2. Carbenicillin
- 100 mg/l im CIN- (Minipigversuche) und LB-Agar (Mausversuche)
3. Kanamycin
- 50 mg/l im CIN- (Minipig) und LB-Agar (Maus) zusätzlich zu Carbenicillin in der Hälfte der Nährböden zur Unterscheidung der Stämme in Koinfektions-versuchen
- 25 µg/ml im LB-Medium für die Übernachtkultur kanamycinresistenter Stämme (Herstellung der Infektionsdosen)
H.6 Tabellenverzeichnis
Tab. 1: Verwendete Y. enterocolitica Stämme und deren Herkunft. ...27 Tab. 2: Biochemische Reaktionen der eingesetzten Y. enterocolitica Stämme. ...29 Tab. 3: Makroskopisch-pathologische Befunde der intestinalen Organe und der
assoziierten Lymphknoten am siebten Tag p.i. ...128 Tab. 4: Makroskopisch-pathologische Befunde der intestinalen Organe und der
assoziierten Lymphknoten während der Sektionen zu vier verschiedenen Zeitpunkten p.i.. ...129 Tab. 5: Pathologisch-anatomische Befunde der intestinalen Organe und der
assoziierten Lymphknoten ...130 Tab. 6: Pathologisch-anatomische Befunde der intestinalen Organe und der
assoziierten Lymphknoten ...131 Tab. 7: Pathologisch-anatomische Befunde der intestinalen Organe und der
assoziierten Lymphknoten ...132 Tab. 8: Pathologisch-anatomische Befunde der intestinalen Organe und der
assoziierten Lymphknoten ...134 Tab. 9: Ergebnisse der histopathologischen Untersuchung von Ileum (A) und
mesenterialen Lymphknoten (B) der Minipigs. ...135
Tab. 10: Ergebnisse der histopathologischen Untersuchung von Leberproben
der Minipigs. ...136 Tab. 11: Ergebnisse der histopathologischen Untersuchung von Milzproben der
Minipigs. ...137 Tab. 12: Ergebnisse der histopathologischen Untersuchung von Ileumproben
der Minipigs. ...138 Tab. 13: Ergebnisse der histopathologischen Untersuchung von mesenterialen
Lymphknoten der Minipigs. ...139 Tab. 14: Ergebnisse der histopathologischen Untersuchung von Ileumproben
der Minipigs. ...140 Tab. 15: Ergebnisse der histopathologischen Untersuchung von mesenterialen
Lymphknoten der Minipigs. ...141 Tab. 16: Ergebnisse der histopathologischen Untersuchung von Ileumproben
der Minipigs. ...142 Tab. 17: Ergebnisse der histopathologischen Untersuchung von mesenterialen
Lymphknoten der Minipigs. ... 143 Tab. 18: Ergebnisse der histopathologischen Untersuchung von Ileumproben
der Minipigs. ...144 Tab. 19: Ergebnisse der histopathologischen Untersuchung von mesenterialen
Lymphknoten der Minipigs. ...144 Tab. 20: Quantitative Belastung der intestinalen (A) und extraintestinalen (B)
Organe der einzelnen Minipig-Ferkel mit Y. enterocolitica Serotyp O:3
Stamm Y1. ...145 Tab. 21: Quantitative Belastung der intestinalen (A) und extraintestinalen (B)
Organe der einzelnen Minipig-Ferkel. ...146 Tab. 22: Quantitative Belastung der intestinalen (A) und extraintestinalen (B)
Organe der einzelnen Minipig-Ferkel mit Y. enterocolitica Serotyp O:3
Stamm Y1 oder Serotyp O:8 Stamm 8081v. ...147 Tab. 23: Quantitative Belastung der Organe der einzelnen Minipig-Ferkel mit
Y. enterocolitica Serotyp O:3 Wildtypstamm Y1 (wt) und der
RovA-Stabilitätsmutante YE14 (YE14(rovAP98)). ...148 Tab. 24: Quantitative Belastung der Organe der einzelnen Minipig-Ferkel mit
Y. enterocolitica Serotyp O:3 Wildtypstamm YE13 (wt) und der
PinvAIS1667-Mutante YE15 (YeO:3ΔIS1667). ...149
Tab. 25: Quantitative Belastung der Organe der einzelnen Minipig-Ferkel mit Y. enterocolitica Serotyp O:3 Wildtypstamm Y1 (wt) und der
ΔinvA-Mutante YE21 (YeO:3 ΔinvA). ...149
H.7 Abbildungsverzeichnis
Abb. 1: Zeitlicher Ablauf des Versuchs. ... 32 Abb. 2: Quantitative Organbelastung in den drei Dosisgruppen.. ... 38 Abb. 3: Prozentualer Anteil der positiv getesteten Tiere in den drei
Dosisgruppen. ... 39 Abb. 4: Prozentualer Anteil der Tiere in den drei Dosisgruppen, die
Y. enterocolitica mit den Faeces ausschieden.. ... 40 Abb. 5: Quantitative Organbelastung der Minipigs zu vier Zeitpunkten nach der
Infektion. ... 43 Abb. 6: Quantitative Belastung der intestinalen Organe (Jejunum, Ileum,
Caecum, Colon) im Verlauf der Infektion.. ... 44 Abb. 7: Prozentualer Anteil positiv getesteter Organproben im Bezug zum
Zeitpunkt nach der Infektion. ... 45 Abb. 8: Prozentualer Anteil der infizierten Tiere, die Y. enterocolitica mit den
Faeces ausschieden. ... 46 Abb. 9: Bestimmung der Serumantikörper-Titer mittels ELISA im Verlauf der
Infektion.. ... 47 Abb. 10: Quantitative Organbelastung der Minipigs am siebten Tag (A) bzw. am
21. Tag (B) p.i... ... 51 Abb. 11: Qualitative Organbelastung mit Yersinia enterocolitica Serotyp O:3
Stamm Y1 (YeO:3) oder Serotyp O:8 Stamm 8081v (YeO:8). ... 53 Abb. 12: Bakterielle Ausscheidung mit den Faeces nach Infektion mit YeO:3
Stamm Y1 oder YeO:8 Stamm 8081v.. ... 54 Abb. 13: Bakterielle Ausscheidung mit den Faeces nach Infektion mit YeO:3
Stamm Y1 oder YeO:8 Stamm 8081v. ... 55 Abb. 14: Bestimmung der Serumantikörper-Titer mittels ELISA im Verlauf der
oralen Infektion mit YeO:3 Stamm Y1 bzw. YeO:8 Stamm 8081v. ... 56
Abb. 15: Quantitative Belastung der Tonsillen und der intestinalen Organe der einzelnen Minipig-Ferkel mit Y. enterocolitica Serotyp O:3 Stamm Y1
(YeO:3 wt) und der RovA-Stabilitätsmutante YE14 (YeO:3 RovAP98) ... 60 Abb. 16: Quantitative Belastung der Tonsillen und der intestinalen Organe der
einzelnen Minipig-Ferkel mit Y. enterocolitica Serotyp O:3 Stamm Y1 (wt) und der RovA-Stabilitätsmutante YE14 (RovAP98) im Verhältnis zum
Anteil des Inokulums. ... 61 Abb. 17: Quantitative Belastung der Tonsillen und der intestinalen Organe der
einzelnen Minipig-Ferkel durch die RovA-Stabilitätsmutante YE14 (RovAP98) im Verhältnis zur Belastung durch den Wildtypstamm Y1
innerhalb desselben Tieres. ... 62 Abb. 18: Qualitative Organbelastung mit Yersinia enterocolitica Serotyp O:3
Stamm Y1 (YeO:3) und der RovA-Stabilitätsmutante YE14 (YeO:3
RovAP98) am siebten (A) und am 21. (B) Tag p.i.. ... 64 Abb. 19: Bakterielle Ausscheidung mit den Faeces nach Koinfektion mit YeO:3
Stamm Y1 (YeO:3) und der RovA-Stabilitätsmutante YE14 (YeO:3
RovAP98). ... 65 Abb. 20: Bestimmung der Serumantikörper-Titer mittels ELISA vor und nach
oraler Infektion mit YeO:3 Stamm Y1 und der RovA-Stabilitätsmutante
YE14. ... 66 Abb. 21: Quantitative Belastung der Tonsillen und der intestinalen Organe der
einzelnen Minipig-Ferkel mit YeO:3 Stamm YE13 (YeO:3wt) und der
PinvAIS1667-Mutante YE15 (YeO:3ΔIS1667). ... 69 Abb. 22: Quantitative Belastung der Tonsillen und der intestinalen Organe der
einzelnen Minipig-Ferkel mit YeO:3 Stamm YE13 (YeO:3wt) und der PinvAIS1667-Mutante YE15 (YeO:3ΔIS1667) im Verhältnis zum Anteil des Inokulums. ... 70 Abb. 23: Quantitative Belastung der Tonsillen und der intestinalen Organe der
einzelnen Minipig-Ferkel durch die PinvAIS1667-Mutante YE15
(YeO:3ΔIS1667) im Verhältnis zur Belastung durch den Wildtypstamm
YE13 innerhalb desselben Tieres. ... 70 Abb. 24: Qualitative Organbelastung mit Yersinia enterocolitica Serotyp O:3
Stamm YE13 (YeO:3 wt) und der PinvAIS1667-Mutante YE15
(YeO:3ΔIS1667) am siebten (A) und am 21. (B) Tag p.i.. ... 72
Abb. 25: Bakterielle Ausscheidung mit den Faeces nach Koinfektion mit YeO:3 Stamm YE13 (YeO:3 wt) und der PinvAΔIS1667-Mutante YE15 (YeO:3
ΔIS1667). ... 73 Abb. 26: Bestimmung der Serumantikörper-Titer mittels ELISA vor und nach
oraler Infektion mit YeO:3 Stamm YE13 und der PinvA∆IS1667-Mutante
YE15. ... 74 Abb. 27: Quantitative Belastung der Tonsillen und der intestinalen Organe der
einzelnen Minipig-Ferkel mit YeO:3 Stamm Y1 (YeO:3 wt) und der ΔinvA-Mutante YE21 (YeO:3 ΔinvA). ... 78 Abb. 28: Quantitative Belastung der Tonsillen und der intestinalen Organe der
einzelnen Minipig-Ferkel mit YeO:3 Stamm Y1 (YeO:3 wt) und der ΔinvA-Mutante YE21 (YeO:3 ΔinvA) im Verhältnis zum Anteil des Inokulums. ... 78 Abb. 29: Quantitative Belastung der Tonsillen und der intestinalen Organe der
einzelnen Minipig-Ferkel durch die ΔinvA-Mutante YE21 (YeO:3 ΔinvA) im Verhältnis zur Belastung durch den Wildtypstamm Y1 innerhalb
desselben Tieres. ... 79 Abb. 30: Qualitative Organbelastung mit Yersinia enterocolitica Serotyp O:3
Wildtypstamm Y1 (YeO:3 wt) und der ΔinvA-Mutante YE21 (YeO:3
ΔinvA) am siebten Tag p.i.. ... 82 Abb. 31: Bakterielle Ausscheidung mit den Faeces nach Koinfektion mit YeO:3
Stamm Y1 (YeO:3 wt) und der ΔinvA-Mutante YE21 (YeO:3 ΔinvA).. ... 84 Abb. 32: Quantitative Organbelastung mit YeO:3 Stamm Y1 oder YeO:8 Stamm
8081v nach oraler Infektion im Minipig- (A) und Mausmodell (B). ... 87 Abb. 33: Vergleich der Organbelastungen im Minipig- (A, C, E) und Mausmodell
(B, D, F). ... 90 Abb. 34: Vergleich der Organbelastungen im Minipig- (A, C, E) und Mausmodell
(B, D, F). ... 92 Abb. 35: Vergleich der Organbelastungen im Minipig- (A, C, E) und Mausmodell
(B, D, F). ... 94
Danksagung
Mein Dank gilt Herrn Prof. Dr. Peter Valentin-Weigand für die Überlassung des interessanten Themas, die fachliche Beratung und engagierte Unterstützung während des Projekts.
Bei Frau Dr. Petra Grüning bedanke ich mich für die gute Betreuung und die vielen praktischen Tipps im Labor.
Frau Prof. Dr. Petra Dersch, Julia Schaake, M. Sc., Tatjana Stolz und der gesamten Forschungsgruppe Molekulare Infektionsbiologie vom Helmholtz Zentrum für Infektionsforschung (HZI) in Braunschweig danke ich ganz besonders für die gute Zusammenarbeit, die konstruktiven Gespräche und die Unterstützung an Infektions- und Sektionstagen.
Dr. Alexandra von Altrock, Dr. Doris Höltig, Dunja Herfert, Klaus Schlotter und den Mitarbeitern des Labors der Klinik für kleine Klauentiere danke ich für die Durchführung der hämatologischen und serologischen Untersuchungen, die Archivierung der Proben und ganz besonders für die praktische Unterstützung bei Blutentnahmen, Sektionen und klinischen Notfällen.
Dr. Frauke Seehusen aus dem Institut für Pathologie gilt mein Dank für die histopathologische Untersuchung der Organproben, die geduldige Beantwortung vieler Fragen und ihre Hilfe bei der korrekten Formulierung der Befunde.
Ich danke Herrn Prof. Dr. Lothar Kreienbrock und Herrn Dr. Martin Beyerbach aus dem Institut für Biometrie, Epidemiologie und Informationsverarbeitung für die Beratung und Unterstützung bei der statistischen Auswertung und die geduldige Einarbeitung in das Programm SAS®.
Bei Dr. Stefanie Schmeiser, Günter Thiem und allen anderen Mitarbeitern des Referenzlabors der Europäischen Kommission für die Klassische Schweinepest (KSP) des Instituts für Virologie möchte ich mich ganz herzlich für die freundliche
Unterstützung während der in der Isolierstation durchgeführten Tierversuche bedanken.
Mein Dank gilt ausserdem Werner Scharnhorst, Florian Rögener, Jenny Pawlik, Dörte Krause, Katrin Hail, Henrike Eulenburg und Marina Behling für die Mitarbeit in den Tierversuchen und besonders für die zuverlässige und fürsorgliche Betreuung der Minipigs. Bei Herrn Jens-Oliver Minx vom Lehr- und Forschungsgut Ruthe bedanke ich mich für die nette und unkomplizierte Zusammenarbeit im Vorfeld der Tierversuche, die Ermöglichung von Blutentnahmen, Futterumstellungen und die Übermittlung von Geburtsdaten und Fotos.
Allen Mitarbeitern des Instituts für Mikrobiologie aus den verschiedenen Arbeitsgruppen und Abteilungen danke ich herzlich für die jederzeit von vielen Seiten erfahrene Hilfsbereitschaft und für das nette Arbeitsklima, dass mir viel Spaß an diesem Projekt bescherte.
Den Mitgliedern des Forschungsverbunds FBI-Zoo danke ich für den regen Gedanken-, Ideen- und Ergebnisaustausch, die gute Kooperation und die ebenso informativen wie netten Treffen im Rahmen des Projekts.
Mein besonderer Dank gilt Jörch Merkel für seine geduldige Hilfe bei diversen Computer- und sonstigen Problemen, für Ermunterung und Antrieb, wenn nötig, für nettes und lustiges Beisammensein und für Schokolade.
Meiner Familie und meinen Freunden danke ich für ihren Rückhalt und ihre Unterstützung in allen Lebenslagen, für Glück, Freude, Gelassenheit, Trost, Kraft und einen doppelten Boden.