCR“ aufgefundenen Klone ist grau unterlegt. Die sieben Unstimmigkeiten der beiden Klone sind durch Fettdruck hervorgehoben (vgl .Abb. 15). Gleiches gilt für die daraus abgeleiteten Aminosäuren, sofern sich durch den Nukleotidaustausch eine Änderung ergeben hat. Dabei wird die durch RACE-Studien ermittelte Sequenz oben dargestellt, die durch das „Screening“ einer Ovarien Bibliothek isolierte Sequenz wird unten angegeben.
Das Translations-Initiationskodon mit umgebender DNA-Sequenz ist unterstrichen, um die Übereinstimmung mit der Kozak-Sequenz hervorzuheben. Ebenfalls unterstrichen ist das alternative Polyadenylierungssignal AATAAA.
GG GGC CCA AGA TTT TGT TTT CGG TCG CTA GTT CAG TTC TCC AGT CAT TGG CGC CTG CAC CGG AGC TGT CAG TTG GGG CGG GGC TTA TTT GTT TGT GGA AAT CTG CTT GCG GTG TGG GAG AAA GTG AAT GTG GGG CGC CTT AAT ACT CAT TCA 1
CCC CGA GTG CCC TGC TGG CTG TGG AAC TAT ATT ATA CAA ATG GAA TTA AAT M E L N
ATG CCG ACA TAT AAC GAT CAA ATA GAA GAA CCA ACA GAT GGT CTG CTG TTA 5 M P T Y N D Q I E E P T D G L L L
ATG GGC AAA CTA ATG CAA GGA GAG TGG AGT ATA GAG CAT GAA GAT GAA AAA 22 M G K L M Q G E W S I E H E D E K
CGT GAC CAT TCT AGT GAA CAT TCC CTA AGC AGA GTT CCA CTC GGG CTC ACT 39 R D H S S E H S L S R V P L G L T
TTG GAA GAT CTT GAG CAG TCC TGT AAA TCC AGA GAG AAC TTA CTT AGA AGC 56 L E D L E Q S C K S R E N L L R S
7 Anhang 116
AGG AAC ACA GTT TCC CAG AAT GCT GGG AAC TCT CTA AGG GCA TTC AAA GAC 73 R N T V S Q N A G N S L R A F K D
AAG CCC ACC AAC TCA CAA TCT GGA TCA TTA ATA AGA AAC ACA GAA CAA CAA 90 K P T N S Q S G S L I R N T E Q Q
AAT AGA CAA TTA AAG GAA AAA CTT AAT TTT CTT CAA GAA CAA AAT GCA 107 N R Q L K E K L N F L Q E Q N A
TCG CTG GTG TCC CAA AAC CAC TCT CTC ATG AAT AAG ATT GAC TGT GTA CAG 124 S L V S Q N H S L M N K I D C V Q
ACA GAA TTA ACA AAG TCC AGA TCT AGA ATC CGC TAT GTT GAG TCT GCA ATT 141 T E L T K S R S R I R Y V E S A I
GGA GCA AGG GCA ATG AGA TTA CCT GAT CTG GAG GAG CGG ATA CTA ACC TTG 158 G A R A M R L P D L E E R I L T L
GAA GCC AAA GCT GAT GCT CAA GAG AAC GCC CTT AGA ACT ACT GAA GAT CAG 175 E A K A D A Q E N A L R T T E D Q
TTA GAG CAC AGT CGG CAT ATC TTG GCT GAA AAA GAG AGG ATT CTG CAA ATG 192 L E H S R H I L A E K E R I L Q M
TTT AAA GAC GAG ATG AAG GCG TTG AAA GAA GAA CTG TTT GCA TCC TGT AGG 209 F K D E M K A L K E E L F A S C R
TTA TGT AAG AGA ACT GAA AAA CAG AGA AAC GAG GCA CTT TTT AAT GCT GAA 226 L C K R T E K Q R N E A L F N A E
GAA CTT ACA AAA GCC CTT CAA CAG TAC AAA AAC AAA ATG ACT GAA AAA ATG 243 E L T K A L Q Q Y K N K M T E K M
GAA AAG GTT CAG GAA GAA GGG GAG CTG CTA AAA AAT AAG TTT TCA AAC TGT 260 E K V Q E E G E L L K N K F S N C
GAA AAA GAA CAA GAT GCT TTG CAG CAA AAA TGT GTA ATG TTG GAT ACT GAA 277 E K E Q D A L Q Q K C V M L D T E
CTG GAA AAG TCA AGG GAT GCC TTA AGA AAT TTA CAG TCA GAA AAT ATA ATC 294 L E K S R D A L R N L Q S E N I I
CGC CAA GAG AGG CAT CAG TGT GTT GAA GCC AAA AAT GCA GAA CTT ATT TCT 311 R Q E R H Q C V E A K N A E L I S
7 Anhang 117
CTG TTA ACA CAG TCT AAT CAG AGA ATT CTT AGA CTT GAA AGT GAA CTT GAA 328 L L T Q S N Q R I L R L E S E L E
CAT AAA GAA AAA GCC CTC CAA GAA AAC ATT GAT GAG AAC AAA GCA ATG AAA 345 H K E K A L Q E N I D E N K A M K
GAT TGC TTC GCA AAG TCC AAA CAG TCA GAA ACG ATC TCT GAT CAG CCA AAA 362 D C F A K S K Q S E T I S D Q P K
GAA CAA CCT GCA GAT TCT GCT TCT GAT GGC AGT GGA AAG CTA ATT GCA GAC 379 E Q P A D S A S D G S G K L I A D
TTA AGG GCA AAA CTG TTG ATC AGA GAA GCA GAA AAC AAA GAA CTT CAA GCT 396 L R A K L L I R E A E N K E L Q A
GAA CTT GTA AAC GGG AAG TTA CTA ACC AAC CGC TAT AGA AAC AGT CTA GAA 413 E L V N G K L L T N R Y R N S L E
AAG AAT TGT TTG GAT GCA CTG GAA GCA GAA CCA GTG AAA CTG AAC CTA CAA 430 K N C L D A L E A E P V K L N L Q
AAT ACA GCG GAA GAA AAA TAT CTG CAG CTT GAG CTC CTT TGC AAG CAG ATT 447 N T A E E K Y L Q L E L L C K Q I
CAG ATG GAT AAG GAA AGA CTT ACA GAC TGT GTG AAA GAA TTA CAA GGG AAA 464 Q M D K E R L T D C V K E L Q G K
CTC GGC AAA GCA CAG ATT GAA CCT ACC AAC ACA AAG CTT TCC ATG GAA CAG 481 L G K A Q I E L T N T K L S M E Q
AGA ACC AGC CAG CTT CAG CTC ATA CAA CAG GAA TTG CTG GAA AAA GCA TCA 498 R T S Q L Q L I Q Q E L L E K A S
AAA ACT ACC AAG TTA GAG CAG GAA TTG GTA AAG AAA CGC ATG AAG ATC AGT 515 K T T K L E Q E L V K K R M K I S
GCT CTT CAG AAG CTA GTG GAA GAG AAG AGC CAG GTT TAT TCT GCT GCT GAA 532 A L Q K L V E E K S Q V Y S A A E
GCC AGG AAT GCT GGA TTG GAA GAA AAG CTT AAG AAT TAT AAA GAT CAA ATA 549 A R N A G L E E K L K N Y K D Q I
GTC AAC CTG GAA GAC AAT ATT AAC AAA GAA CAT GCA GAG GTC CTC TTG GCA 566 V N L E D N I N K E H A E V L L A
7 Anhang
7 Anhang 119
GTC TCC TTA AAA AAC AAA GAA GAA AAG AAT GCC AGC ATG TTA AAA CTG CTG 838 V S L K N K E E K N A S M L K L L
CAG ATG GAT ATG CAG AAA ACT CAA GTG GAA CTA GAT AAG AAA GCA TGT 855 Q M D M Q K T Q V E L D K K A C
GCT GTG CTA GAG TTA GAG GAG AAA TTG CAC ATT GCT GAA AAG GAC AGT 872 A V L E L E E K L H I A E K D S
AAA AGA ACA GAA GAG ATG GAG ACA CAG CTG AGT GGC ATG CAA AAG GAA TTA 889 K R T E E M E T Q L S G M Q K E L
GAC GGC TAC ACA AAA CAA GTA GAA GAA CTA CAG GAA ACA CTG ACA AAA ACC 906 D G Y T K Q V E E L Q E T L T K T
GTG AAC AGA CAC CTC CTC TTT GTT CAT TAA TAT GTT CCG GAA TGT CTT TTC 923 H L S V E E K Q V I I Q G L T E K
CTG AGA TCA TAT AAA CAA GAA CTT GAG GAG AGA GAC CAT GAA GTG CTT GAT 940 L R S Y K Q E L E E R D H E V L D
ATG GAT CAA CTG CTA AAA GAT AGG AAC TGG GAG CTG AAA CAG AGA GCT GCG 957 M D Q L L K D R N W E L K Q R A A
CAA TTA ACC CAG TTG GAT ATG AGT ATT CGG GGA CAC AAA GGA GAG ATG GAA 974 Q L T Q L D M S I R G H K G E M E
CAA AAA ATT ATA AGA TTG GAA AGT GCT TTG GAG AAA GCT GAA TTA GAA GCC 991 Q K I I R L E S A L E K A E L E A
CGG GAC CAT ATT AAG GAG ATA AGC TCT TTA GAT GAA AGA TTG CAA CAA GCA 1008 R D H I K E I S S L D E R L Q Q A
AGA GAT CAG CTT TGT GAA AAA GAA TTT GAC TTG ATG CAA AAA GAC CAA ATT 1025 R D Q L C E K E F D L M Q K D Q I
ATA AAT CAA CTA AAG AAG GAC ATT GAG AGA AGT CAT CAA ACA GTA ACT GAT 1042 I N Q L K K D I E R S H Q T V T D
ATG GAA AAG ACT TTA AAA GTG CAG GAG CGA CGT ATC TCA GAA AAG CAT CAA 1059 M E K T L K V Q E R R I S E K H Q
GAT GGT GTG GAC CTC AGC AAA CAA GTA TGC CTT GCA CAA GAA CGA ATG CAG 1076 D G V D L S K Q V C L A Q E R M Q
7 Anhang 120
CTC ACC CAC CAG GAG CTC TTA GAA ACC CGA CAA CAG TTG GCT GAG GCT CAG 1093 L T H Q E L L E T R Q Q L A E A Q
AAA GAA TCA GAC AGG CTT GCA CAA AAG CTG GAA GGA ATG GAT CTC ATT TCC 1100 K E S D R L A Q K L E G M D L I S
AAA GAA AAG ATA CAG CAT TTG AAG CAA AAG TTA GAA GAA ACA AAT GAC ACC 1127 K E K I Q H L K Q K L E E T N D T
GTG TGC AAT CTA AAG ACA GAA CTT CAG GCA AGG AAC GAG GTC ATC AAA GCA 1144 V C N L K T E L Q A R N E V I K A
ACA AAT GAA GTA TTG ATA CTA AAG GAA TCT GAG TTA ACA AGA CTG AAA GCC 1161 T N E V L I L K E S E L T R L K A
CGG ATT TCA AGC TAT GAA AGA ACT TTA GGC CTA AAG CAG CTG TCG GAC ACT 1178 R I S S Y E R T L G L K Q L S D T
ACT GCA CTC CCA TCA ATA TCT TTC ACT GAT CCC CAC CCT CTG GAT TCA TCT 1195 T A L P S I S F T D P H P L D S S
AAA CAT CCT GAG GCT TCA GAC TTT AAA ATG TGG CAC ATC AGT CCC TCA ATC 1212 K H P E A S D F K M W H I S P S I
AGT GCC AGT AAT CTA AGT CTG ACC GAC ATG AGC TCT CTG GAG TTG CCT AAA 1229 S A S N L S L T D M S S L E L P K
AGC ATG TTG GAA GAC CTA AGG AAC CTG GCT CCT CCA GAC TCT CCA CCA ATG 1246 S M L E D L R N L A P P D S P P M
AAA GAT ACT AGT GAG GGG GTG TCT TGT GTT TCC TCT GAT AGT CTG AAC AAT 1263 K D T S E G V S C V S S D S L N N
TCT TCA TTT AAC CCT CTT ACA TAC GCA TTG GAT GAA AAC AGT GAT TTT ACT 1280 S S F N P L T Y A L D E N S D F T
GAC TGC CCA GAC CTA ACA ACT CTT ACT GGG ATG CTC AAA TAC ATA AAG AAA 1297 D C P D L T T L T G M L K Y I K K
GAG ATG AGA TTA TCT GAA TAT CCA CAG GAA CAC AGC CCC AGC AAG GCT GCT 1314 E M R L S E Y P Q E H S P S K A A
GGG ATT GAT GGC GGA TCC TTA GGA TAG CAGGATTGATCTACCCATTATGAGCGATGGA 1331 G I D G G S L G End
7 Anhang 121
CACTGGAAGGAAATACAGGCAGATGATCATTTTCTCAACTATCTTTAGCAAGGCTGCACTTTTATTATTTATTT GTATCATATTTTCTTTTATTTATATGTTTGCTGTTCTTATAGATGTTTGTGATATCTACTGTGTGATAATTTTA TACCATAAATTGTGTAAAAAATCTGAAATAAAAATGATCCAAAACAAAAAAAAAAAAAAAAAA
7 Anhang 122