• Keine Ergebnisse gefunden

All units are abbreviated according to the International Unit System. 

a:              anti 

aa:               aminoacid  a:         ampere  C‐:            Carboxy‐Terminus 

Cdk1:       cyclin dependent kinase1  

cDNA:                 complementary deoxyribonucleic acid  CO2:           carbon dioxid 

DMSO:            Dimethylsulfoxide 

DAPI:            4´, 6‐diamidino‐2‐phenylindole  DMEM:           Dulbecco‘s Modified Eagle Serum  DNA:           deoxyribonucleic acid 

dNTP:            Desoxynucleotide  DTT:            dithiothreitol  E. coli:         Escherichia coli 

ECL:            enhanced chemiluminescence  EDTA:           ethylene‐dinitrilo‐tetraacetic acid  EGTA:       ethylene‐gycol‐tetraacetic acid  engl.:            english 

FACS:          fluorescence activated cell sorter  FCS:           fetal calf serum 

fl           full‐lenght 

GFP:            green fluorescent protein  gl2           GL2‐Luciferase‐siRNA 

GMPCPP:           guanylyl‐(α, β)‐methylene‐diphosphonate  GST:            glutathione S‐transferase  

GTP:            guanosine triphosphate  IF:         immunofluorescence  h:      hour 

HCl:           hydrochloric acid 

Hepes:       N‐2‐Hydroxyethypiperazine‐N’‐2‐ethane  sulfonic acid 

IgG:       Immunoglobulin G 

 

IP:             immunoprecipitation 

IPTG:           isopropyl‐beta‐D‐thiogalactopyranoside  k:            kinetochore 

kb:            kilobasepairs  KCl:         potassiumchlorid  kDa:           kilo Dalton 

Kif:            Kinesin superfamily protein   Kif18A:               Kinesin‐family member 18A  l:            Liter 

LB:            Luria Bertani  M:           milli 

M:       Molar  min:           minute(s) 

Mps1:            monopolar spindle protein 1   MT:            microtubule 

MW:            molecular weight  μ:           micro 

n:            nano 

NaCl:            sodiumchloride  Noc:            nocodazole  OA:           ocadaic acid  OD:      optical density  ORF:           open reading frame 

PAGE:           Polyarcylamid‐gel‐elektrophoresis  PBS:           Phosphate‐buffered saline 

PCR:           Polymerase chain reaction 

PIPES:            1,4‐Piperazinediethanesulfonic acid  Plk1:       Polo‐like kinase 1 

PMSF:             phenylmethylsulfonyl fluoride  RNA:            Ribonucleidacid 

RNAi:        small interference ribonucleic acid  rpm:          rounds per minute 

RT:       room temperature  S674:              serine at position 674 

SAC:        spindle assembly checkpoint  SAP:            Shrimp alkaline phosphatase 

SDS‐PAGE:       Sodium dodecylsulfate polyacrylamid       gelelectrophoresis 

siRNA:            short interfering RNA  TEMED:           Tetramethylethylendiamine  U:            Units  

V:           Volt 

IB:            immunoblotting 

References 

1.  Walczak, C.E., Cai, S. and Khodjakov, A., Mechanisms of chromosome  behaviour during mitosis, Nature Reviews Molecular Cell Biology, 11(2), 91,  2010. 

2.  Kline‐Smith,  S.L.  and  Walczak,  C.E.,  Mitotic  spindle  assembly  and  chromosome segregation: refocusing on microtubule dynamics, Molecular  Cell, 15(3), 317, 2004. 

3.  Scholey, J.M., Brust‐Mascher, I. and Mogilner, A., Cell division, Nature,  422(6933), 746, 2003. 

4.  Walczak, C.E. and Heald, R., Mechanisms of mitotic spindle assembly and  function, International Review of Cytology: A Survey of Cell Biology, Vol 265, 265,  111, 2008. 

5.  Vale, R.D., Reese, T.S. and Sheetz, M.P., Identification of a novel force‐

generating protein, kinesin, involved in microtubule‐based motility, Cell,  42(1), 39, 1985. 

6.  Brady, S.T., A novel brain ATPase with properties expected for the fast  axonal transport motor, Nature, 317(6032), 73, 1985. 

10.  Miki,  H.,  Setou,  M.,  Kaneshiro,  K.  and  Hirokawa,  N.,  All  kinesin  superfamily protein, KIF, genes in mouse and human, Proceedings of the  National Academy of Sciences of the United States of America, 98(13), 7004, 2001. 

11.  Lawrence, C.J., Dawe, R.K., Christie, K.R., Cleveland, D.W., Dawson, S.C.,  Endow, S.A., Goldstein, L.S.B., Goodson, H.V., Hirokawa, N., Howard, J.,  Malmberg,  R.L.,  McIntosh,  J.R.,  Miki,  H.,  Mitchison,  T.J.,  Okada,  Y.,  Reddy,  A.S.N.,  Saxton,  W.M.,  Schliwa,  M.,  Scholey,  J.M.,  Vale,  R.D.,  Walczak, C.E. and Wordeman, L., A standardized kinesin nomenclature,  Journal of Cell Biology, 167(1), 19, 2004. 

12.  Hirokawa, N., Noda, Y., Tanaka, Y. and Niwa, S., Kinesin superfamily  motor proteins and intracellular transport, Nature Reviews Molecular Cell  Biology, 10(10), 682, 2009. 

13.  Rice, S., Lin, A.W., Safer, D., Hart, C.L., Naber, N., Carragher, B.O., Cain,  S.M., Pechatnikova, E., Wilson‐Kubalek, E.M., Whittaker, M., Pate, E.,    

   

 

17.  Hirokawa, N. and Takemura, R., Kinesin superfamily proteins and their  various functions and dynamics, Experimental Cell Research, 301(1), 50, 2004. 

18.  Hirokawa, N. and Takemura, R., Molecular motors and mechanisms of  directional transport in neurons, Nature Reviews Neuroscience, 6(3), 201, 2005. 

19.  Yildiz, A., Tomishige, M., Vale, R.D. and Selvin, P.R., Kinesin walks hand‐

over‐hand, Science, 303(5658), 676, 2004. 

20.  Wordeman, L., How kinesin motor proteins drive mitotic spindle function: 

Lessons from molecular assays, Semin Cell Dev Biol, 21(3), 260, 2010. 

21.  West, R.R., Malmstrom, T. and McIntosh, J.R., Kinesins klp5(+) and klp6(+)  are required for normal chromosome movement in mitosis, J Cell Sci, 115(Pt  5), 931, 2002. 

22.  Garcia, M.A., Koonrugsa, N. and Toda, T., Two kinesin‐like Kin I family  proteins in fission yeast regulate the establishment of metaphase and the  onset of anaphase A, Curr Biol, 12(8), 610, 2002. 

23.  Gatt, M.K., Savoian, M.S., Riparbelli, M.G., Massarelli, C., Callaini, G. and  Glover,  D.M.,  Klp67A  destabilises  pre‐anaphase  microtubules  but  subsequently is required to stabilise the central spindle, Journal of Cell Science,  118(12), 2671, 2005. 

24.  Stumpff, J., von Dassow, G., Wagenbach, M., Asbury, C. and Wordeman,  L., The kinesin‐8 motor Kif18A suppresses kinetochore movements to control  mitotic chromosome alignment, Dev Cell, 14(2), 252, 2008. 

25.  Gupta, M.L., Jr., Carvalho, P., Roof, D.M. and Pellman, D., Plus end‐specific  depolymerase  activity  of  Kip3,  a  kinesin‐8  protein,  explains  its  role  in  positioning the yeast mitotic spindle, Nat Cell Biol, 8(9), 913, 2006. 

26.  DeZwaan, T.M., Ellingson, E., Pellman, D. and Roof, D.M., Kinesin‐related  KIP3 of Saccharomyces cerevisiae is required for a distinct step in nuclear  migration, J Cell Biol, 138(5), 1023, 1997. 

27.  West, R.R., Malmstrom, T., Troxell, C.L. and McIntosh, J.R., Two related  kinesins, klp5+ and klp6+, foster microtubule disassembly and are required  for meiosis in fission yeast, Mol Biol Cell, 12(12), 3919, 2001. 

28.  Gandhi,  R., Bonaccorsi, S.,  Wentworth,  D., Doxsey, S.,  Gatti, M. and  Pereira, A., The Drosophila kinesin‐like protein KLP67A is essential for  mitotic and male meiotic spindle assembly, Mol Biol Cell, 15(1), 121, 2004. 

 

29.  Savoian, M.S., Gatt, M.K., Riparbelli, M.G., Callaini, G. and Glover, D.M.,  Drosophila Klp67A is required for proper chromosome congression and  segregation during meiosis I, J Cell Sci, 117(Pt 16), 3669, 2004. 

30.  Gatt, M.K., Savoian, M.S., Riparbelli, M.G., Massarelli, C., Callaini, G. and  Glover,  D.M.,  Klp67A  destabilises  pre‐anaphase  microtubules  but  subsequently is required to stabilise the central spindle, J Cell Sci, 118(Pt 12),  2671, 2005. 

31.  Zhu, C., Zhao, J., Bibikova, M., Leverson, J.D., Bossy‐Wetzel, E., Fan, J.B.,  Abraham, R.T. and Jiang, W., Functional analysis of human microtubule‐

based motor proteins, the kinesins and dyneins, in mitosis/cytokinesis using  RNA interference, Mol Biol Cell, 16(7), 3187, 2005. 

33.  Savoian, M.S., Gatt, M.K., Riparbelli, M.G., Callaini, G. and Glover, D.M.,  Drosophila Klp67A is required for proper chromosome congression and  segregation during meiosis I, Journal of Cell Science, 117(16), 3669, 2004. 

34.  Varga,  V.,  Helenius,  J.,  Tanaka,  K.,  Hyman,  A.A.,  Tanaka,  T.U.  and  Howard,  J.,  Yeast  kinesin‐8  depolymerizes  microtubules  in  a  length‐

dependent manner, Nat Cell Biol, 8(9), 957, 2006. 

35.  Varga, V., Leduc, C., Bormuth, V., Diez, S. and Howard, J., Kinesin‐8  motors  act  cooperatively  to  mediate  length‐dependent  microtubule  depolymerization, Cell, 138(6), 1174, 2009. 

36.  Cheeseman, I.M. and Desai, A., Molecular architecture of the kinetochore‐

microtubule interface, Nat Rev Mol Cell Biol, 9(1), 33, 2008. 

37.  Cleveland,  D.W.,  Mao,  Y.H.  and  Sullivan,  K.F.,  Centromeres  and  kinetochores: From epigenetics to mitotic checkpoint signaling, Cell, 112(4),  407, 2003. 

38.  Santaguida, S. and Musacchio, A., The life and miracles of kinetochores,  Embo Journal, 28(17), 2511, 2009. 

39.  Nigg, E.A., Mitotic kinases as regulators of cell division and its checkpoints,  Nature Reviews Molecular Cell Biology, 2(1), 21, 2001. 

40.  Kline‐Smith,  S.L.,  Sandall,  S.  and  Desai,  A.,  Kinetochore‐spindle  microtubule interactions during mitosis, Curr Opin Cell Biol, 17(1), 35, 2005. 

41.  Desai, A., Rybina, S., Muller‐Reichert, T., Shevchenko, A., Hyman, A. and  Oegema, K., KNL‐1 directs assembly of the microtubule‐binding interface of  the kinetochore in C. elegans, Genes Dev, 17(19), 2421, 2003. 

42.  McCleland, M.L., Gardner, R.D., Kallio, M.J., Daum, J.R., Gorbsky, G.J.,  Burke, D.J. and Stukenberg, P.T., The highly conserved Ndc80 complex is  required for kinetochore assembly, chromosome congression, and spindle  checkpoint activity, Genes Dev, 17(1), 101, 2003. 

43.  DeLuca, J.G., Moree, B., Hickey, J.M., Kilmartin, J.V. and Salmon, E.D.,  hNuf2  inhibition  blocks  stable  kinetochore‐microtubule  attachment  and  induces mitotic cell death in HeLa cells, J Cell Biol, 159(4), 549, 2002. 

   

 

44.  Ciferri, C., De Luca, J., Monzani, S., Ferrari, K.J., Ristic, D., Wyman, C.,  Stark, H., Kilmartin, J., Salmon, E.D. and Musacchio, A., Architecture of the  human ndc80‐hec1 complex, a critical constituent of the outer kinetochore, J  Biol Chem, 280(32), 29088, 2005. 

45.  Wei, R.R., Sorger, P.K. and Harrison, S.C., Molecular organization of the  Ndc80 complex, an essential kinetochore component, Proc Natl Acad Sci U S  A, 102(15), 5363, 2005. 

46.  Wei, R.R., Al‐Bassam, J. and Harrison, S.C., The Ndc80/HEC1 complex is a  contact point for kinetochore‐microtubule attachment, Nat Struct Mol Biol,  14(1), 54, 2007. 

47.  Cheeseman, I.M., Chappie, J.S., Wilson‐Kubalek, E.M. and Desai, A., The  conserved KMN network constitutes the core microtubule‐binding site of the  kinetochore, Cell, 127(5), 983, 2006. 

48.  Wei, R.R., Schnell, J.R., Larsen, N.A., Sorger, P.K., Chou, J.J. and Harrison,  S.C.,  Structure  of  a  central  component  of  the  yeast  kinetochore:  the  Spc24p/Spc25p globular domain, Structure, 14(6), 1003, 2006. 

49.  Biggins,  S.  and  Walczak,  C.E.,  Captivating  capture:  How  microtubules  attach to kinetochores, Current Biology, 13(11), R449, 2003. 

50.  Ciferri, C., Pasqualato, S., Screpanti, E., Varetti, G., Santaguida, S., Dos  Reis, G., Maiolica, A., Polka, J., De Luca, J.G., De Wulf, P., Salek, M.,  Rappsilber, J., Moores, C.A., Salmon, E.D. and Musacchio, A., Implications  for kinetochore‐microtubule attachment from the structure of an engineered  Ndc80 complex, Cell, 133(3), 427, 2008. 

51.  DeLuca, J.G., Gall, W.E., Ciferri, C., Cimini, D., Musacchio, A. and Salmon,  E.D.,  Kinetochore  microtubule  dynamics  and  attachment  stability  are  regulated by Hec1, Cell, 127(5), 969, 2006. 

52.  Heald, R., Motor function in the mitotic spindle, Cell, 102(4), 399, 2000. 

53.  Heald, R., Mechanisms of mitotic spindle assembly  and function, Faseb  Journal, 21(5), A93, 2007. 

54.  Rieder, C.L. and Salmon, E.D., Motile kinetochores and polar ejection forces  dictate chromosome position on the vertebrate mitotic spindle, J Cell Biol,  124(3), 223, 1994. 

55.  Ke, K., Cheng, J. and Hunt, A.J., The distribution of polar ejection forces  determines the amplitude of chromosome directional instability, Curr Biol,  19(10), 807, 2009. 

56.  Kapoor,  T.M.  and  Compton,  D.A.,  Searching  for  the  middle  ground: 

mechanisms of chromosome alignment during mitosis, Journal of Cell Biology, 

 

58.  Antonio, C., Ferby, I., Wilhelm, H., Jones, M., Karsenti, E., Nebreda, A.R. 

and Vernos, I., Xkid, a chromokinesin required for chromosome alignment  on the metaphase plate, Cell, 102(4), 425, 2000. 

59.  Funabiki,  H.  and  Murray,  A.W.,  The  Xenopus  chromokinesin  Xkid  is  essential for metaphase chromosome alignment and must be degraded to  allow anaphase chromosome movement, Cell, 102(4), 411, 2000. 

60.  Brunet, S. and Vernos, I., Chromosome motors on the move ‐ From motion  to spindle checkpoint activity, Embo Reports, 2(8), 669, 2001. 

61.  Schaar, B.T., Chan, G.K.T., Maddox, P., Salmon, E.D. and Yen, T.J., CENP‐E  function at kinetochores is essential for chromosome alignment, Journal of  Cell Biology, 139(6), 1373, 1997. 

62.  Tanudji, M., Shoemaker, J., LʹItalien, L., Russell, L., Chin, G. and Schebye,  X.M., Gene silencing of CENP‐E by small interfering RNA in HeLa cells  leads to missegregation of chromosomes after a mitotic delay, Molecular  Biology of the Cell, 15(8), 3771, 2004. 

63.  Loughlin, R., Riggs, B. and Heald, R., SnapShot: motor proteins in spindle  assembly, Cell, 134(3), 548, 2008. 

64.  Goshima, G. and Vale, R.D., Cell cycle‐dependent dynamics and regulation  of mitotic kinesins in Drosophila S2 cells, Mol Biol Cell, 16(8), 3896, 2005. 

65.  Mayr, M.I., Hummer, S., Bormann, J., Gruner, T., Adio, S., Woehlke, G. 

and  Mayer,  T.U.,  The  human  kinesin  Kif18A  is  a  motile  microtubule  depolymerase essential for chromosome congression, Curr Biol, 17(6), 488,  2007. 

66.  Jaqaman, K., King, E.M., Amaro, A.C., Winter, J.R., Dorn, J.F., Elliott, H.L.,  McHedlishvili, N., McClelland, S.E., Porter, I.M., Posch, M., Toso, A.,  Danuser, G., McAinsh, A.D., Meraldi, P. and Swedlow, J.R., Kinetochore  alignment within the metaphase plate is regulated by centromere stiffness  and microtubule depolymerases, J Cell Biol, 188(5), 665, 2010. 

67.  Skibbens, R.V., Rieder, C.L. and Salmon, E.D., Kinetochore Motility after  Severing between Sister Centromeres Using Laser Microsurgery  ‐ Evidence  That  Kinetochore  Directional  Instability  and  Position  Is  Regulated  by  Tension, Journal of Cell Science, 108, 2537, 1995. 

68.  Skibbens, R.V., Skeen, V.P. and Salmon, E.D., Directional Instability of  Kinetochore Motility during Chromosome Congression and Segregation in  Mitotic Newt Lung‐Cells  ‐ a Push‐Pull Mechanism, Journal of Cell Biology,  122(4), 859, 1993. 

69.  Waters, J.C., Skibbens, R.V. and Salmon, E.D., Oscillating mitotic newt lung  cell kinetochores are, on average, under tension and rarely push, J Cell Sci,  109 ( Pt 12), 2823, 1996. 

70.  Joglekar, A.P. and Hunt, A.J., A simple, mechanistic model for directional  instability during mitotic chromosome movements, Biophys J, 83(1), 42, 2002. 

   

 

71.  Wordeman, L., Wagenbach, M. and von Dassow, G., MCAK facilitates  chromosome movement by promoting kinetochore microtubule turnover,  Cell Biol, 179(5), 869, 2007. 

72.  Larochelle, S., Merrick, K.A., Terret, M.E., Wohlbold, L., Barboza, N.M.,  Zhang, C., Shokat, K.M., Jallepalli, P.V. and Fisher, R.P., Requirements for  Cdk7 in the assembly of Cdk1/cyclin B and activation of Cdk2 revealed by  chemical genetics in human cells, Mol Cell, 25(6), 839, 2007. 

73.  Hoffmann, I., Clarke, P.R., Marcote, M.J., Karsenti, E. and Draetta, G.,  Phosphorylation and activation of human cdc25‐C by cdc2‐‐cyclin B and its  involvement in the self‐amplification of MPF at mitosis, EMBO J, 12(1), 53,  1993. 

74.  Watanabe, N., Arai, H., Nishihara, Y., Taniguchi, M., Hunter, T. and Osada,  H., M‐phase kinases induce phospho‐dependent ubiquitination of somatic  Wee1 by SCFbeta‐TrCP, Proc Natl Acad Sci U S A, 101(13), 4419, 2004. 

77.  Elowe, S., Hummer, S., Uldschmid, A., Li, X. and Nigg, E.A., Tension‐

sensitive  Plk1  phosphorylation  on  BubR1  regulates  the  stability  of  kinetochore microtubule interactions, Genes Dev, 21(17), 2205, 2007. 

78.  Wong, O.K. and Fang, G., Cdk1 phosphorylation of BubR1 controls spindle  checkpoint arrest and Plk1‐mediated formation of the 3F3/2 epitope, J Cell  Biol, 179(4), 611, 2007. 

79.  Jang, Y.J., Ma, S., Terada, Y. and Erikson, R.L., Phosphorylation of threonine  210 and the role of serine 137 in the regulation of mammalian polo‐like  kinase, J Biol Chem, 277(46), 44115, 2002. 

80.  Jang, Y.J., Lin, C.Y., Ma, S. and Erikson, R.L., Functional studies on the role  of the C‐terminal domain of mammalian polo‐like kinase, Proc Natl Acad Sci  U S A, 99(4), 1984, 2002. 

81.  Lee, K.S., Grenfell, T.Z., Yarm, F.R. and Erikson, R.L., Mutation of the polo‐

box disrupts  localization  and  mitotic functions of  the mammalian  polo  kinase Plk, Proc Natl Acad Sci U S A, 95(16), 9301, 1998. 

82.  Elia, A.E., Cantley, L.C. and Yaffe, M.B., Proteomic screen finds pSer/pThr‐

binding domain localizing Plk1 to mitotic substrates, Science, 299(5610), 1228,  2003. 

83.  Elia,  A.E.,  Rellos,  P., Haire,  L.F.,  Chao,  J.W.,  Ivins,  F.J., Hoepker, K.,  Mohammad,  D.,  Cantley,  L.C.,  Smerdon,  S.J.  and  Yaffe,  M.B.,  The  molecular basis for phosphodependent substrate targeting and regulation of  Plks by the Polo‐box domain, Cell, 115(1), 83, 2003. 

84.  Barr,  F.A.,  Sillje,  H.H.  and  Nigg,  E.A.,  Polo‐like  kinases  and  the  orchestration of cell division, Nat Rev Mol Cell Biol, 5(6), 429, 2004. 

 

85.  Peters, U., Cherian, J., Kim, J.H., Kwok, B.H. and Kapoor, T.M., Probing  cell‐division  phenotype  space and  Polo‐like  kinase function  using small  molecules, Nature Chemical Biology, 2(11), 618, 2006. 

86.  Petronczki, M., Lenart, P. and Peters, J.M., Polo on the rise  ‐ from mitotic  entry to cytokinesis with Plk1, Developmental Cell, 14(5), 646, 2008. 

87.  Cahu, J., Olichon, A., Hentrich, C., Schek, H., Drinjakovic, J., Zhang, C.,  Doherty‐Kirby, A., Lajoie, G. and Surrey, T., Phosphorylation by Cdk1  increases the binding of Eg5 to microtubules in vitro and in Xenopus egg  extract spindles, PLoS One, 3(12), e3936, 2008. 

88.  Espeut, J., Gaussen, A., Bieling, P., Morin, V., Prieto, S., Fesquet, D.,  Surrey, T. and Abrieu, A., Phosphorylation relieves autoinhibition of the  kinetochore motor Cenp‐E, Molecular Cell, 29(5), 637, 2008. 

89.  Mishima, M., Pavicic, V., Gruneberg, U., Nigg, E.A. and Glotzer, M., Cell  cycle regulation of central spindle assembly, Nature, 430(7002), 908, 2004. 

90.  Verhey, K.J. and Hammond, J.W., Traffic control: regulation of kinesin  motors, Nature Reviews Molecular Cell Biology, 10(11), 765, 2009. 

91.  Martin‐Lluesma, S., Stucke, V.M. and Nigg, E.A., Role of Hec1 in spindle  checkpoint signaling and kinetochore recruitment of Mad1/Mad2, Science,  297(5590), 2267, 2002. 

92.  DeLuca, J.G., Dong, Y., Hergert, P., Strauss, J., Hickey, J.M., Salmon, E.D. 

and McEwen, B.F., Hec1 and nuf2 are core components of the kinetochore  outer plate essential for organizing microtubule attachment sites, Mol Biol  Cell, 16(2), 519, 2005. 

93.  Sillje, H.H., Nagel, S., Korner, R. and Nigg, E.A., HURP is a Ran‐importin  beta‐regulated protein that stabilizes kinetochore microtubules in the vicinity  of chromosomes, Curr Biol, 16(8), 731, 2006. 

94.  Hunter, A.W., Caplow, M., Coy, D.L., Hancock, W.O., Diez, S., Wordeman,  L. and Howard, J., The kinesin‐related protein MCAK is a microtubule  depolymerase that forms an ATP‐hydrolyzing complex at microtubule ends,  Molecular Cell, 11(2), 445, 2003. 

95.  Hendzel,  M.J.,  Wei,  Y.,  Mancini,  M.A.,  Van  Hooser,  A.,  Ranalli,  T.,  Brinkley,  B.R.,  Bazett‐Jones,  D.P.  and  Allis,  C.D.,  Mitosis‐specific  phosphorylation of histone H3 initiates primarily within pericentromeric  heterochromatin during G2 and spreads in an ordered fashion coincident  with mitotic chromosome condensation, Chromosoma, 106(6), 348, 1997. 

96.  De Azevedo, W.F., Leclerc, S., Meijer, L., Havlicek, L., Strnad, M. and Kim,  S.H., Inhibition of cyclin‐dependent kinases by purine analogues: crystal  structure of human cdk2 complexed with roscovitine, Eur J Biochem, 243(1‐2),  518, 1997. 

97.  Dephoure,  N.,  Zhou,  C.,  Villen,  J.,  Beausoleil,  S.A.,  Bakalarski,  C.E.,  Elledge, S.J. and Gygi, S.P., A quantitative atlas of mitotic phosphorylation,  Proc Natl Acad Sci U S A, 105(31), 10762, 2008. 

 

 

98.  Nousiainen,  M.,  Sillje,  H.H.,  Sauer,  G.,  Nigg,  E.A.  and  Korner,  R.,  Phosphoproteome analysis of the human mitotic spindle, Proc Natl Acad Sci  U S A, 103(14), 5391, 2006. 

99.  Enserink, J.M. and Kolodner, R.D., An overview of Cdk1‐controlled targets  and processes, Cell Div, 5, 11, 2010. 

100.  Nigg,  E.A.,  Cellular  substrates  of  p34(cdc2)  and  its  companion  cyclin‐

dependent kinases, Trends Cell Biol, 3(9), 296, 1993. 

101.  Santamaria,  A.,  Neef,  R.,  Eberspacher,  U.,  Eis,  K.,  Husemann,  M.,  Mumberg, D., Prechtl, S., Schulze, V., Siemeister, G., Wortmann, L., Barr,  F.A. and Nigg, E.A., Use of the novel Plk1 inhibitor ZK‐thiazolidinone to  elucidate functions of Plk1 in early and late stages of mitosis, Mol Biol Cell,  18(10), 4024, 2007. 

102.  Sarli, V., Huemmer, S., Sunder‐Plassmann, N., Mayer, T.U. and Giannis,  A., Synthesis and biological evaluation of novel EG5 inhibitors, Chembiochem,  6(11), 2005, 2005. 

103.  Nakajima, H., Toyoshima‐Morimoto, F., Taniguchi, E. and Nishida, E.,  Identification of a consensus motif for Plk (Polo‐like kinase) phosphorylation  reveals Myt1 as a Plk1 substrate, J Biol Chem, 278(28), 25277, 2003. 

104.  Peters, C., Brejc, K., Belmont, L., Bodey, A.J., Lee, Y., Yu, M., Guo, J.,  Sakowicz, R., Hartman, J. and Moores, C.A., Insight into the molecular  mechanism of the multitasking kinesin‐8 motor, EMBO J, 2010. 

105.  Ogawa, T., Nitta, R., Okada, Y. and Hirokawa, N., A common mechanism  for  microtubule  destabilizers‐M  type  kinesins  stabilize  curling  of  the  protofilament using the class‐specific neck and loops, Cell, 116(4), 591, 2004. 

106.  Shipley,  K.,  Hekmat‐Nejad,  M.,  Turner,  J.,  Moores,  C.,  Anderson, R.,  Milligan,  R.,  Sakowicz,  R.  and  Fletterick,  R.,  Structure  of  a  kinesin  microtubule depolymerization machine, EMBO J, 23(7), 1422, 2004. 

107.  Tan, D., Rice, W.J. and Sosa, H., Structure of the kinesin13‐microtubule ring  complex, Structure, 16(11), 1732, 2008. 

108.  Moore, A. and Wordeman, L., The mechanism, function and regulation of  depolymerizing kinesins during mitosis, Trends in Cell Biology, 14(10), 537,  2004. 

109.  Helenius, J., Brouhard, G., Kalaidzidis, Y., Diez, S. and Howard, J., The  depolymerizing  kinesin  MCAK  uses  lattice  diffusion  to  rapidly  target  microtubule ends, Nature, 441(7089), 115, 2006. 

110.  Moores, C.A., Yu, M., Guo, J., Beraud, C., Sakowicz, R. and Milligan, R.A.,  A mechanism for microtubule depolymerization by KinI kinesins, Molecular  Cell, 9(4), 903, 2002. 

111.  Howard, J. and Hyman, A.A., Dynamics and mechanics of the microtubule  plus end, Nature, 422(6933), 753, 2003. 

112.  Huang, Y., Yao, Y., Xu, H.Z., Wang, Z.G., Lu, L. and Dai, W., Defects in  chromosome congression and mitotic progression in KIF18A‐deficient cells    

 

      are partly mediated through impaired functions of CENP‐E, Cell Cycle, 8(16),  2643, 2009. 

113.  Putkey,  F.R.,  Cramer,  T.,  Morphew,  M.K.,  Silk,  A.D.,  Johnson,  R.S.,  McIntosh,  J.R.  and  Cleveland,  D.W.,  Unstable  kinetochore‐microtubule  capture and chromosomal instability lagging deletion of CENP‐E, Dev Cell,  3(3), 351, 2002. 

114.  Sardar, H.S., Luczak, V.G., Lopez, M.M., Lister, B.C. and Gilbert, S.P.,  Mitotic Kinesin CENP‐E Promotes Microtubule Plus‐End Elongation, Curr  Biol, 2010. 

115.  Goshima, G., Wollman, R., Stuurman, N., Scholey, J.M. and Vale, R.D.,  Length control of the metaphase spindle, Curr Biol, 15(22), 1979, 2005. 

116.  Tischer, C., Brunner, D. and Dogterom, M., Force‐ and kinesin‐8‐dependent  effects  in  the  spatial  regulation  of  fission  yeast  microtubule  dynamics,  Molecular Systems Biology, 5, 2009. 

117.  Newton, C.N., Wagenbach, M., Ovechkina, Y., Wordeman, L. and Wilson,  L., MCAK, a Kin I kinesin, increases the catastrophe frequency of steady‐

state HeLa cell microtubules in an ATP‐dependent manner in vitro, FEBS  Lett, 572(1‐3), 80, 2004. 

118.  Grissom, P.M., Fiedler, T., Grishchuk, E.L., Nicastro, D., West, R.R. and  McIntosh, J.R., Kinesin‐8 from Fission Yeast: A Heterodimeric, Plus‐End‐

directed Motor that Can Couple Microtubule Depolymerization to Cargo  Movement, Molecular Biology of the Cell, 20(3), 963, 2009. 

119.  Sanchez‐Perez, I., Renwick, S.J., Crawley, K., Karig, I., Buck, V., Meadows,  J.C., Franco‐Sanchez, A., Fleig, U., Toda, T. and Millar, J.B., The DASH  complex and Klp5/Klp6 kinesin coordinate bipolar chromosome attachment  in fission yeast, EMBO J, 24(16), 2931, 2005. 

120.  Westermann, S., Avila‐Sakar, A., Wang, H.W., Niederstrasser, H., Wong, J.,  Drubin,  D.G.,  Nogales,  E.  and  Barnes,  G.,  Formation  of  a  dynamic  kinetochore‐microtubule  interface  through  assembly  of  the  Dam1  ring  complex, Molecular Cell, 17(2), 277, 2005. 

121.  Westermann, S., Wang, H.W., Avila‐Sakar, A., Drubin, D.G., Nogales, E. 

and Barnes, G., The Dam1 kinetochore ring complex moves processively on  depolymerizing microtubule ends, Nature, 440(7083), 565, 2006. 

122.  Grishchuk,  E.L.,  Efremov,  A.K.,  Volkov,  V.A.,  Spiridonov,  I.S.,  Gudimchuk, N., Westermann, S., Drubin, D., Barnes, G., McIntosh, J.R. 

and  Ataullakhanov,  F.I.,  The  Dam1  ring  binds  microtubules  strongly  enough to be a processive as well as energy‐efficient coupler for chromosome 

 

124.  Li, Y., Bachant, J., Alcasabas, A.A., Wang, Y., Qin, J. and Elledge, S.J., The  mitotic spindle is required for  loading  of the DASH  complex  onto the  kinetochore, Genes Dev, 16(2), 183, 2002. 

125.  Chen, Q., Zhang, X., Jiang, Q., Clarke, P.R. and Zhang, C., Cyclin B1 is  localized to unattached kinetochores and contributes to efficient microtubule  attachment and  proper chromosome  alignment  during  mitosis,  Cell Res,  18(2), 268, 2008. 

126.  Knowlton, A.L., Vorozhko, V.V., Lan, W., Gorbsky, G.J. and Stukenberg,  P.T., ICIS and Aurora B coregulate the microtubule depolymerase Kif2a,  Curr Biol, 19(9), 758, 2009. 

127.  Ahonen, L.J., Kallio, M.J., Daum, J.R., Bolton, M., Manke, I.A., Yaffe, M.B.,  Stukenberg, P.T. and Gorbsky, G.J., Polo‐like kinase 1 creates the tension‐

sensing 3F3/2 phosphoepitope and modulates the association of spindle‐

checkpoint proteins at kinetochores, Curr Biol, 15(12), 1078, 2005. 

128.  Lenart,  P.,  Petronczki,  M.,  Steegmaier,  M.,  Di  Fiore,  B.,  Lipp,  J.J.,  Hoffmann, M., Rettig, W.J., Kraut, N. and Peters, J.M., The small‐molecule  inhibitor BI 2536 reveals novel insights into mitotic roles of polo‐like kinase  1, Curr Biol, 17(4), 304, 2007. 

129.  Trinkle‐Mulcahy,  L.,  Andrews,  P.D., Wickramasinghe,  S.,  Sleeman,  J.,  Prescott, A., Lam, Y.W., Lyon, C., Swedlow, J.R. and Lamond, A.I., Time‐

lapse imaging reveals dynamic relocalization of PP1gamma throughout the  mammalian cell cycle, Mol Biol Cell, 14(1), 107, 2003. 

130.  Tournebize, R., Andersen, S.S., Verde, F., Doree, M., Karsenti, E. and  Hyman, A.A., Distinct roles of PP1 and PP2A‐like phosphatases in control of 

Acknowledgements 

I would like to express my deep gratitude to my supervisor Prof. Thomas U. Mayer  for giving me the opportunity to work on the fascinating and exiting Kif18A project.  

He was the one who taught me patiently the different techniques and introduced  me into the field of mitosis and motorproteins, always open to discuss, explain and  help, thereby greatly influencing my current way of performing experiments and  approaching problems. His wide knowledge and his logical way of thinking have  been of great value for me. He gave me an excellent feeling in the lab by choosing  again and again people who with respect to their characters fit well in the lab  thereby creating a wonderful atmosphere in the lab with respect to both working  and personal relationships. 

I am grateful to Prof. Martin Scheffner and Prof. Christof Hauck for agreeing to be  the second referees for my thesis and for their time. 

I would like to thank my labmembers Johanna, Stefan, Julia, Eva, Thommy, Mario,  Anna, Martina, Lucia and the former labmembers Hümmelmann, Jenny, Andi und  Nadine for fruitful discussions and for making me laugh everyday. I really enjoyed  working with you and it was always a big pleasure to be with you. 

I am grateful to Lucia for her friendship and the various non‐lab activities, making  me discover Konstanz and to enjoy life outside the lab. I deeply appreciated and  enjoyed the time we spent together. 

I am grateful to Evelyn for joining me at the walks around the MPI with Packa and  Taylor, for her “Brotzeit” in the late evenings and her computer help. 

I wish to thank my friends in Munich, for their endurance through all the years of  friendship even though I had barely time to meet them. 

My deepest gratitude goes to Mütterchensus, Papa und Berni, for their enduring  support, for beliving in me and for their patience over the last years.  

   

 

I  owe  my  loving  thanks  to  my  friend  Stefan,  for  his  encouragement  and 

I  owe  my  loving  thanks  to  my  friend  Stefan,  for  his  encouragement  and