Materialien

3.1.1 Versuchstiere

Die unterschiedlichen Wirkstoffe wurden an insgesamt 123 Schafen in vier Versuchs-durchgängen getestet. Alle Tiere waren spontan an Moderhinke erkrankt.

Im ersten Durchgang handelte es sich um 22 Graue Gehörnte Heidschnucken, davon 19 Mutterschafe und drei Bocklämmer, die aus einem Moderhinke positiven Betrieb stammten. Zusätzlich wurden zwei reinrassige Merinoschafe aus einem Vorversuch mit in die Versuchsgruppe integriert. Der Landwirt versicherte beim Auftreten von hgr.

Lahmheiten nach Anweisung des Tierarztes die entsprechenden Tiere üblicherweise mit einem Langzeitoxytetrazyklinpräparat zu behandeln. Im Jahr 2010 wurden einzelne Tiere mit Footvax^® (MSD Animal Health, Intervet Deutschland GmbH, Unterschleißheim) geimpft. Zu ihnen zählten auch sieben Probanden aus dem Tierversuch. Die Tiere zeigten das klinische Bild einer subakuten Form der Moder-hinke. Die gemeinsame Haltung mit chronisch an Mauke erkrankten Pferden und der nicht auszuschließende Wildwechsel insbesondere durch einen Mufflon-Bock in der Weideperiode sind aus epidemiologischer Sicht von Interesse. Am Ende des Versuchs nach Ablauf der Wartezeit wurden die Tiere dem Besitzer ausgehändigt.

Die Schafe des zweiten und dritten Versuchsdurchgangs wurden aus einem gemeinsamen Herkunftsbetrieb in die Klinik verbracht. Es handelte sich um Kreuzungstiere unterschiedlichen Alters und Geschlechts mit chronisch deformierten Klauen. Eine Vorbehandlung fand im Betrieb nicht statt. Die Anzahl der Schafe im zweiten und dritten Durchgang betrug 24 respektive 40 Tiere.

Die letzten 35 Tiere aus dem vierten Versuchsdurchgang stammten aus einer Wanderschäferei. Der Schäfer lässt die Tiere auf einen Truppenübungsplatz südlich der Lüneburger Heide grasen. Die Behandlung bzw. Prophylaxe mit Footvax^® (MSD Animal Health, Intervet Deutschland GmbH, Unterschleißheim) hatte er bezüglich einer nicht ausreichenden Senkung der Moderhinke-Prävalenz im Jahr zuvor einge-stellt. Es waren reinrassige schwarzköpfige Fleischschaflämmer unterschiedlichen

Die Tiere der letzten drei Durchgänge wurden nach Ablauf der Wartezeit an einen Viehhändler verkauft, der sie nach einer anschließenden kurzen Mastphase schlachten ließ. Eine langfristige Kontrolle des Behandlungserfolges konnte somit nur für die Heidschnucken aus dem ersten Durchgang erfolgen.

3.1.2 Wirkstoffe

Der Behandlungserfolg von sechs verschiedenen Chemotherapeutika wurde im Vergleich zu einer standardisierten Klauenbadlösung geprüft.

Zu den Antibiotika zählten unter anderem die in Kapitel 2.3.4.1 beschriebenen neueren Vertreter der Makrolide, nämlich Tilmicosin (Tilmodil^®, 300 mg/ml, Injektionslösung für Schafe und Rinder, WDT-Wirtschaftsgenossenschaft Deutscher Tierärzte eG, Garbsen), Tulathromycin (Draxxin^®, 100 mg/ml, Injektionslösung für Rinder und Schweine, Pfizer, Karlsruhe), Gamithromycin (Zactran^®, 150 mg/ml, Injektionslösung für Rinder, Merial, Toulouse, Frankreich) und Tildipirosin (Zuprevo^®, 180 mg/ml Injektionslösung für Rinder, MSD Animal Health, Intervet Deutschland GmbH, Unterschleißheim). Mit Ausnahme von Tilmicosin ist keiner dieser Wirkstoffe für die Anwendung beim Schaf bzw. die Indikation Moderhinkebehandlung zugelassen. Die übrigen drei Makrolide wurden vom Rind auf das Schaf umgewidmet.

Demgegenüber standen zwei häufig in der Praxis angewendete Wirkstoffe; zum einen ein Oxytetrazyklin in Langzeitformulierung (Baxyl^®, 200 mg/ml, Injektionslösung für Rinder, Schweine und Schafe, WDT-Wirtschaftsgenossenschaft Deutscher Tierärzte eG, Garbsen) und zum anderen ein Kombinationspräparat bestehend aus 50 mg/ml Lincomycin und 100 mg/ml Spectinomycin (Lincospectin^®, Pfizer, Karlsruhe). Baxyl^® hat zwar eine Zulassung für Schafe, jedoch nicht mit der Indikation Moderhinkebehandlung, während Lincospectin^® nicht für Schafe zugelassen ist.

Für die behandelte Kontrollgruppe wurde eine 10 %ige Zinksulfat Klauenbadlösung (Golden Hoof plus^®, Shepfair Products Ltd, Abergavenny, Großbritannien) angesetzt.

Hierfür wurde gemäß Herstellerangaben 1 kg des Inhalts in 10 l Wasser aufgelöst.

Um die Penetration des Zinksulfats in das Klauenhorn zu erhöhen, ist ein Tensid in Golden Hoof plus^® enthalten. Der Rest des trockenen Granulats setzt sich aus Zinksulfat und 6 Teilen Wasser (ZnSO4·6H2O) zusammen.

3.1.3 Geräte und Verbrauchsmaterialien Klauenpflege

- Klauenmesser (Kerbl, Buchbach) - Klauenschere (Kerbl, Buchbach)

- Hufmesser VC 300 V (Aesculap, Tuttlingen)

- Schleifmaschine Seriennummer: 1348.7 (Bosch, Gerlingen)

- Stechschutzhandschuhe Protec^® (Stahlnetz, Bezug über Idealo Internet GmbH, Berlin)

- Einmalhandschuhe Nobaglove^® Latex 240 mm (NOBA Verbandsmittel, Danz GmbH

& Co. KG, Wetter)

- Schutzbrille B–D 18 Pulsafe^® (Bezug über Conrad, Hirschau)

- Lotagen^®-Konzentrat 360 mg/g Policresulen, Konzentrat für Rinder, Schweine, Schafe und Hunde, Ch.-B. THBA 0332, MSD Animal Health, Intervet Deutschland, Unterschleißheim)

- Klauenpflegestand für Schafe Typ XL (Patura, Miltenberg)

Probennahme

- Einmalösen 10 µl Plastic classic Microloops^® (Medical Wire & Equipment, Corsham- Wiltshire, Großbritannien)

- Zahnstocher (PAP STAR GmbH, Kall)

- Einmalhandschuhe Nobaglove^® Latex 240 mm (NOBA Verbandsmittel Danz GmbH

& Co. KG, Wetter)

- Probenröhrchen (Dunn Labortechnik GmbH, Asbach)

- Permanent Marker 400 zum Beschriften (Edding International GmbH, Ahrensburg) - Blut Eugon Agar mit Lincomycin (Herstellung im Institut für Mikrobiologie,

Tierärztliche Hochschule, Hannover)

- Dry Anaerobic Indicator Strips™ (Dickinson and Company, Sparks, Nevada, USA) - Anaerobiertöpfe 2,5 l AnaeroGen^™ (Oxoid, Hampshire, Großbritannien)

- 9 ml EDTA Monovetten^® (Sarstedt, Nümbrecht)

PCR

- Desinfektionstücher Desco Wipes^® (Dr. Schumacher GmbH, Melsungen) - Schnelldesinfektionsmittel Meliseptol^® (Braun, Melsungen)

- Papierhandtücher (Bezug über Rossmann, Burgwedel) - Handschuhe rotiprotect Latex^® puderfrei (Roth, Karlsruhe) - Reaktionsgefäße Safe Seal^® 2 ml (Sarstedt, Nümbrecht)

- Reaktionsgefäße Multiply Biosphere^® 0,2 ml (Sarstedt, Nümbrecht)

- Pipettierhilfen Eppendorf Research Plus^® 0,1 - 2,5 µl, 0,5 – 10 µl, 10 – 100 µl, 20 – 200 µl, 100 – 1000 µl (Eppendorf, Hamburg)

- Pipettierhilfen Pre Cision^® 0,5 – 10 µl, 2 – 20 µl, 20 – 200 µl (Biozym Scientific GmbH, Hessisch Oldendorf)

- Pipettenspitzen Safe Seal-Tips^® professional 10 µl, 100 µl, 300 µl, 1000 µl (Biozym Scientific GmbH, Hessisch Oldendorf)

- Vortexer: MS 2 Minishaker (IKA-Werke GmbH & Co. KG, Staufen)

- Vortexer: MIXOMAT, Vortex Genie 2^® (Scientific Industries GmbH, New York, USA) - Zentrifuge Biofuge pico (Heraeus, Hanau) und Centrifuge 5417R (Eppendorf, Hamburg)

- Wasserschüttelbad 1083 (GFL, Burgwedel) - Alkohol 96 % (Roth, Karlsruhe)

- DNeasy^® Blood &Tissue Kit bestehend aus: DNeasy Mini Spin Columns in 2 ml Collection Tubes, 2 ml Collection Tubes, Buffer AL, Buffer AW1, Buffer AW2, Buffer AE, Proteinase K, Handbuch (QIAGEN, Hilden)

- Sterilbank Hera Safe (Heraeus, Hanau)

- Polymerase Phire Hot Start II, DNA-Polymerase (Finnzymes, Vantaa, Finnland) - Primer (Herstellung Biozym Scientific GmbH, Hessisch Oldendorf)

- 5 x Puffer (Finnzymes, Vantaa, Finnland) - dNTP (Finnzymes, Vantaa, Finnland)

- Wasser für die Molekularbiologie (Roth, Karlsruhe) - Cycler: Mastercycler^® 96 (Eppendorf, Hamburg) - Laborwaage HF-2000G (ADE, Hamburg)

- LE Agarose (Biozym, Scientific GmbH, Hessisch Oldendorf)

- Gel Star^® Nukleinsäurefarbstoff (Biozym Scientific GmbH, Hessisch Oldendorf) - DNA Leiter (100 bp) (Roth, Karlsruhe)

- glycerinhaltiger Farbmarker (eigene Herstellung, siehe 3.2.4.3) - TBE Puffer (eigene Herstellung, siehe 3.2.4.3)

- Aqua bidest. (eigene Herstellung)

- Elektrophoresekammer Com Phor Midi (Bioplastics, Landgraaf, Niederlande) - Spannung (Biometra^® Standard Power Pack, biomedizinische Analytic GmbH, Göttingen)

- Ultraviolettstrahlung (UV) Tisch Flu o Blu (Biozym Scientific GmbH, Hessisch Oldendorf

- Kamera Color Vision Model: XC-003P (Sony, Tokio, Japan) - Mikrowellenherd (SHARP, 800 Watt, Osaka, Japan)

Genotypisierung

- FTA^® Cards (Whatman™, Kent, Großbritannien)

- Pipettierhilfe Eppendorf Research Plus^® 20 – 200 µl (Eppendorf, Hamburg) - Pipettierspitzen Safe Seal-Tips^® professional 100 µl (Biozym Scientific GmbH, Hessisch Oldendorf)

- Handschuhe rotiprotect Latex^® puderfrei (Roth, Karlsruhe)

Behandlung

- Golden Hoof plus^® (Bezug über Shepfair Products Ltd, Abergavenny, Großbritannien)

- Tilmodil^® 300 mg/ml, Injektionslösung für Schafe und Rinder (WDT-Wirtschaftsge-nossenschaft Deutscher Tierärzte eG, Garbsen)

- Zactran^® 150 mg/ml, Injektionslösung für Rinder (Merial GmbH, Toulouse, Frankreich, Bezug über WDT-Wirtschaftsgenossenschaft Deutscher Tierärzte eG, Garbsen)

- Baxyl^® LA 200 mg/ml, Injektionslösung für Rinder, Schweine und Schafe (WDT- Wirtschaftsgenossenschaft Deutscher Tierärzte eG, Garbsen

- Zuprevo^® 180 mg/ml, Injektionslösung für Rinder (MSD Animal Health, Intervet Deutschland GmbH, Unterschleißheim, Bezug über WDT-Wirtschaftsgenossenschaft Deutscher Tierärzte eG, Garbsen)

- Draxxin^® 100 mg/ml, Injektionslösung für Rinder und Schweine (Pfizer, Karlsruhe, Bezug über WDT-Wirtschaftsgenossenschaft Deutscher Tierärzte eG, Garbsen - Lincospectin^® Lösung, 50 mg + 100 mg/ml, Injektionslösung für Schweine, Kälber, Hunde und Katzen (Pfizer, Karlsruhe, Bezug über WDT-Wirtschaftsgenossenschaft Deutscher Tierärzte eG, Garbsen

- Einmalspritzen 1 ml, 2 ml, 5 ml (Henry Schein Vet GmbH, Hamburg)

- Einmalkanülen 1,2 x 40 mm lange Spitze (Henry Schein Vet GmbH, Hamburg)