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Tab. 26: Zellpopulationen (MW ± SD) nach Färbung mit Propidiumjodid (PI) und Fluo-3 in Abhängigkeit von der Inkubationsdauer in Tyrode-basierten Medien. Darstellung nach 12 h Lagerungsdauer bei 17°C.

(n = 42 Ejakulate von 14 Ebern)

Inkubationsdauer [min]

Population Medium * 3 20 40 60 90 120 150 180

TyrBikCa 87,9 ± 2,8 a 59,2 ± 10,9 b 37,0 ± 9,9 c 29,3 ± 7,7 d 25,1 ± 6,6 e 22,2 ± 6,2 f 20,9 ± 5,5 g 19,3 ± 5,7 h TyrCa 90,7 ± 2,6 a 88,1 ± 3,1 b 85,7 ± 4,4 c 83,7 ± 5,6 d 82,0 ± 6,0 e 80,0 ± 6,8 f 76,2 ± 6,3 g 72,3 ± 7,0 h PI-neg. und

Fluo-3-neg.

[%] TyrKontrolle 91,9 ± 2,0 a 89,0 ± 6,8 b 87,4 ± 2,8 c 87,2 ± 3,0 d 86,5 ± 3,4 e 85,2 ± 4,1 f 84,4 ± 4,2 f,g 83,7 ± 3,7 g

TyrBikCa 3,3 ± 1,0 a 11,5 ± 4,7 b 19,3 ± 5,3 c 21,6 ± 6,4 d 23,2 ± 6,3 e 22,9 ± 6,2 d,e 23,3 ± 8,3 e 22,6 ± 8,4 c,d,e TyrCa 2,1 ± 0,8 a,b 2,0 ± 1,2 a 2,7 ± 1,7 b 3,3 ± 2,1 c 3,7 ± 2,0 d 4,8 ± 2,3 e 6,0 ± 2,8 f 8,0 ± 3,9 g PI-neg. und

Fluo-3-pos.

[%] TyrKontrolle 0,5 ± 0,3 a,c,d 0,3 ± 0,3 b 0,4 ± 0,4 a,c,d 0,5 ± 0,3 a 0,4 ± 0,3 c,d 0,4 ± 0,2 a,c 0,4 ± 0,3 a,c 0,4 ± 0,3 b,d

TyrBikCa 9,8 ± 4,9 a 29,2 ± 7,7 b 43,8 ± 9,3 c 49,3 ± 8,3 d 51,9 ± 8,7 e 54,9 ± 8,5 f 55,7 ± 8,6 f 58,0 ± 9,5 g

TyrCa 7,2 ± 2,2 a 10,1 ± 2,7 b 11,6 ± 3,1 c 13,1 ± 4,4 d 14,2 ± 4,6 e 15,2 ± 5,7 e 17,8 ± 5,2 f 19,5 ± 5,6 f PI-pos.

(gesamt)

[%] TyrKontrolle 7,6 ± 2,1 a 10,6 ± 2,3 b 12,1 ± 2,7 c 12,4 ± 2,9 c 13,1 ± 3,4 d 14,5 ± 3,9 e 15,3 ± 4,0 e,f 16,1 ± 3,6 f

a - e) Werte mit unterschiedlichen Buchstaben innerhalb einer Zeile unterscheiden sich (p < 0,05).

*) TyrBikCa = Tyrode mit 15 mM Bikarbonat und 2 mM Calcium TyrCa = Tyrode ohne Bikarbonat, mit 2 mM Calcium Tyr = Tyrode ohne Bikarbonat und Calcium

Inkubationsdauer in Tyrode-basierten Medien. Darstellung nach 24 h Lagerungsdauer bei 17°C.

(n = 42 Ejakulate von 14 Ebern)

Inkubationsdauer [min]

Population Medium * 3 20 40 60 90 120 150 180

TyrBikCa 86,3 ± 2,9 a 59,1 ± 10,1 b 39,9 ± 8,8 c 33,8 ± 6,9 d 29,0 ± 6,0 e 26,7 ± 5,9 f 25,2 ± 6,2 g 24,0 ± 6,1 h TyrCa 89,1 ± 3,0 a 84,7 ± 5,1 b 81,3 ± 5,4 c 78,4 ± 6,7 d 76,6 ± 7,1 e 73,9 ± 6,9 f 69,2 ± 8,7 g 65,5 ± 8,0 h PI-neg. und

Fluo-3-neg.

[%] TyrKontrolle 90,8 ± 2,4 a 87,6 ± 3,1 b 85,2 ± 4,4 c 84,9 ± 3,8 d 83,4 ± 3,9 e 82,6 ± 4,1 f 82,0 ± 4,0 f,g 80,9 ± 4,1 g

TyrBikCa 4,2 ± 1,0 a 11,1 ± 3,5 b 17,1 ± 4,9 c 18,6 ± 5,3 d 19,7 ± 5,9 e 19,3 ± 6,1 d,e 19,4 ± 6,4 d,e 18,6 ± 7,1 c,d,e TyrCa 2,6 ± 0,8 a 3,2 ± 1,8 a 4,6 ± 2,0 b 5,4 ± 2,4 c 6,0 ± 2,3 c,d 6,7 ± 2,5 d 8,8 ± 3,8 e 10,4 ± 4,1 f PI-neg. und

Fluo-3-pos.

[%] TyrKontrolle 0,7 ± 0,5 a,b,c 0,6 ± 0,5 a,c,d 0,8 ± 0,6 b,c 0,8 ± 0,7 b,c 0,8 ± 0,5 c 0,6 ± 0,5 c 0,5 ± 0,4 d 0,4 ± 0,3 d

TyrBikCa 9,2 ± 2,9 a 29,8 ± 8,2 b 42,9 ± 8,4 c 47,6 ± 7,7 d 51,3 ± 6,5 e 53,9 ± 6,5 f 55,1 ± 6,7 f 57,4 ± 7,9 g

TyrCa 8,3 ± 2,6 a 11,9 ± 3,6 b 14,2 ± 4,0 c 16,2 ± 5,0 d 17,4 ± 5,5 e 19,2 ± 5,2 f 22,0 ± 6,6 g 24,1 ± 6,0 g PI-pos.

(gesamt)

[%] TyrKontrolle 8,5 ± 2,5 a 12,0 ± 3,4 b 14,0 ± 2,1 c 14,3 ± 3,5 c 15,9 ± 3,6 d 16,8 ± 3,9 e 17,5 ± 3,8 f 18,6 ± 3,9 g

a - e) Werte mit unterschiedlichen Buchstaben innerhalb einer Zeile unterscheiden sich (p < 0,05).

*) TyrBikCa = Tyrode mit 15 mM Bikarbonat und 2 mM Calcium TyrCa = Tyrode ohne Bikarbonat, mit 2 mM Calcium TyrKontrolle = Tyrode ohne Bikarbonat und Calcium

Inkubationsdauer in Tyrode-basierten Medien. Darstellung nach 72 h Lagerungsdauer bei 17°C.

(n = 42 Ejakulate von 14 Ebern)

Inkubationsdauer [min]

Population Medium * 3 20 40 60 90 120 150 180

TyrBikCa 83,0 ± 4,0 a 57,5 ± 8,1 b 43,4 ± 6,6 c 38,1 ± 6,1 d 34,4 ± 5,3 e 31,8 ± 5,5 f 29,8 ± 5,2 g 28,6 ± 5,6 g

TyrCa 86,7 ± 3,9 a 80,1 ± 5,0 b 74,5 ± 6,2 c 70,1 ± 7,9 d 66,2 ± 8,7 e 61,6 ± 8,1 f 59,1 ± 7,7 g 55,4 ± 7,5 h PI-neg. und

Fluo-3-neg.

[%] TyrKontrolle 89,5 ± 3,0 a 84,7 ± 4,1 b 82,1 ± 4,3 c 80,2 ± 5,2 d 78,6 ± 5,8 e 77,3 ± 5,7 f 77,3 ± 5,7 f 75,7 ± 4,7 g

TyrBikCa 6,3 ± 1,2 a 12,9 ± 4,3 b 15,2 ± 2,6 c 15,7 ± 2,7 d 15,7 ± 2,6 d 16,1 ± 2,8 d 15,8 ± 2,5 d 15,8 ± 3,7 d TyrCa 3,9 ± 1,4 a 5,8 ± 2,0 b 7,8 ± 2,3 c 9,0 ± 2,4 d 9,7 ± 2,1 e 11,4 ± 2,1 f 12,3 ± 2,0 g 13,9 ± 2,9 h PI-neg. und

Fluo-3-pos.

[%] TyrKontrolle 1,0 ± 0,6 a,d 1,2 ± 0,9 b 1,5 ± 1,0 c 1,5 ± 0,9 c 1,5 ± 1,0 c 1,1 ± 0,8 b,d 0,9 ± 0,5 d 0,9 ± 0,4 a,d

TyrBikCa 10,7 ± 3,4 30,3 ± 6,2 41,4 ± 5,9 46,2 ± 5,7 a 50,0 ± 4,8 a 52,1 ± 5,0 a 54,4 ± 4,8 a 55,6 ± 6,2 a

TyrCa 9,4 ± 2,9 14,1 ± 3,9 17,7 ± 4,8 20,9 ± 6,1 a 24,1 ± 7,0 b 27,0 ± 6,5 c 28,6 ± 6,9 d 30,7 ± 6,5 e PI-pos.

(gesamt)

[%] TyrKontrolle 9,5 ± 2,8 14,1 ± 3,8 16,4 ± 3,8 18,3 ± 4,6 a 19,9 ± 5,1 b 21,6 ± 5,2 c 21,8 ± 5,4 d 23,3 ± 4,5 e

a - e) Werte mit unterschiedlichen Buchstaben innerhalb einer Zeile unterscheiden sich (p < 0,05).

*) TyrBikCa = Tyrode mit 15 mM Bikarbonat und 2 mM Calcium TyrCa = Tyrode ohne Bikarbonat, mit 2 mM Calcium TyrKontrolle = Tyrode ohne Bikarbonat und Calcium

Inkubationsdauer in Tyrode-basierten Medien. Darstellung nach 120 h Lagerungsdauer bei 17°C.

(n = 41 Ejakulate von 14 Ebern)

Inkubationsdauer [min]

Population Medium * 3 20 40 60 90 120 150 180

TyrBikCa 79,9 ± 4,0 a 56,5 ± 6,7 b 44,8 ± 5,6 c 40,8 ± 5,1 d 36,2 ± 5,5 e 34,2 ± 5,1 f 32,7 ± 5,1 g 31,6 ± 5,9 g

TyrCa 82,0 ± 4,1 a 73,4 ± 4,8 b 66,9 ± 5,5 c 61,5 ± 6,4 d 56,5 ± 6,8 e 52,9 ± 7,0 f 49,9 ± 7,6 g 48,1 ± 7,6 h PI-neg. und

Fluo-3-neg.

[%] TyrKontrolle 85,1 ± 7,6 a 80,4 ± 4,5 b 76,2 ± 4,9 c 73,8 ± 6,0 d 71,0 ± 7,3 e 69,1 ± 6,7 f 69,8 ± 6,5 f 69,0 ± 6,1 f

TyrBikCa 8,0 ± 1,5 a 11,9 ± 2,0 b 14,3 ± 2,3 c,d 14,9 ± 2,6 c,d 14,8 ± 2,7 c,d 15,4 ± 3,0 c,d 15,4 ± 2,8 c 14,7 ± 3,3 d TyrCa 6,4 ± 1,7 a 8,1 ± 1,4 b 10,2 ± 2,7 c 11,4 ± 2,3 d 12,8 ± 2,9 e 13,7 ± 3,0 f 15,0 ± 2,9 g 15,2 ± 2,9 g PI-neg. und

Fluo-3-pos.

[%] TyrKontrolle 1,5 ± 0,6 a 1,7 ± 0,8 a,c 2,2 ± 0,9 b,c 2,3 ± 1,1 b 2,3 ± 1,2 b 2,0 ± 1,0 c 1,5 ± 0,9 a 1,2 ± 0,6 d

TyrBikCa 12,1 ± 3,6 a 31,6 ± 5,8 b 40,9 ± 5,0 c 44,3 ± 3,8 d 49,0 ± 4,3 e 50,4 ± 4,0 f 51,8 ± 4,0 g 53,8 ± 4,9 h

TyrCa 11,6 ± 3,2 a 18,5 ± 4,2 b 22,8 ± 4,6 c 27,0 ± 5,3 d 30,6 ± 5,7 e 33,4 ± 5,9 f 35,1 ± 6,8 g 36,3 ± 7,5 g PI-pos.

(gesamt)

[%] TyrKontrolle 11,5 ± 3,4 a 18,0 ± 4,3 b 21,9 ± 4,4 c 24,2 ± 5,1 d 27,1 ± 6,3 e 29,2 ± 5,9 f,g 28,9 ± 5,7 f 30,6 ± 5,3 g

a - e) Werte mit unterschiedlichen Buchstaben innerhalb einer Zeile unterscheiden sich (p < 0,05).

*) TyrBikCa = Tyrode mit 15 mM Bikarbonat und 2 mM Calcium TyrCa = Tyrode ohne Bikarbonat, mit 2 mM Calcium TyrKontrolle = Tyrode ohne Bikarbonat und Calcium

Inkubationsdauer in Tyrode-basierten Medien. Darstellung nach 168 h Lagerungsdauer bei 17°C.

(n = 27 Ejakulate von 11 Ebern)

Inkubationsdauer [min]

Population Medium * 3 20 40 60 90 120 150 180

TyrBikCa 75,2 ± 4,7 a 56,0 ± 5,4 b 45,4 ± 5,8 c 38,9 ± 6,2 d 36,1 ± 6,2 e 32,1 ± 5,6** f 29,7 ± 6,1 g 28,5 ± 6,2 h TyrCa 76,2 ± 4,7 a 65,7 ± 4,4 b 57,1 ± 3,8 c 52,2 ± 4,8 d 46,9 ± 3,9 e 43,6 ± 4,1 f 40,8 ± 5,9 g 39,0 ± 5,1 h PI-neg. und

Fluo-3-neg.

[%] TyrKontrolle 83,5 ± 3,5 a 75,6 ± 4,7 b 70,5 ± 3,7 c 67,1 ± 5,6 d 62,3 ± 6,0 e,f 61,2 ± 6,0 e 59,9 ± 5,4 f 59,9 ± 5,8 f

TyrBikCa 10,1 ± 2,3 a 13,0 ± 4,3 b,d 14,2 ± 3,6 b,d 15,4 ± 3,5 c 14,9 ± 3,8 b,c 14,6 ± 4,3** b,c,d 14,5 ± 3,3 b,c 13,6 ± 3,4 d TyrCa 9,1 ± 2,6 a 10,9 ± 1,9 b 12,9 ± 2,3 c 13,8 ± 3,2 c 14,2 ± 3,4 c 14,4 ± 3,5 c 14,2 ± 3,0 c 14,0 ± 2,9 c PI-neg. und

Fluo-3-pos.

[%] TyrKontrolle 2,1 ± 0,5 a,c 2,5 ± 0,6 a 2,7 ± 0,6 a,b 3,1 ± 0,8 b 2,9 ± 0,7 b 2,6 ± 0,6 a,b 2,0 ± 0,6 b,c 1,7 ± 0,5 b,c

TyrBikCa 14,7 ± 3,2 a 31,1 ± 4,5 b 40,4 ± 4,7 c 44,8 ± 3,5 d 48,3 ± 3,6 e 52,8 ± 3,5**, f 55,3 ± 3,4 g 57,5 ± 4,1 h TyrCa 14,7 ± 3,1 a 23,4 ± 3,8 b 29,7 ± 3,6 c 34,0 ± 4,0 d 38,8 ± 4,4 e 42,0 ± 3,7 f 45,0 ± 5,0 g 46,5 ± 6,2 g PI-pos.

(gesamt)

[%] TyrKontrolle 14,3 ± 3,3 a 21,9 ± 4,6 b 26,8 ± 4,0 c 29,7 ± 5,5 d 34,8 ± 5,9 e 36,2 ± 6,0 e 38,1 ± 5,3 f 38,9 ± 5,4 f

a - e) Werte mit unterschiedlichen Buchstaben innerhalb einer Zeile unterscheiden sich (p < 0,05).

*) TyrBikCa = Tyrode mit 15 mM Bikarbonat und 2 mM Calcium TyrCa = Tyrode ohne Bikarbonat, mit 2 mM Calcium TyrKontrolle = Tyrode ohne Bikarbonat und Calcium

**) n = 26 Ejakulate von 11 Ebern

verschiedenen Tyrode-basierten Medien für 180 min nach unterschiedlicher Lagerungsdauer von flüssig konserviertem Ebersperma bei 17°C.

PI-negative & Fluo-3-negative Spermien

Lagerungs-dauer [h] TyrBikCa * TyrCa * TyrKontrolle *

12 -17,606 ln(t) + 106,65; R2 = 0,97 -0,0956 + 90,257; R2 = 0,98 -1,9237 ln(t) + 94,456; R2 = 0,96 24 -15,923 ln(t) + 102,94; R2 = 0,98 -0,1221 + 87,545; R2 = 0,98 -2,37 ln(t) + 93,968; R2 = 0,97 72 -13,647 ln(t) + 96,835; R2 = 0,99 -0,1658 + 82,953; R2 = 0,95 -3,3739 ln(t) + 93,904; R2 = 0,98 120 -12,091 ln(t) + 91,995; R2 = 0,99 -8,6078 ln(t) + 95,152; R2 = 0,94 -4,2756 ln(t) + 91,065; R2 = 0,96 168 -11,765 ln(t) + 88,867; R2 = 0,99 -6,2386 ln(t) + 89,792; R2 = 0,97 -6,2386 ln(t) + 91,962; R2 = 0,97

PI-negative & Fluo-3-positive Spermien

Lagerungs-dauer [h] TyrBikCa* TyrCa* TyrKontrolle*

12 5,2127 ln(t) - 1,9770; R2 = 0,94 1,9257e0,0077t; R2 = 0,98 3-12t6 -2-9t5 + 4-7t4 - 4-5t3 + 0,0022 t2 - 0,0467t - 0,6228;

R2 = 0,97

24 3,9108 ln(t) + 0,6655; R2 = 0,91 2,9807e0,0072t; R2 = 0,95 -1-10t5 + 7-8t4 - 1-5t3 + 0,0008 t2 + 0,0177t + 0,7388;

R2 = 0,96

72 2,3303 ln(t) + 5,0503; R2 = 0,89 2,5715t0,308; R2 = 0,98 6-9t4 - 1-6t3 - 5-5t2 + 0,0165t + 0,9378;

R2 = 0,97

120 1,8017 ln(t) + 6,6105; R2 = 0,91 4,6432t0,2237; R2 = 0,96 -6-7t3 + 0,0003t2 + 0,0314t + 1,3281 R2 = 0,97

168 9,8396t0,0842; R2 = 0,73 8,0499t0,1182; R2 = 0,93 -8-7t3 + 0,0003t2 + 0,0347t + 1,9531;

R2 = 0,97

PI-positive Spermien (gesamt)

Lagerungs-dauer [h] TyrBikCa* TyrCa* TyrKontrolle*

12 12,172 ln(t) - 3,6503; R2 = 0,98 5,2364t0,2324; R2 = 0,96 6,2114t0,1767; R2 = 0,99 24 12,048 ln(t) - 3,8418; R2 = 0,99 5,8975t0,2525; R2 = 0,97 5,8869t0,1868; R2 = 0,99 72 11,270 ln(t) - 1,6041; R2 = 0,99 6,3265t0,2964; R2 = 0,98 7,4022t0,2194; R2 = 0,99 120 10,290 ln(t) + 1,3887; R2 = 0,99 8,1859t0,2886; R2 = 0,99 8,8280t0,2436; R2 = 0,99 168 10,565 ln(t) + 1,6849; R2 = 0,99 10,373t0, 2897; R2 = 0,99 10,629t0,2537; R2 = 0,99

Tab. 32: Zellpopulationen (MW ± SD) nach Färbung mit Propidiumjodid (PI) und Fluo-3 und 3 min Inkubation in Tyrode-basierten Medien. Darstellung der Veränderungen in Abhängigkeit von der Lagerungsdauer bei 17°C.

(n = 42 Ejakulate von 14 Ebern)

Lagerungsdauer [h]

Population Medium* 12 24 72 120 ** 168 ***

TyrBikCa 87,9 ± 2,8 a 86,3 ± 2,9 b 83,0 ± 4,0 c 79,9 ± 4,1 d 75,2 ± 4,7 e

TyrCa 90,7 ± 2,6 a 89,1 ± 3,0 b 86,7 ± 3,9 c 82,0 ± 4,1 d 76,2 ± 4,7 e PI-neg. &

Fluo-3-neg.

[%]

TyrKontrolle 91,2 ± 2,0 a 90,8 ± 2,4 b 89,5 ± 3,0 c 85,1 ± 7,6 d 83,5 ± 3,6 d

TyrBikCa 3,3 ± 1,0 a 4,2 ± 1,0 b 6,3 ± 1,2 c 8,0 ± 1,5 d 10,1 ± 2,3 e

TyrCa 2,1 ± 0,8 a 2,6 ± 0,8 b 3,9 ± 1,4 c 6,4 ± 1,7 d 9,1 ± 2,6 e PI-neg. &

Fluo-3-pos.

[%]

TyrKontrolle 0,5 ± 0,3 a 0,7 ± 0,5 b 1,0 ± 0,6 c 1,5 ± 0,6 d 2,1 ± 0,5 e

TyrBikCa 9,8 ± 4,9 a,b 9,2 ± 2,9 a 10,7 ± 3,4 b 12,1 ± 3,6 c 14,7 ± 3,3 d

TyrCa 7,2 ± 2,2 a 8,3 ± 2,6 b 9,4 ± 2,9 c 11,6 ± 3,2 d 14,7 ± 3,1 e PI-pos.

(gesamt) [%]

TyrKontrolle 7,6 ± 2,1 a 8,5 ± 2,5 b 9,5 ± 2,8 c 11,5 ± 3,4 d 14,3 ± 3,3 e

a - e) Werte mit unterschiedlichen Buchstaben innerhalb einer Zeile unterscheiden sich (p < 0,05).

*) TyrBikCa = Tyrode mit 15 mM Bikarbonat und 2 mM Calcium TyrCa = Tyrode ohne Bikarbonat, mit 2 mM Calcium TyrKontrolle = Tyrode ohne Bikarbonat und Calcium

**) n = 41 Ejakulate von 14 Ebern

***) n = 27 Ejakulate von 11 Ebern

Tab. 33: Zellpopulationen (MW ± SD) nach Färbung mit Propidiumjodid (PI) und Fluo-3 und 60 min Inkubation in Tyrode-basierten Medien. Darstellung der Veränderungen in Abhängigkeit von der Lagerungsdauer bei 17°C.

(n = 42 Ejakulate von 14 Ebern)

Lagerungsdauer [h]

Population Medium* 12 24 72 120 ** 168 ***

TyrBikCa 29,3 ± 7,7 a 33,8 ± 6,9 b 38,1 ± 6,1 c 40,8 ± 5,1 d 38,9 ± 6,2 e

TyrCa 83,7 ± 5,6 a 78,4 ± 6,7 b 70,1 ± 7,9 c 61,6 ± 6,4 d 52,2 ± 4,8 e PI-neg. &

Fluo-3-neg.

[%]

TyrKontrolle 87,2 ± 3,0 a 84,9 ± 3,8 b 80,2 ± 5,2 c 73,8 ± 6,0 d 67,1 ± 5,6 e

TyrBikCa 21,6 ± 6,4 a 18,6 ± 5,3 b 15,7 ± 2,8 c 14,9 ± 2,6 c 15,4 ± 3,5 c

TyrCa 3,3 ± 2,1 a 5,4 ± 2,4 b 9,0 ± 2,4 c 11,4 ± 2,4 d 13,8 ± 3,2 e PI-neg. &

Fluo-3-pos.

[%]

TyrKontrolle 0,5 ± 0,3 a 0,8 ± 0,7 b 1,5 ± 0,9 c 2,3 ± 1,1 d 3,1 ± 0,8 d

TyrBikCa 49,3 ± 8,3 a 47,6 ± 7,7 a 46,2 ± 5,7 a 44,3 ± 3,9 a 44,8 ± 3,5 a

TyrCa 13,1 ± 4,4 a 16,2 ± 5,0 b 20,9 ± 6,1 c 27,0 ± 5,3 d 34,0 ± 4,0 e PI-pos.

(gesamt) [%]

TyrKontrolle 12,4 ± 2,9 a 14,3 ± 3,5 b 18,3 ± 4,6 c 24,2 ± 5,1 d 29,7 ± 5,5 e

a - e) Werte mit unterschiedlichen Buchstaben innerhalb einer Zeile unterscheiden sich (p < 0,05).

*) TyrBikCa = Tyrode mit 15 mM Bikarbonat und 2 mM Calcium TyrCa = Tyrode ohne Bikarbonat, mit 2 mM Calcium TyrKontrolle = Tyrode ohne Bikarbonat und Calcium

**) n = 41 Ejakulate von 14 Ebern

***) n = 27 Ejakulate von 11 Ebern

Tab. 34: Rangkorrelationskoeffienzenten nach Spearman zwischen der Standardspermatologie und ausgewählten Parametern des Calciuminflux abhängig vom Lagerungszeitpunkt. (n = 194 Wertepaare)

subjektiv geschätzte Motilität

Anteil Spermien mit normalem akrosomalen Rand (NAR) Parameter des

1) PI-neg. & Fluo-3-neg. = Anteil PI-negative & Fluo-3-negative Spermien nach 60 min Inkubation PI-neg. & Fluo-3-pos. = Anteil PI-negative & Fluo-3-positive Spermien nach 60 min Inkubation PI-pos. (gesamt) = Anteil PI-positive Spermien nach 60 min Inkubation

R60 = Allgemeine Reaktivität anhand einer Spermienpopulation nach 60 min Inkubation

R60Bik = Spezifische Reaktivität auf Bikarbonat anhand einer Spermienpopulation nach 60 min Ink.

2) TyrBikCa = Tyrode mit 15 mM Bikarbonat und 2 mM Calcium TyrCa = Tyrode ohne Bikarbonat, mit 2 mM Calcium TyrKontrolle = Tyrode ohne Bikarbonat und Calcium

3) PI-neg. & Fluo-3-neg. = PI-negative & Fluo-3-negative Spermienpopulation PI-pos. (gesamt) = PI-positive Spermienpopulation

Tab. 35: Rangkorrelationskoeffienzenten nach Spearman zwischen einzelnen CASA-Parametern, dem Anteil membranintakter Spermien (PI- und FITC-PNA-negativ) im verdünnten Samen und ausgewählten Parametern des Calciuminflux abhängig vom Lagerungszeitpunkt. (n = 194 Wertepaare)

Gesamtmotilität (CASA) Anteil progressiv motiler Spermien (CASA)

Parameter des Anteil membranintakter Spermien (PI- und FITC-PNA-negativ) Parameter des

1) PI-neg. & Fluo-3-neg. = Anteil PI-negative & Fluo-3-negative Spermien nach 60 min Inkubation PI-pos. (gesamt) = Anteil PI-positive Spermien nach 60 min Inkubation

R60 = Allgemeine Reaktivität anhand einer Spermienpopulation nach 60 min Inkubation

R60Bik = Spezifische Reaktivität auf Bikarbonat anhand einer Spermienpopulation nach 60 min Ink.

2) TyrCa = Tyrode ohne Bikarbonat, mit 2 mM Calcium TyrKontrolle = Tyrode ohne Bikarbonat und Calcium

Tab. 36: CASA-Motilitätsparameter (MW ± SD) nach 10 min Inkubation bei 38°C in Tyrode ohne (TyrKontrolle) und mit 15 mM Bikarbonat (TyrBik) in Abhängigkeit von der Lagerungsdauer bei 17°C (n = 42 Ejakulate von 14 Ebern). Beide Medien enthielten 1 mM EGTA.

Lagerung

Parameter* Medium 12 h 24 h 72 h 120 h ** 168 h ***

TyrKontrolle 77,1 ± 6,9 a 61,2 ± 8,5 b 42,4 ± 13,4 c 32,4 ± 17,0 d 16,1 ± 11,2 e Mot ges.

[%] TyrBik 82,1 ± 6,5 a 68,1 ± 6,3 b 53,1 ± 13,1 c 38,3 ± 16,1 d 22,6 ± 14,4 e TyrKontrolle 74,9 ± 7,4 a,b 75,8 ± 8,3 a 72,0 ± 9,7 b 69,3 ± 14,7 a,b,c 62,0 ± 20,5 c VCL

[µm/s] TyrBik 144,0 ± 10,6 a 142,2 ± 16,2 a 131,6 ± 12,1 b 121,4 ± 15,4 c 97,0 ± 30,3 d TyrKontrolle 32,2 ± 4,3 a 28,0 ± 4,2 b 26,2 ± 3,6 c 26,7 ± 7,3 c,d 21,4 ± 6,9 d VSL

[µm/s] TyrBik 98,6 ± 10,9 a 90,6 ± 15,1 b 89,4 ± 10,3 b 77,3 ± 13,1 c 57,0 ± 18,5 d TyrKontrolle 0,76 ± 0,03 a 0,69 ± 0,03 b,c 0,68 ± 0,05 b,c 0,71 ± 0,06 b 0,62 ± 0,11 c STR TyrBik 0,88 ± 0,03 a,c 0,88 ± 0,03 a 0,91 ± 0,02 b 0,90 ± 0,03 b,c 0,84 ± 0,14 a

TyrKontrolle 0,56 ± 0,03 a 0,53 ± 0,02 b,c 0,52 ± 0,03 a,b 0,54 ± 0,04 c 0,51 ± 0,06 d WOB TyrBik 0,77 ± 0,05 a 0,71 ± 0,04 b 0,73 ± 0,05 b 0,69 ± 0,05 a,b 0,62 ± 0,10 b

a - e) Werte mit unterschiedlichen Buchstaben innerhalb einer Zeile unterscheiden sich (p < 0,05).

*) Mot ges. = Gesamtmotilität VCL = velocity curved line VSL = velocity straight-line STR = straightness (VSL/VAP) WOB = wobble (VAP/VCL)

**) n = 41 Ejakulate von 14 Ebern

***) n = 27 Ejakulate von 11 Ebern

Tab. 37: Differenz (Δ) der CASA-Motilitätsparameter (MW ± SD) zwischen Tyrode mit 15 mM Bikarbonat (TyrBik) und ohne Bikarbonat (TyrKontrolle) nach 10 min Inkubation bei 38°C in Abhängigkeit von der Lagerungsdauer bei 17°C. Beide Medien enthielten 1 mM EGTA. (n = 42 Ejakulate von 14 Ebern)

Lagerungsdauer [h]

Parameter*

12 24 72 120 ** 168 ***

Δ Mot. ges. [%] 5,1 ± 6,7 a,b 6,9 ± 7,7 a,b 10,7 ± 9,3 a 6,0 ± 4,2 b 6,5 ± 9,5 a,b Δ Mot. progr. [%] 11,3 ± 7,3 a,b 12,8 ± 7,7 a,b 15,9 ± 9,8 a 8,8 ± 3,7 b 8,1 ± 8,5 b Δ VAP [µm/s] 68,6 ± 9,6 a 61,5 ± 11,9 b 59,1 ± 9,1 b 47,7 ± 7,4 c 31,2 ± 11,5 d Δ VCL [µm/s] 69,0 ± 10,7 a 66,4 ± 12,7 a 59,6 ± 8,1 b 52,1 ± 9,1 c 35,0 ± 16,6 d Δ VSL [µm/s] 66,4 ± 9,6 a 62,5 ± 12,5 a 63,2 ± 9,9 a 50,5 ± 9,2 b 35,6 ± 12,9 c Δ STR 0,13 ± 0,03 a 0,19 ± 0,03 b 0,23 ± 0,05 c 0,20 ± 0,06 b 0,22 ± 0,11 b,c Δ LIN 0,26 ± 0,06 a 0,27 ± 0,06 a 0,31 ± 0,07 b 0,25 ± 0,08 a 0,21 ± 0,11 a Δ WOB 0,21 ± 0,05 a,b 0,18 ± 0,05 a,c 0,21 ± 0,06 b 0,16 ± 0,07 c 0,11 ± 0,08 d Δ ALH [µm] 0,42 ± 0,23 a 0,42 ± 0,24 a 0,33 ± 0,23 a 0,42 ± 0,34 a 0,31 ± 0,25 a Δ BCF [Hz] 1,1 ± 2,7 a 4,1 ± 2,9 b 6,6 ± 2,6 c 8,5 ± 3,2 d 9,1 ± 3,6 d

a - e) Werte mit unterschiedlichen Buchstaben innerhalb einer Zeile unterscheiden sich (p < 0,05).

*) Mot. ges. = Gesamtmotilität Mot. progr. = Anteil progressive motiler Spermien

VAP = velocity average path VCL = velocity curved line VSL = velocity straight-line STR = straightness (VSL/VAP) LIN = linearity (VAP/VCL) WOB = wobble (VAP/VCL) ALH = amplitude lateral head-displacement BCF = beat cross frequency

**) n = 41 Ejakulate von 14 Ebern

***) n = 27 Ejakulate von 11 Ebern

Tab. 38: Rangkorrelationskoeffizienten nach Spearman zwischen CASA-Parametern einzelner motiler Spermien aus dem Experiment der Motiltätsstimulation durch Bikarbonat. Der Datensatz beinhaltet alle motilen Spermien (n = 16424) aus dem bikarbonathaltigen Stimulationsmedium (TyrBik) und dem Kontrollmedium (TyrKontrolle).

VCL1 VSL1 LIN1 STR1 WOB1 ALH1 BCF1

VAP 0,93 *** 0,96 *** 0,74 *** 0,69 *** 0,71 *** 0,44 *** 0,36 ***

VCL 0,87 *** 0,52 *** 0,55 *** 0,46 *** 0,60 *** 0,33 ***

VSL 0,85 *** 0,83 *** 0,75 *** 0,33 *** 0,40 ***

LIN 0,93 *** 0,90 *** - 0,02 * 0,36 ***

STR 0,73 *** - 0,04 *** 0,34 ***

WOB - 0,02 ** 0,25 ***

ALH 0,15 ***

*) p < 0,05 **) p < 0,01 ***) p < 0,001

1) VAP = velocity average path VCL = velocity curved line VSL = velocity straight-line STR = straightness (VSL/VAP) LIN = linearity (VAP/VCL) WOB = wobble (VAP/VCL) ALH = amplitude of lateral head-displacement BCF = beat cross frequency

Bikarbonat und Calcium (TyrKontrolle) differenziert nach Lagerungsdauer und Ebern. (n = 3 Ejakulate pro Eber)

Anteil der Spermien eines Ebers an den Clustern in %

Lagerung Cluster Eber 1 Eber 2 Eber 3 Eber 4 Eber 5 Eber 6 Eber 7

1 5,9 4,5 0,6 2,0 3,4 2,7 0,2

2 21,4 40,2 40,9 44,0 36,5 22,8 46,6

3 49,5 32,7 48,1 39,3 38,1 49,2 37,9

4 21,4 19,9 9,2 13,6 20,0 25,2 13,5

12 h

5 1,3 2,0 0,8 0,4 1,3 0,0 1,4

1 4,4 2,7 1,0 0,7 2,1 0,6 0,0

2 23,0 46,2 42,5 42,4 47,4 38,0 65,0

3 36,1 21,6 34,0 37,3 26,4 19,5 18,5

4 35,9 27,9 20,8 17,6 23,3 39,2 15,0

24 h

5 0,4 1,3 1,2 1,8 0,8 2,7 1,2

1 1,2 0,9 1,0 0,3 1,1 0,0 0,0

2 41,3 58,3 55,7 58,3 65,1 63,0 74,7

3 28,2 18,7 28,4 21,3 16,0 8,4 9,7

4 28,2 21,3 13,8 18,5 15,4 26,1 9,2

72 h

5 0,6 0,9 0,7 1,6 2,3 2,5 4,1

15 mM Bikarbonat und ohne Calcium (TyrBik) differenziert nach Lagerungsdauer und Ebern. (n = 3 Ejakulate

pro Eber)

Anteil der Spermien eines Ebers an den Clustern in %

Lagerung Cluster Eber 1 Eber 2 Eber 3 Eber 4 Eber 5 Eber 6 Eber 7

1 61,3 65,1 61,7 78,4 73,9 78,7 71,8

2 5,1 3,9 9,6 2,6 5,6 3,5 11,0

3 8,4 5,5 6,8 6,6 3,7 3,8 6,3

4 25,0 24,5 20,7 10,6 16,3 13,7 9,9

12 h

5 0,0 0,7 0,6 0,7 0,6 0,0 0,6

1 61,0 63,0 61,8 77,2 62,2 80,2 49,3

2 5,8 6,4 10,0 3,5 12,8 4,0 23,4

3 5,2 10,4 6,0 4,0 5,5 4,0 8,9

4 27,0 19,0 21,3 14,9 18,0 11,0 15,7

24 h

5 0,8 0,6 0,6 0,2 0,5 0,3 1,5

1 60,5 65,2 67,0 70,3 67,1 68,1 44,0

2 11,1 3,5 7,6 5,8 11,2 4,6 22,0

3 6,1 16,1 7,6 8,9 11,8 14,9 19,5

4 19,7 14,5 17,0 12,7 8,6 11,3 10,7

72 h

5 2,5 0,3 0,0 1,2 1,3 1,1 3,8

Tab. 41: Rangkorrelationskoeffienzenten nach Spearman zwischen der Standard- spermatologie und ausgewählten Parametern der Motilitätststimulation durch Bikarbonat abhängig vom Lagerungszeitpunkt (n = 194 Wertepaare).

subjektiv geschätzte Motilität

Anteil Spermien mit normalem akrosomalen Rand (NAR) Parameter der

Mot. prog. = Anteil progressive motiler Spermien

MI = Anteil Propidiumjodid- und FITC-PNA-negativer Spermien VAP = velocity average path

BCF = beat cross frequency

ΔBCF = Stimulationswert der beat cross frequency

2) TyrBik = Tyrode mit 15 mM Bikarbonat, ohne Calcium TyrKontrolle = Tyrode ohne Bikarbonat und Calcium

Tab. 42: Rangkorrelationskoeffienzenten nach Spearman zwischen einzelnen CASA-Parametern, dem Anteil membranintakter Spermien (PI- und FITC-PNA-negativ) im verdünnten Samen und ausgewählten Parametern der Motilitätstsimulation durch Bikarbonat abhängig vom Lagerungszeitpunkt.

(n = 194 Wertepaare)

Gesamtmotilität (CASA) Parameter der

Motilitätsstimulation 1,2 12 h 24 h 72 h 120 h 168 h

TyrBik 0,20 0,03 0,15 0,44 ** 0,60 **

Mot. ges. TyrKontrolle 0,35 * 0,24 0,10 0,48 ** 0,61 ***

Mot. prog. TyrKontrolle 0,35 * 0,24 0,17 0,49 ** 0,61 ***

TyrBik 0,17 0,40 ** 0,38 * 0,48 ** - 0,01

MI TyrKontrolle 0,31 * 0,56 *** 0,34 * 0,62 *** 0,11

Anteil progressiv motiler Spermien (CASA) Parameter der

Motilitätsstimulation 1,2 12 h 24 h 72 h 120 h 168 h

Mot. ges. TyrKontrolle 0,35 * 0,24 0,19 0,39 * 0,55 **

Mot prog. TyrKontrolle 0,40 ** 0,25 0,28 0,41 ** 0,57 **

MI TyrKontrolle 0,21 0,46 ** 0,27 0,67 *** 0,08

Anteil membranintakter Spermien im verdünnten Samen Parameter der

Motilitätsstimulation 1,2 12 h 24 h 72 h 120 h 168 h

TyrBik 0,36 * 0,53 *** 0,67 *** 0,62 *** 0,37

MI TyrKontrolle 0,35 * 0,63 *** 0,79 *** 0,71 *** 0,46 *

*) p < 0,05 **) p < 0,01 ***) p < 0,001

1) Mot. ges. = Gesamtmotilität

Mot. prog. = Anteil progressive motiler Spermien

MI = Anteil Propidiumjodid- und FITC-PNA-negativer Spermien VAP = velocity average path

BCF = beat cross frequency

ΔBCF = Stimulationswert der beat cross frequency

2) TyrBik = Tyrode mit 15 mM Bikarbonat, ohne Calcium TyrKontrolle = Tyrode ohne Bikarbonat und Calcium

Tab. 43: Rangkorrelationskoeffienzenten nach Spearman zwischen ausgewählten Parametern der Motilitätsstimulation durch Bikarbonat und des

Calciuminflux abhängig vom Lagerungszeitpunkt. (n = 194 Wertepaare) Tabelle 1 von 6

Anteil progressiv motiler Spermien in TyrBik2

Parameter des

1) PI-neg. & Fluo-3-neg. = Anteil PI-negative & Fluo-3-negative Spermien nach 60 min Inkubation PI-neg. & Fluo-3-pos. = Anteil PI-negative & Fluo-3-positive Spermien nach 60 min Inkubation PI-pos. (gesamt) = Anteil PI-positive Spermien nach 60 min Inkubation

R60 = Allgemeine Reaktivität anhand einer Spermienpopulation nach 60 min Inkubation

R60Bik = Spezifische Reaktivität auf Bikarbonat anhand einer Spermienpopulation nach 60 min Ink.

2) TyrBikCa = Tyrode mit 15 mM Bikarbonat und 2 mM Calcium TyrBik = Tyrode mit 15 mM Bikarbonat, ohne Calcium TyrCa = Tyrode ohne Bikarbonat, mit 2 mM Calcium TyrKontrolle = Tyrode ohne Bikarbonat und Calcium

3) PI-neg. & Fluo-3-neg. = PI-negative & Fluo-3-negative Spermienpopulation PI-neg. & Fluo-3-pos. = PI-negative & Fluo-3-negative Spermienpopulation PI-pos. (gesamt) = PI-positive Spermienpopulation

Tab. 44: Rangkorrelationskoeffienzenten nach Spearman zwischen ausgewählten Parametern der Motilitätsstimulation durch Bikarbonat und des

Calciuminflux abhängig vom Lagerungszeitpunkt. (n = 194 Wertepaare) Tabelle 2 von 6

Anteil progressiv motiler Spermien in TyrKontrolle2

Parameter des

1) PI-neg. & Fluo-3-neg. = Anteil PI-negative & Fluo-3-negative Spermien nach 60 min Inkubation PI-neg. & Fluo-3-pos. = Anteil PI-negative & Fluo-3-positive Spermien nach 60 min Inkubation PI-pos. (gesamt) = Anteil PI-positive Spermien nach 60 min Inkubation

R60 = Allgemeine Reaktivität anhand einer Spermienpopulation nach 60 min Inkubation

R60Bik = Spezifische Reaktivität auf Bikarbonat anhand einer Spermienpopulation nach 60 min Ink.

2) TyrBikCa = Tyrode mit 15 mM Bikarbonat und 2 mM Calcium TyrCa = Tyrode ohne Bikarbonat, mit 2 mM Calcium TyrKontrolle = Tyrode ohne Bikarbonat und Calcium

3) PI-neg. & Fluo-3-neg. = PI-negative & Fluo-3-negative Spermienpopulation PI-neg. & Fluo-3-pos. = PI-negative & Fluo-3-negative Spermienpopulation PI-pos. (gesamt) = PI-positive Spermienpopulation

Tab. 45: Rangkorrelationskoeffienzenten nach Spearman zwischen ausgewählten Parametern der Motilitätsstimulation durch Bikarbonat und des

Calciuminflux abhängig vom Lagerungszeitpunkt. (n = 194 Wertepaare) Tabelle 3 von 6

average path velocity (VAP) in TyrBik

Parameter des

1) PI-neg. & Fluo-3-neg. = Anteil PI-negative & Fluo-3-negative Spermien nach 60 min Inkubation PI-neg. & Fluo-3-pos. = Anteil PI-negative & Fluo-3-positive Spermien nach 60 min Inkubation PI-pos. (gesamt) = Anteil PI-positive Spermien nach 60 min Inkubation

R60 = Allgemeine Reaktivität anhand einer Spermienpopulation nach 60 min Inkubation

R60Bik = Spezifische Reaktivität auf Bikarbonat anhand einer Spermienpopulation nach 60 min Ink.

2) TyrBikCa = Tyrode mit 15 mM Bikarbonat und 2 mM Calcium TyrBik = Tyrode mit 15 mM Bikarbonat, ohne Calcium TyrCa = Tyrode ohne Bikarbonat, mit 2 mM Calcium TyrKontrolle = Tyrode ohne Bikarbonat und Calcium

3) PI-neg. & Fluo-3-neg. = PI-negative & Fluo-3-negative Spermienpopulation PI-neg. & Fluo-3-pos. = PI-negative & Fluo-3-negative Spermienpopulation PI-pos. (gesamt) = PI-positive Spermienpopulation

Tab. 46: Rangkorrelationskoeffienzenten nach Spearman zwischen ausgewählten Parametern der Motilitätsstimulation durch Bikarbonat und des

Calciuminflux abhängig vom Lagerungszeitpunkt. (n = 194 Wertepaare) Tabelle 4 von 6

beat cross frequency (BCF) in TyrKontrolle

Parameter des

1) PI-neg. & Fluo-3-neg. = Anteil PI-negative & Fluo-3-negative Spermien nach 60 min Inkubation PI-neg. & Fluo-3-pos. = Anteil PI-negative & Fluo-3-positive Spermien nach 60 min Inkubation PI-pos. (gesamt) = Anteil PI-positive Spermien nach 60 min Inkubation

R60 = Allgemeine Reaktivität anhand einer Spermienpopulation nach 60 min Inkubation

R60Bik = Spezifische Reaktivität auf Bikarbonat anhand einer Spermienpopulation nach 60 min Ink.

2) TyrBikCa = Tyrode mit 15 mM Bikarbonat und 2 mM Calcium TyrCa = Tyrode ohne Bikarbonat, mit 2 mM Calcium TyrKontrolle = Tyrode ohne Bikarbonat und Calcium

3) PI-neg. & Fluo-3-neg. = PI-negative & Fluo-3-negative Spermienpopulation PI-neg. & Fluo-3-pos. = PI-negative & Fluo-3-negative Spermienpopulation PI-pos. (gesamt) = PI-positive Spermienpopulation

Tab. 47: Rangkorrelationskoeffienzenten nach Spearman zwischen ausgewählten Parametern der Motilitätsstimulation durch Bikarbonat und des

Calciuminflux abhängig vom Lagerungszeitpunkt. (n = 194 Wertepaare) Tabelle 5 von 6

Stimulationswert der average path velocity (VAP) Parameter des

1) PI-neg. & Fluo-3-neg. = Anteil PI-negative & Fluo-3-negative Spermien nach 60 min Inkubation PI-neg. & Fluo-3-pos. = Anteil PI-negative & Fluo-3-positive Spermien nach 60 min Inkubation PI-pos. (gesamt) = Anteil PI-positive Spermien nach 60 min Inkubation

R60 = Allgemeine Reaktivität anhand einer Spermienpopulation nach 60 min Inkubation

R60Bik = Spezifische Reaktivität auf Bikarbonat anhand einer Spermienpopulation nach 60 min Ink.

2) TyrBikCa = Tyrode mit 15 mM Bikarbonat und 2 mM Calcium TyrCa = Tyrode ohne Bikarbonat, mit 2 mM Calcium TyrKontrolle = Tyrode ohne Bikarbonat und Calcium

3) PI-neg. & Fluo-3-pos. = PI-negative & Fluo-3-positive Spermienpopulation

Tab. 48: Rangkorrelationskoeffienzenten nach Spearman zwischen ausgewählten Parametern der Motilitätsstimulation durch Bikarbonat und des

Calciuminflux abhängig vom Lagerungszeitpunkt. (n = 194 Wertepaare).

Tabelle 6 von 6

Stimulationswert der beat cross frequency (BCF) Parameter des

1) PI-neg. & Fluo-3-neg. = Anteil PI-negative & Fluo-3-negative Spermien nach 60 min Inkubation PI-neg. & Fluo-3-pos. = Anteil PI-negative & Fluo-3-positive Spermien nach 60 min Inkubation PI-pos. (gesamt) = Anteil PI-positive Spermien nach 60 min Inkubation

R60 = Allgemeine Reaktivität anhand einer Spermienpopulation nach 60 min Inkubation

R60Bik = Spezifische Reaktivität auf Bikarbonat anhand einer Spermienpopulation nach 60 min Ink.

2) TyrBikCa = Tyrode mit 15 mM Bikarbonat und 2 mM Calcium TyrCa = Tyrode ohne Bikarbonat, mit 2 mM Calcium TyrKontrolle = Tyrode ohne Bikarbonat und Calcium

3) PI-neg. & Fluo-3-neg. = PI-negative & Fluo-3-negative Spermienpopulation

Tab. 49: CASA-Motilitätsparameter (MW ± SD) in Abhängigkeit von der Lagerungs-dauer bei 17°C. Selektive Darstellung für Ejakulate, die nachZentrifugation durch Percoll für weitere Experimente zur Verfügung standen (n = 42

Ejakulate von 14 Ebern).

Lagerungsdauer [h]

Parameter *

12 24 72 120 ** 168 ***

Gesamtmotilität [%] 89,0 ± 3,2 a 87,6 ± 2,9 b 86,5 ± 2,9 c 83,4 ± 7,0 c 57,7 ± 24,3 d progr. Motilität [%] 86,4 ± 3,6 a 84,0 ± 3,3 b 83,5 ± 2,9 b 79,0 ± 7,0 c 69,9 ± 11,1 d DAP [µm] 33,0 ± 2,4 a 31,7 ± 4,2 a 33,0 ± 3,8 a 33,3 ± 2,9 a 32,3 ± 4,1 a DCL [µm] 45,7 ± 4,0 a 45,1 ± 5,7 a 45,7 ± 5,3 a 47,3 ± 5,9 a 46,2 ± 7,6 a DSL [µm] 28,1 ± 2,5 a 26,7 ± 4,0 a 28,0 ± 3,7 a 28,0 ± 3,2 a 27,1 ± 3,4 a VAP [µm/s] 71,5 ± 5,4 a 69,0 ± 9,5 a 72,0 ± 8,4 a 72,7 ± 6,5 a 70,5 ± 9,3 a VCL [µm/s] 99,2 ± 8,6 a 98,2 ± 12,6 a 99,5 ± 11,4 a 103,1 ± 12,9 a 100,8 ± 16,9 a VSL [µm/s] 61,0 ± 5,6 a 58,4 ± 9,0 a 61,1 ± 8,4 a 61,2 ± 7,2 a 59,3 ± 7,7 a STR 0,85 ± 0,04 a 0,84 ± 0,04 a 0,84 ± 0,04 a 0,84 ± 0,06 a 0,84 ± 0,05 a LIN 0,61 ± 0,07 a 0,59 ± 0,07 b 0,62 ± 0,08 a 0,60 ± 0,09 a, b 0,59 ± 0,09 a,b WOB 0,72 ± 0,05 a 0,70 ± 0,06 a,b 0,72 ± 0,06 c 0,71 ± 0,07 a, b 0,70 ± 0,06 c ALH [µm] 1,82 ± 0,20 a,c 1,81 ± 0,21 b 1,78 ± 0,24 a 1,81 ± 0,31 a, b 1,87 ± 0,39 b,c BCF [Hz] 42,6 ± 1,9 a 41,9 ± 2,2 a 41,7 ± 3,0 a 41,0 ± 3,0 a 38,6 ± 3,5 a

a - e) Werte mit unterschiedlichen Buchstaben innerhalb einer Zeile unterscheiden sich (p < 0,05).

*) prog. Motilität = progressive Motilität

DAP = distance average path DCL = distance curved line DSL = distance straight-line VAP = velocity average path VCL = velocity curved line VSL = velocity straight-line STR = straightness (VSL/VAP) LIN = linearity (VAP/VCL) WOB = wobble (VAP/VCL) ALH = amplitude of lateral head-displacement BCF = beat cross frequency

**) n = 41 Ejakulate von 14 Ebern

***) n = 27 Ejakulate von 11 Ebern

Tab. 50: Parameter des Spermienchromatinstrukturassay in Abhängigkeit von der Lagerungsdauer bei 17°C (n = 42 Ejakulate von 14 Ebern).

Lagerungsdauer [h]

Parameter*

12 24 72 120 168 **

MW ± SD 2,16 ± 0,56 a 2,17 ± 0,55 a 2,18 ± 0,44 a 2,67 ± 1,25 b 6,15 ± 12,0 b Median 2,08 2,12 2,13 2,29 2,34 Minimum 1,18 1,19 1,54 1,55 1,72

25% Quartil 1,75 1,88 1,86 1,96 1,99

75% Quartil 2,38 2,41 2,37 2,98 3,11

%DFI

Maximum 3,26 3,59 3,08 6,16 47,08 MW ± SD 26,2 ± 5,0 a 26,4 ± 5,2 a 26,5 ± 5,1 a 27,6 ± 5,5 b 28,5 ± 5,8 b

Median 23,7 25,3 25,4 25,7 27,2 Minimum 21,4 20,3 20,2 21,9 21,9

25% Quartil 23,1 23,1 23,7 24,2 24,6

75% Quartil 28,4 28,1 27,2 28,1 32,3

SD-DFI

Maximum 39,1 40,6 41,3 43,4 41,7 MW ± SD 0,61 ± 0,17 a 0,60 ± 0,19 a 0,71 ± 0,20 b 0,77 ± 0,22 b 0,98 ± 0,39 c

Median 0,58 0,57 0,71 0,77 0,94 Minimum 0,41 0,28 0,42 0,42 0,44

25% Quartil 0,50 0,46 0,54 0,57 0,61

75% Quartil 0,65 0,81 0,85 0,96 1,43

HDS [%]

Maximum 1,05 0,88 1,09 1,13 1,55

a - d) Werte mit unterschiedlichen Buchstaben innerhalb einer Zeile unterscheiden sich (p < 0,05).

*) %DFI = Anteil Spermien mit hohem DNA-Fragmentationsindex SD-DFI = Standardabweichung des DNA-Fragmentationsindex (DFI) HDS = Spermien mit hoher DNA-Anfärbbarkeit

MW ± SD = Mittelwert ± Standardabweichung

**) n = 41 Ejakulate von 14 Ebern

Tab. 51: Ergebnisse der Varianzkomponentenschätzung für die Faktoren Eber und Ejakulat einiger ausgewählter Parameter des ersten Versuchsabschnittes.

(n = 42 Ejakulate von 14 Ebern ) Tabelle 1 von 3.

Lagerungsdauer [h]

Parameter *

Varianz-komponente 12 h 24 h 72 h 120 h 168 h **

Eber 27 26 23 0 65

Mot Ejakulat 73 74 77 100 35

Eber 30 48 49 28 37

NAR Ejakulat 70 52 51 72 63

Eber 62 45 37 47 97 ***

MI Ejakulat 38 55 63 53 3 ***

Eber 20 35 11 3 65

Mot. ges. Ejakulat 80 65 89 97 35

Eber 15 21 7 2 65

Mot. prog. Ejakulat 85 79 93 98 35

Eber 21 27 43 0 47

VAP Ejakulat 79 73 57 100 53

Eber 72 62 64 61 0

LIN Ejakulat 28 38 36 39 100

Eber 12 30 45 34 46

ALH Ejakulat 88 70 55 66 54

Eber 38 21 57 28 58

BCF Ejakulat 63 79 43 72 42

Eber 74 66 60 34 42

DFI Ejakulat 26 34 40 66 58

*) Mot. = subjektiv geschätzte Motilität NAR = Spermin mit normalem apikalen Rand MI = Anteil Propidiumjodid- und FITC-PNA-negativer Spermien

Mot. ges. = Gesamtmotilität Mot. prog. = Anteil progressiv motiler Spermien VAP = velocity average path LIN = linearity (VAP/VCL)

ALH = amplitude of lateral head-displacement BCF = beat cross frequency DFI = DNA-Fragmentationsindex

**) n = 41 Ejakulate von 14 Ebern

***) n = 38 Ejakulate von 14 Ebern

Tab. 52: Ergebnisse der Varianzkomponentenschätzung für die Faktoren Eber und Ejakulat einiger ausgewählter Parameter des ersten Versuchsabschnittes.

(n = 42 Ejakulate von 14 Ebern ) Tabelle 2 von 3.

*) Mot. prog. (TyrBik) = Anteil progressiv motiler Spermien in Tyrode mit 15 mM Bikarbonat VAP (TyrBik) = velocity average path in Tyrode mit 15 mM Bikarbonat

LIN (TyrBik) = linearity (VAP/VCL) in Tyrode mit 15 mM Bikarbonat

ALH (TyrBik) = amplitude of lateral head-displacement in Tyrode mit 15 mM Bikarbonat BCF (TyrBik) = beat cross frequency in Tyrode mit 15 mM Bikarbonat

Δ Mot. prog. = Stimulationswert des Anteils progressiv motiler Spermien Δ VAP = Stimulationswert der velocity average path

Δ LIN = Stimulationswert der linearity (VAP/VCL)

Δ ALH = Stimulationswert der amplitude of lateral head-displacement Δ BCF = Stimulationswert der beat cross frequency

**) n = 41 Ejakulate von 14 Ebern

***) n = 27 Ejakulate von 11 Ebern

Tab. 53: Ergebnisse der Varianzkomponentenschätzung für die Faktoren Eber und Ejakulat einiger ausgewählter Parameter des ersten Versuchsabschnittes.

(n = 42 Ejakulate von 14 Ebern ) Tabelle 3 von 3.

*) PI-neg. & Fluo-3-neg. (TyrBikCa) = Anteil PI-negativer & Fluo-3-negativer Spermien nach 60 min Inkubation in Tyrode mit 15 mM Bikarbonat und 2 mM Calcium PI-neg. & Fluo-3-pos. (TyrBikCa) = Anteil PI-negativer & Fluo-3-positiver Spermien nach 60 min

Inkubation in Tyrode mit 15 mM Bikarbonat und 2 mM Calcium R60 = Allgemeine Reaktivität anhand einer Spermienpopulation nach 60 min Inkubation

R60Bik = Spezifische Reaktivität auf Bikarbonat anhand einer Spermienpopulation nach 60 min Ink.

R60Ca = Spezifische Reaktivität auf Calcium anhand einer Spermienpopulation nach 60 min Ink.

**) n = 41 Ejakulate von 14 Ebern

***) n = 27 Ejakulate von 11 Ebern