2.1.1 Chemikalien
Aceton Merck, Darmstadt
Acrylamid/Bisacryl Rotiphorese Gel 30 Roth, Karlsruhe
Ammoniumpersulfat (APS) Biorad, München
Aquamount BDH, England
Borsäure/Borat Merck, Darmstadt
Bovine Serum Albumin (BSA) Sigma, München
Bromphenolblau Merck, Darmstadt
Buthanol Merck, Darmstadt
Coomassie brilliant blue R250 Serva, Heidelberg
Dimethylsulfoxid (DMSO) Serva, Heidelberg
Dodecysulfat-Natriumsalz (SDS) Sigma, München
Dithiothreiol (DTT) Sigma, München
E 64 (trans-Epoxysuccinyl-L-leucyl-Amino-(4-guanidinio)-butane) Sigma, München
EDTA Sigma, München
Essigsäure (99,8%) Riedel de Haen AG, Seelze
Ethanol p.a., absolut Riedel de Haen AG, Seelze
Formaldehyd (37%) Merck, Darmstadt
G50 Push-Columns Stratagen, Heidelberg
Glycerin Merck, Darmstadt
Gluthation-Sepharose-4B-Affinitätssäulen Pharmacia, Uppsala/Schweden
Hämatoxylin Vector, Petersborough/UK
Hi-Trap-Säulen Pharmacia, Uppsala/Schweden
Isopropyl-β-D-thiogalactosid (IPTG) Roth, Karsruhe
Isopropanol Merck, Darmstadt
Lipofectamin Gibco BRL, Eggenstein
Magermilchpulver Difco, Augsburg
Magnesiumchlorid Merck, Darmstadt
Maxi-Präp Präparations-Kit Qiagen, Hilden
Mecaptoethanol Merck, Darmstadt
Mineralöl Sigma, München
Mini-Präp Präparations-Kit Qiagen, Hilden
Natriumacetat Merck, Darmstadt
Natriumchlorid Merck, Darstadt
Natriumcitrat Merck, Darmstadt
Natriumdesoxycholat Merck, Darmstadt
Natriumdodedyl (SDS) Sigma, München
Natriumhydroxyd Plätzchen Merck, Darmstadt
NP-40 Sigma, München
Phenylmethylsulfonylfluorid (PMSF) Boehringer Mannheim
Pikrinsäure Merck, Darmstadt
Protein-Assay nach Bradford, Bio-Rad Biorad, München
Protein-Assay nach Lowry, DC-Protein Assay Biorad, München
ProteinaseK Boehringer Mannheim
Rainbow protein weight marker (14-200 kD) Amersham, Braunschweig
RNaseA Boehringer Mannheim
RNazol B, RNA Extraktionslösung CINNA/BIOTECX
RNA PolyA Extraktionssäulen Qiagen, Hilden
Salzsäure konzentriert Merck, Darmstadt
Sephadex G25 Sigma, München
N, N, N`, N`-Tetramethyl-Ethylendiamin (TEMED) Promega, Heidelberg
Tris-Base Sigma, München
Triton X 100 Merck, Darmstadt
Tween 20 Sigma, München
Xylen-Cyanol Sigma, München
2.1.2 Nukleinsäuren, Nukleotide, Vektoren, Enzyme, Material für RT-PCR pEX-2T-Expressionsvektor Promega, Heidelberg
pGEX-GST-Axl
1kb DNA Leiter Gibco BRL, Eggenstein
2`Deoxynukleosid 5`Triphosphat Boehringer Mannheim
5`γ-33P-dCTP DuPont/NEN, Boston
5`α-33P-dCTP DuPont/NEN, Boston
Oligo dT (p12-p18) Gibco BRL, Eggenstein Reverse Transkriptase (Superscript) Gibco BRL, Eggenstein
RNase Inhibitor Boehringer Mannheim
Taq Polymerase Boehringer Mannheim/Eurogentec
T4Poly Nuceotid Kinase Gibco BRL, Eggenstein
1kb Ladder Gibco BRL, Eggenstein
Autoradiographiekassetten Kodak, Stuttgat Röntgenfilme, Kodak X-OMAT, Kodak Kodak, Stuttgart PCR-Geräte Robocycler Gradient 40 Stratagene, Heidelberg Filmentwicklungsgerät Curix 60 Agfa, Leverkusen Acrylamid-Gelapparaturen Horizontal von Keutz, Reiskirchen
Geltrockner Biorad, München
2.1.3 Primer/Oligonukleotide
GAPDH 5` 5` CGT CTT CAC CAC CAT GGA GA 3`
GAPDH 3` 5` CGG CCA TCA CGC CAC AGT TT 3
CD44std 5` 5` CAG CAA CCC TAC TGA TGA CG 3`
CD44std 3` 5` GCC AAG AGG GAT GCC AAG ATG A 3`
CD44 v2 (mit CD44std 5`) 5` AAG ATG ATT CTT TGA CTC TGA TGG 3`
CD44 v3 (mit CD44std 5`) 5` GTG CTG GAG ATA AAA TCT TCA 3`
CD44 v4 (mit CD44std 5`) 5` CAG TCA TCC TTG TGG TTG TCT G 3`
CD44 v5 (mit CD44std 5`) 5` TGA TGC TCA TGG TGA ATG AGG 3`
CD44 v6 (mit CD44std 5`) 5` CTG TCC CTG TTG TCG AAT GG 3`
CD44 v7 (mit CD44std 5`) 5` GGT GTG AGA TTG GGT TGA AG 3`
CD44 v8 (mit CD44std 3`) 5` ATG GAC TCC AGT CAT AGT ACA ACG 3`
CD44 v9 (mit CD44std 3`) 5` GAG CTT CTC TAC ATC ACA TGA AGG 3`
CD44 v10 (mit CD44std 3`) 5` ATA GGA ATG ATG TCA CAG GTG G 3`
CD44 exon15 (mit CD44std 3`) 5` GAG ACC AAG ACA CAT TCC ACC 3`
CD44 TM (mit Oligo dT) 5`AGT TTG CAT TGC AGT CAA CAG TCG 3`
PJA 2 (Axl C-terminal) 5` GGT GGC TGT GAA GAC GAT GA 3`
PJA 3 (Axl C-terminal) 5` CTC AGA TAC TCC ATG CCA 3`
PJA 11 (Axl N-terminal) 5` TGA GCT TGG CAG CTC AGG TT 3`
PJA 12 (Axl N-terminal) 5` GCA GGC TGA AGA AAG TCC CT 3`
c Mer 3F 5` CAC CTC TGC CTT ACC ACA TCT 3`
cMer 2R 5`ATC CAC AAA AGC AGC CAA AGA 3`
Tyro3 5` 5` CAC TGA GCT GGC TGA CTA AGC CCC 3`
Tyro3 3` 5` AAT GCA TGC ACT TAA GCA GCA GGG 3`
Ron 5` 5` CGG CCC CGG CCA CTC TCA GAG CC 3`
Ron 3` 5` GGG TCA GTG TTG GTG TGG TCA CTG C 3`
Protein S 5` 5` GCC TGG TTA CTG TGG AGA AGG GC 3`
Protein S 3` 5` CGG CAA GTT GTC TTT GAA GGT C 3`
Met 5` 5` CAA AAC AGG TGC AAA GCT GCC AGT G 3`
Met 3` 5` GAG AAG GAT ACG GAG CGA CAC 3`
Ret p5 5` AGG GAT AGG GCC TGG GCT TC 3`
Ret p3 5` TAA CCT CCA CCC CAA GAG AG 3`
gas 6-1 5` CAA TCT CTG TTG AGG AGC TGG 3`
gas 6-2 5` CCG TCA ACC GAG AAG CGC T 3`
HGF 5` 5` GAC TTA CAT CGT CAT ATC TTC TGG GAA CC 3`
HGF 3` 5` CTG TAT CTC AAA CTA ACC ATC CAT CC 3`
GDNF 5` 5` GCG GAA TCG GCA GGC TGC AGC TGC C 3`
GDNF 3` 5` GGC GAT GGG TCT GCA ACA TGC CTG CCC 3`
MSP 5` 5` GAC ACA GTC CTA AAT GTG GCC 3`
MSP 3` 5` CCC CAA GGC ATA TGG CAT CAA GGT 3`
LimK 5` 5` GGG CGC TGG CTC ACT GGG CTC CCC 3`
LimK 3` 5` GCC CCG GAG CGT GCC GCC C 3`
SCF 5` 5` GGA GAA GGC TAC AGG GGC 3`
SCF 3` 5` GAC CCA GGG TCC ATG AGC 3`
c-kit 5` 5` CCT CCT TAC TCA TGG TCG G 3`
c-kit 3` 5` GGG CTG AGC ATC CGG AAG CC 3`
Amphiregulin 5` 5` CCG TCC TCG GGA GCC GAC TAT GAC 3`
Amphiregulin 3` 5` CAT GGA CTT TTC CCC ACA CCG TTC ACC G 3`
Heregulin 5` 5` GTG TGA ATG GAG GGG AGT GCT TCA TGG 3`
Heregulin 3` 5` GTT AAT GTT CTC ATG CGA CAG GCA GAG GC 3`
TGFα5` 5` GTG TTG GCT GCG TGC CAG GCC 3`
TGFα3` 5` CGG ACC TGG CAG CAG TGT ATC AGC 3`
hum-fra1 5` 5` CCA AGC ATC AAC ACC ATG AG 3`
hum-fra1 3` 5` AGG GAG ATA CAA GGT ACA GG 3`
fra1-rat 5` 5` CCT CCA GGG GTG CGA CGC AGG CCC 3`
fra1-rat 3` 5` GGG GCC CGG TGG GCT ACC CGC CCC 3`
erb B2 5` 5` CGC TTT GTG GTC ATC CAG 3`
erb B2 3` 5` CAC TGT ACC GCT GTA GAG 3`
erb B3 5` 5` GGT GAT GGT CAA GTG TTG G 3`
erb B3 3` 5` GGG CAT GTA TCC AGA TG 3`
erb B4 5` 5` GGT CAT GGT CAA ATG TTG G 3`
erb B4 3` 5` CCT CCA TCT CGG TAT AC 3`
EGF-R 5` 5` ACG GAA TCC CTG CCA GCG AG 3`
EGF-R 3` 5` TGC AAG CCA CGG TGG AAT TG 3`
2.1.4 Antikörper und Materialien für Proteinnachweise anti-Axl Antikörper; polyklonales Kaninchen
Antiserum gegen die extrazelluläre Domäne (N-Terminus), Aminosäuren 31-163
eigene Herstellung bei Eurogentec, Belgien
anti CD44 std (Klon SFF-2) Bender MedSystems, Wien anti CD44 v5 (Klon VFF 8) Bender MedSystems, Wien anti CD44 v6 (Klon VFF 7) Bender MedSystems, Wien anti CD44 v7/8 (Klon VFF17) Bender MedSystems, Wien
anti Ki67 (Klon MIB-1) dianova, Hamburg
anti Protein S Behring Diagnostics, Marburg
anti Gas6 Claudio Schneider, Triest
Goat anti-Mouse (E 0433) DAKO, Glostrup/Dänemark Swine anti-Rabbit (E 0353) DAKO, Glostrup/Dänemark
Vectastain ABC-Kit Vector Laborities, Bulinghame/CA
AEC Peroxidase Substrat Kit Vector Laborities, Bulinghame/CA DAB Peroxidase Substrat Kit Vector Laborities, Bulinghame/CA
Hämatoxylin Vector Laborities, Bulinghame/CA
Westernblot-Nitocellulose-Membran, 0,4µm Schleicher & Schuell, Dassel Whatman-3mm Papier Schleicher & Schuell, Dassel Semi-Dry-Elektroblotting Apparatur Biometra, Göttingen
2.1.5 Zellkulturmaterial
Aqua ad injectabila Braun, Melsungen
EDTA 0,02% Boehringer Mannheim Fötales Kälberserum, FCS Gibco BRL, Eggenstein
Geneticin, G418 Gibco BRL, Eggenstein
Glutamin, 200mM Seromed, Wertheim
PBS-Konzentrat Behring Werke, Marburg
RPMI 1640 Medium Gibco BRL, Eggenstein
Selenit, Transferrin, Insulin-Lösung Sigma, München CellTiter 96 Aquenouse One Solution
Proliferations Assay
Promega, Heidelberg
EGF, rekombinant aus S. cerivisiae upstate biotechnology, Lake Placid, NY
Gewebekulturflaschen Greiner; Frickenhausen
24 well-Schalen Greiner, Frickenhausen
Quadriperm-Schalen Heraeus, Hanau
Einfrierrörchen Greiner; Frickenhausen
Neubauerzählkammer Braun, Melsungen
Strerilfilter Millipore, Molsheim
Absaugpumpe Dunn, Aspach
Inkubator Hereaus, Hanau
Sterilbank, Laminar Flow Bioflow, Clan LAF, Meckenheim
Durchlicht-Mikroskop Leica, Heerburg/Schweiz
Umkehr-Mikroskop Leica, Heerburg/Schweiz
Stickstofftank, Chrono Biosafe Messer Griesheim
Wasserbad Hereaus, Hanau
2.1.6 Zellinien
2.1.6.1 Non Small Cell Lung Cancer-Zellinien
EPLC-32M1 Plattenepithelkarzinom
U1752 Plattenepithelkarzinom
LCLC-103H großzelliges Karzinom
U1810 großzelliges Karzinom
LCLC-97TM1 großzelliges Karzinom
NCI-H23 Adenokarzinom
NCI-H125 Adenokarzinom
NCI-H820 Adenokarzinom
NCI-H1573 Adenokarzinom
NCI-H2009 Adenokarzinom
NCI-H2077 Adenokarzinom
NCI-H2126 Adenokarzinom
2.1.6.2 Small Cell Lung Cancer-Zellinien
NCI-H22, -H24 kleinzelliges Karzinom
NCI-H60 kleinzelliges Karzinom
NCI-H69 kleinzelliges Karzinom
DMS79 kleinzelliges Karzinom
NCI-H82 kleinzelliges Karzinom
NCI-H146 kleinzelliges Karzinom
NCI-H510 kleinzelliges Karzinom
NCI-H526 kleinzelliges Karzinom
N592 kleinzelliges Karzinom
NCI-H841 kleinzelliges Karzinom
2.1.6.3 Normale humane Bronchialepithelzellen
NHBE Spenderzellen aus normalem Bronchialepithel
2.1.7 Bakterienkulturmaterial
Bakterien-Inkubator New Brunswick Scientific, USA
Bakterienbrutschrank Heraeus, Hanau
Agar Gibco BRL, Eggenstein
Chloramphenicol Sigma, München
Yeast-Extract Gicbo BRL, Eggenstein
Ampicillin Sigma, München
Select Peptone Gibco BRL, Eggenstein