Publikation - Ergebnisse und Publikation - Die Rolle des Proteins Lipocalin-2 bei immunmediiert

4. Ergebnisse und Publikation

4.1. Publikation

Ergebnisse und Publikation

58 4.2. Ergebnisse Signalement

Insgesamt wurden 157 Serum- und 163 Liquorproben von 140 Hunden in die retrospektive Studie eingeschlossen.

Von 25 Patienten der Gruppe „akute SRMA“ wurden zusätzlich Proben in der „SRMA Remission“ Gruppe analysiert und drei der Patienten wurden mit weiteren Proben in der „SRMA Rezidiv“ Gruppe eingeschlossen. Von einem Patienten lagen nur noch Proben zum Zeitpunkt des SRMA Rezidivs vor.

Bei den übrigen Patienten wurden nur Proben eines Entnahme-Zeitpunkts gemessen.

Bei einigen Patienten konnte nur eine Probenart analysiert werden, da in einigen Fällen zu wenig Probenmaterial vorlag.

Die in die Gruppe „akute SRMA“ aufgenommenen Patienten (n = 36, Liquorproben n

= 35, Serumproben n = 34) gehörten zu den Rassen Boxer (n = 5; 16,2 %), Beagle (n

= 4; 10,8 %), Golden Retriever (n = 4; 10,8 %), Berner Sennenhund (n = 3; 8,1 %), Labrador Retriever (n = 3; 8,1 %), Weimaraner (n= 3; 8,1 %), Brandlbracke (n = 3;

8,1 %), Mischling (n = 2), sowie je ein Vertreter der Rasse Dalmatiner, Deutsch Drahthaar, Deutsch Kurzhaar, Deutscher Pinscher, Deutscher Schäferhund (DSH), Riesenschnauzer, Ungarischer Viszla, Malinois und Nova Scotia Duck Tolling Retriever (NSDTR).

Von diesen Patienten waren 41,6 % weiblich (15/36), 8,4 % weiblich-kastriert (3/36) 47,2 % männlich (17/36) und 2,8 % (1/36) männlich-kastriert.

In der Gruppe „SRMA Remission“ wurden Proben von Hunden aus der obigen Gruppe analysiert (Hunde n = 25, Liquorproben n = 25, Serumproben n = 24).

Zur Gruppe mit „SRMA Rezidiv“ gehörten vier Patienten; entsprechend wurden vier gepaarte Liquor- und Serumproben untersucht. Zwei der untersuchten Hunde mit Rezidiv waren Boxer, die übrigen Patienten waren ein Labrador Retriever und ein Mischling.

Ergebnisse und Publikation

Alle Patienten in der Gruppe „SRMA Rezidiv“ waren weiblich (weiblich-intakt n = 3, weiblich-kastriert n =1).

Das mittlere Alter der Hunde mit akuter SRMA lag bei 13,3 Monaten (3-48 Monate).

52,8 % (19/36) der Hunde mit akuter SRMA waren jünger als ein Jahr, 36,1 % (13/36) waren zwischen 1-2 Jahren alt und 11,1 % (4/36) waren 2-5 Jahre alt.

Zum Entnahmezeitpunkt der Proben aufgrund eines SRMA Rezidivs waren die Hunde im Mittel 33,5 Monate alt (10-53 Monate).

Proben von 17 Hunden (Liquorproben n = 17, Serumproben n = 15) mit MUO wurden im Rahmen der Studie auf ihre NGAL-Konzentration untersucht. Fünf der siebzehn Hunde waren Mischlinge (29,4 %), zwei gehörten zur Rasse Malteser und es war je ein Hund der Rassen Airedale Terrier, Brandbracke, Border Collie, Chihuahua, Entlebucher Sennenhund, Eurasier, Malinois, Mops, Weimaraner, West Highland White Terrier (WHWT) vertreten.

Das mittlere Alter bei Probennahme und Diagnosestellung der Hunde mit MUO lag bei 71,5 Monaten (12-128 Monate).

In die Gruppe „MUO“ wurden zwei weiblich-intakte (11,8 %), sechs weiblich-kastrierte (35,3 %), sowie fünf männlich-intakte (29,4 %) und vier männlich-kastrierte (23,5 %) Hunde aufgenommen.

Es wurden 28 Liquorproben und 31 Serumproben von insgesamt 31 Hunden mit kompressiven Rückenmarksläsionen untersucht. Die Rasseverteilung der Hunde in der Gruppe „kompressive Myelopathie“ mit zervikaler Myelopathie oder Bandscheibenvorfall (IVDH) war wie folgt: Mischling 8/31 (25,8 %), Französische Bulldogge 5/31 (16,1 %), Dackel 5/31 (16,1 %), 2/31 DSH (6,5 %) und je ein Hund der Rassen Beagle, Bolonka Zwetna, Bretonischer Spaniel, Jack Russel Terrier, Labrador Retriever, Papillon, Mops, Rottweiler, Kopov-Bracke, Weimaraner, Westfälische Dachsbracke.

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Die Hunde waren im Mittel bei Diagnosestellung 67,5 Monate alt (21,5-126 Monate).

Drei Patienten der Gruppe waren weiblich (9,7 %), fünf weiblich-kastriert (16,1 %), vierzehn männlich (45,2 %) und neun (29 %) waren männlich-kastriert.

In der Gruppe „idiopathische Epilepsie“ wurden 24 Liquorproben und 22 Serumproben von 24 Hunden mit idiopathischer Epilepsie untersucht. Die aufgeführten Rassen waren: 5/24 Australian Shepherd (20,8 %), 3/24 Mischling (12,5 %), 2/24 Border Collie (8,3 %), 2/24 Labrador Retriever (8,3 %) und je ein Vertreter der Rasse Australian Terrier, Beagle, Beauceron, Schafpudel, DSH, Riesenschnauzer, Großer Schweizer Sennenhund, Landseer, Malinois, Rottweiler, Siberian Husky, Yorkshire Terrier. Das mittlere Alter bei Probennahme (nicht immer übereinstimmend mit Zeitpunkt der Diagnosestellung, da diese oft vorher erfolgte) lag bei 44,5 Monaten (8-109 Monate).

Es wurden in diese Gruppe drei weibliche (12,5 %), sechs weiblich-kastrierte (25 %), neun männliche (37,5 %) und sechs männlich-kastrierte Hunde (25 %) aufgenommen.

Es wurden 21 Liquorproben und 19 Serumproben von 21 Hunden mit intrakraniellen Neoplasien untersucht. Unter den Hunden mit intrakranieller Neoplasie waren 9/21 Mischlinge (42,9 %), 2/21 Malinois (9,5 %), 2/21 Staffordshire Bullterier (9,5 %) und je ein Berner Sennenhund, Bluthund, Boxer, Bulldogge, Cairn Terrier, Gordon Setter, Pointer, Welsh Terrier. Das Alter lag im Mittel bei 105 Monaten zum Zeitpunkt der Diagnosestellung und Probennahme (25-153 Monate). Von den in diese Gruppe aufgenommenen Patienten waren drei weiblich (14,3 %), acht weiblich-kastriert (38,1 %), drei männlich (14,3 %) und sieben männlich-kastriert (33,3 %).

In der Kontrollgruppe (n = 7, orthopädisch/gesund) wurden sieben Liquor- und fünf Serumproben analysiert. Die Gruppe bestand aus vier Beagles (57,1 %), zwei Mischlingen und einem Labrador Retriever. Das mittlere Alter lag bei 46 Monaten (9-140 Monate) bei Probennahme. Die Gruppe bestand aus je zwei weiblichen bzw.

weiblich-kastrierten Hunden, zwei männlichen sowie einem männlich-kastrierten Hund.

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Die weiteren Ergebnisse der Studie bezüglich der NGAL Konzentrationen in Serum und CSF sowie ihre Assoziation mit weiteren Parametern sind in der vorliegenden Publikation dargestellt.

Diskussion

5. Diskussion

Immunmediierte ZNS-Erkrankungen kommen bei Hunden häufig vor und können bis zu 25 % der in der neurologischen Sprechstunde vorgestellten Patienten betreffen (MUNANA u. LUTTGEN 1998; VITALE u. FOSS 2019). Die prämortale Diagnostik beruht vor allem auf dem Ausschluss anderer Pathologien wie Neoplasien oder Infektionskrankheiten (GRANGER et al. 2010; TIPOLD u. SCHATZBERG 2010), da der in vivo Goldstandard der Biopsieentnahme zur Differenzierung einer MUO noch nicht weit verbreitet und mit Risiken sowie teils hohen Kosten verbunden ist (FLEGEL et al. 2012; GUTMANN et al. 2020). Außerdem fehlen weiterhin prognostische Biomarker zur Vorhersage des Therapieerfolgs (CORNELIS et al. 2019) und zum individuellen Anpassen der potentiell mit starken Nebenwirkungen (MERCIER u.

BARNES HELLER 2015; HART u. WADDELL 2016) verbundenen immunsuppressiven Therapie bei SRMA oder MUO. Zwar wurden insbesondere bei SRMA in Form von IgA (MAIOLINI et al. 2012) und CRP (BATHEN-NOETHEN et al.

2008) zwei Biomarker als wertvolle diagnostische Hilfsmittel etabliert, jedoch ist die Diagnosestellung in einigen Fällen noch immer mit Unsicherheit behaftet und eine Aussage über das Rezidivrisiko individueller Patienten ist schwierig.

Mittels Darstellung der Beteiligung von Th17-Zellen und IL-17 an der überschießenden Immunreaktion mit hochgradiger Vaskulitis bei SRMA wurde bereits ein Puzzlestück in der Pathophysiologie der Erkrankung aufgezeigt (FREUNDT-REVILLA et al. 2017), jedoch fehlen weiterhin Informationen zur zugrundeliegenden Signalkaskade und somit auch spezifische Therapieansätze.

Eine Vertiefung der Forschung zu immunmediierten neuroinflammatorischen Prozessen und ihren Pathomechanismen sowie die Etablierung möglicher Biomarker ist daher unverzichtbar. Hierbei ist NGAL in der humanen Diagnostik (MIKE et al. 2019;

WILLIAMS et al. 2019), sowie in Tiermodellen wie der experimentellen autoimmunen Enzephalomyelitis (EAE) (NAM et al. 2014) ein vielversprechender Biomarker und wird als Modulator neuro-immunologischer Abläufe angesehen (IP et al. 2011; NAUDE et al. 2012; BANJARA 2014). Hingegen wurde die Rolle des NGAL bei ZNS-Entzündungen beim Hund bisher nicht untersucht.

Diskussion

Im Rahmen der vorliegenden Studie wurde ein kommerzieller ELISA (Dog NGAL ELISA Kit 043, Bioporto, Hellerup, Denmark) zum Nachweis caninen NGALs erstmals zur Anwendung im CSF beim Hund validiert.

Ziel war es, in verschiedenen Erkrankungen unter Beteiligung des ZNS mit entzündlicher oder nicht primär entzündlicher Komponente (Epilepsie, Bandscheibenvorfall) die NGAL-Konzentrationen in Serum und Liquor zu evaluieren.

Hierdurch sollte untersucht werden, ob beim Hund ein Einfluss des Chemokins NGAL (LEE et al. 2011; RATHORE et al. 2011) auf neuro-immunologische Prozesse und Liquorparameter wie die Zellzahl besteht und ob es Hinweise für eine intrathekale Produktion gibt. Die zu prüfende Hypothese dieser Arbeit war, dass bei Patienten mit entzündlicher ZNS-Erkrankung im Vergleich zu Tieren mit nicht primär entzündlichen Erkrankungen des ZNS eine höhere NGAL-Konzentration im Liquor vorliegt.

Hunde mit entzündlichen Erkrankungen (SRMA, MUO) wiesen im Vergleich zu Hunden mit nicht-entzündlichen Krankheitsbildern (kompressive Myelopathie, intrakranielle Neoplasie, idiopathische Epilepsie) erhöhte NGAL-Konzentrationen im CSF auf. Ferner wurde eine positive Assoziation zwischen NGAL-Konzentration im CSF und Gehalt kernhaltiger Zellen im Liquor gefunden, was als Hinweis auf eine Rolle des NGAL in der Verstärkung der Chemotaxis von Immunzellen zum Ort der Entzündung verstanden werden kann. Die Verstärkung der Immunzellmigration (SICKINGER et al. 2013) und deren Polarisation (ZHAO et al. 2019) durch den Einfluss von NGAL wurde auch in verschiedenen experimentellen Studien sowohl im ZNS als auch in anderen Geweben nachgewiesen. Außerdem wird vermutet, dass NGAL die Permeabilität der Blut-Hirn-Schranke erhöhen kann, zum Beispiel durch Zerstörung von Tight Junctions (EGASHIRA et al. 2016). In Nagermodellen mit artifiziellen zerebrovaskulären Störungen wurde bereits gezeigt, dass bei höherer NGAL-Konzentration eine stärkere Störung der Integrität der Blut-Hirn-Schranke durch Zerstörung der Zell-Zell-Verbindungen besteht (JIN et al. 2014a; EGASHIRA et al.

2016).

Diskussion

Im Vergleich der Untergruppen wurde im CSF bei Patienten mit MUO und akuter SRMA ein signifikant höherer NGAL-Spiegel als bei Hunden mit idiopathischer Epilepsie, kompressiven Myelopathien, intrakranieller Neoplasie und SRMA in Remission nachgewiesen. NGAL-Level im Liquor waren bei akuter SRMA, jedoch nicht bei SRMA Rezidiven und MUO signifikant höher als die Konzentrationen im CSF neurologisch gesunder Hunde der Kontrollgruppe. Hierbei muss jedoch beachtet werden, dass die Zahl der eingeschlossenen Hunde mit SRMA Rezidiv sehr niedrig war (n = 4), da insgesamt keine hohe Rückfallrate in unserer Patientenpopulation vorlag und einige Proben von Hunden mit Rezidiven aufgrund zu geringer Probenmenge nicht mehr genutzt werden konnten. Diese kleine Fallzahl der eingeschlossenen Hunde mit SRMA Rezidiv stellt die Güte der statistischen Aussage zu dieser Gruppe in Frage. Außerdem ist zu bedenken, dass der Überbegriff „MUO“

eine sehr heterogene Gruppe verschiedener entzündlicher Gehirnerkrankungen umfasst und genutzt wird, wenn keine definitive histopathologische Einordung vorliegt (TALARICO u. SCHATZBERG 2010). In unserer Studie konnten aufgrund des retrospektiven Charakters nicht ausschließlich Patienten mit definitiver Diagnose durch histopathologische Untersuchung eines Bioptats oder des Tierkörpers eingeschlossen werden (bestätigte Fälle), sondern es wurden auch Patienten mit starkem Verdacht auf MUO anhand des Signalements und der Befunde in Liquor- und MRT-Untersuchung (GRANGER et al. 2010) als hochwahrscheinliche MUO-Fälle aufgenommen.

Für zukünftige Studien wäre es optimal, nur histopathologisch bestätige Fälle einzuschließen und somit bestenfalls sogar Subtypen autoimmuner Meningoenzephalitiden hinsichtlich der NGAL-Konzentrationen im Liquor und Serum zu untersuchen.

Die statistische Auswertung ergab eine stark positive Assoziation zwischen NGAL-Konzentration und Proteingehalt im Liquor, was durch eine Störung der Blut-Hirn-Schranke und Einstrom von Proteinen aus der Peripherie oder aber durch eine intrathekale erhöhte Synthese von Immunglobulinen und NGAL während neuroinflammatorischer Prozesse verursacht sein kann.

Diskussion

Da auch eine stark positive Assoziation der Konzentrationen von NGAL und IgA im CSF gefunden wurde, spiegelt der Anstieg vermutlich zumindest teilweise eine erhöhte lokale NGAL- und Immunglobulin-Synthese wider (TIPOLD et al. 1994). Eine intrathekale Produktion von NGAL in Endothel- und Gliazellen sowie im Choroidplexus beim Hund erscheint möglich, da dies bereits in Nagermodellen und humanen Proben nachgewiesen wurde (MARQUES et al. 2008; MARQUES et al. 2012; FERREIRA et al. 2015; JHA et al. 2015; AL NIMER et al. 2016).

Eine positive Assoziation zwischen der NGAL- und IgA-Konzentration im CSF kann auf sich überschneidende Signalwege der beiden Entzündungsmediatoren hindeuten.

Chemokine und Proteine, denen eine wichtige Rolle in der Pathogenese der SRMA zugeschrieben werden, sind Interleukin-6 (IL-6) (MAIOLINI et al. 2013), Interleukin-8 (IL-8) (BURGENER et al. 1998), Interleukin-17 (IL-17) (FREUNDT-REVILLA et al.

2017), sowie die Matrixmetalloproteasen (MMP) 2 und 9 (MMP2, MMP9) (SCHWARTZ et al. 2010). Diese Botenstoffe werden laut Zellkulturstudien, sowie experimentellen Mäuse- und Schweinestudien ihrerseits von NGAL moduliert oder beeinflussen selbst die Expression von NGAL (YAN et al. 2001; TVEITA et al. 2008; TE BOEKHORST et al. 2011; HAMZIC et al. 2013; FERREIRA et al. 2014; XU et al. 2015; SHAO et al.

2016a). In einem Gliazell-Modell muriner EAE exprimierten die Zellen höhere MM9-Level nach der Applikation von NGAL und die Hochregulierung der MMP9 führte zu einer stärkeren Störung der Blut-Hirn-Schranke (NAM et al. 2014).

Die Konzentrationen von NGAL in CSF und Serum der untersuchten Hunde zeigten nur eine schwache Assoziation, was die Theorie der intrathekalen NGAL-Synthese stützt.

In neurologisch unauffälligen Hunden mit SRMA unter Therapie (SRMA Remission), die zur Liquoranalyse vor Reduktion der Therapie sechs bis acht Wochen nach Diagnose vorgestellt wurden, wurde ein signifikant niedrigerer NGAL-Gehalt im Liquor im Vergleich zu Patienten mit akuter, unbehandelter SRMA gefunden.

Interessanterweise blieb hingegen in diesen Hunden das Serum-NGAL hingegen noch

Diskussion

wochenlang erhöht, wie es auch für IgA beschrieben ist (LOWRIE et al. 2009b;

TIPOLD u. SCHATZBERG 2010; MAIOLINI et al. 2012).

Dieses Ergebnis sollte in einer prospektiven, zukünftigen Studie mit SRMA-Patienten und synchronisierten Kontrollschemata differenzierter untersucht werden, da es für die Diagnose chronischer SRMA-Fälle vielversprechend sein könnte. Die Ergebnisse der vorliegenden Studie widersprechen Ergebnissen einer experimentellen Studie an Schweinen mit iatrogen induzierter Endotoxämie, bei welcher Hydrokortison einer Erhöhung des NGAL im Plasma entgegenwirkte (SÖDERBERG et al. 2017). Ursache für die unterschiedlichen Ergebnisse bei unseren Patienten mit akuter SRMA, SRMA unter Prednisolongabe und den Schweinen im Tierversuch könnte der unterschiedliche Messzeitpunkt sein, da in der experimentellen Studie der NGAL-Plasmaspiegel nur bis zu 6 Stunden nach der Hydrokortisongabe gemessen wurde, bei uns jedoch die Entnahme der Proben zur Messung der NGAL-Konzentration in den SRMA-Gruppen sowohl vor Therapiebeginn als auch unter Therapie mit Prednisolon nach mehreren Wochen oder Monaten durchgeführt wurde.

Die NGAL-Konzentration im Serum von Patienten mit akuter SRMA sowie SRMA in Remission war signifikant höher als bei Patienten mit Myelopathie, zwischen Patienten mit MUO und Myelopathie gab es hingegen keinen signifikanten Unterschied. Im Gegensatz zu MUO ist SRMA eine systemische Erkrankung, die mit einer neutrophilen Pleozytose im Liquor und peripheren Blut einhergeht (TIPOLD u. SCHATZBERG 2010; BLACK et al. 2019; SPENCE et al. 2019; VITALE u. FOSS 2019). Studien an murinen und humanen Zellkulturen sowie Studien mit lcn2-knockout Mäusen deuten auf einen hohen Einfluss des NGAL auf die Funktion neutrophiler Granulozyten hin (SCHROLL et al. 2012; SHASHIDHARAMURTHY et al. 2013).

MUO ist ein Sammelbegriff für eine heterogene Gruppe verschiedener Pathologien wie GME oder NE (TALARICO u. SCHATZBERG 2010; VITALE u. FOSS 2019), die oft mit einer mononukleären Pleozytose im Liquor, selten jedoch mit einer Pleozytose im peripheren Blut einhergeht (GRANGER et al. 2010). Dies könnte erklären, weshalb die Medianwerte der NGAL-Serumlevel zwischen Patienten mit MUO, der Kontrollgruppe

Diskussion

und den nicht-entzündlichen Patientengruppen (IE, kompressive Myelopathie) laut statistischer Analyse nicht signifikant unterschiedlich waren.

Der Dunn’s-Kruskal-Wallis-post-hoc-Test identifizierte zudem signifikante Unterschiede zwischen den NGAL-Serumkonzentrationen bei Patienten mit akuter SRMA und jenen mit intrakranieller Neoplasie. Dies könnte ebenfalls die systemische Pathogenese der SRMA in Vergleich zu einem abgegrenzten, intrakraniellen Prozess abbilden, da nur ein Patient in der Neoplasie-Gruppe an einem metastasierten Tumorgeschehen (Prostatakarzinom) litt. Jedoch sollten diese Ergebnisse vorsichtig interpretiert werden, da es eine deutliche Überlappung zwischen den Serum-Konzentrationen der beiden Gruppen gab.

Weitere signifikante Unterschiede zwischen den NGAL-Serumkonzentrationen der übrigen Gruppen konnten nicht detektiert werden. Ein möglicher Grund hierfür sind die relativ heterogen zusammengesetzten Gruppen, sowohl bezüglich der Patienten mit MUO, als auch hinsichtlich der Gruppe mit intrakraniellen Neoplasien und kompressiven Myelopathien, da diese Gruppe neben Patienten mit akuten Läsionen auch solche mit subakuten und chronischen Rückenmarksläsionen enthielt. Dies kann zu unterschiedlichen Ausprägungen der Erkrankungen zum Zeitpunkt der Probennahme geführt haben.

Medianwerte und Spannweite der Serumlevel waren großteils vergleichbar mit denen bereits veröffentlichter Studien, die die NGAL-Serumkonzentrationen beim Hund analysierten (AHN u. HYUN 2013; HSU et al. 2014b; COBRIN et al. 2016; JUNG et al.

2018). Dennoch sollte nach diesen Ergebnissen, so wie schon zuvor diskutiert (MARTENSSON u. BELLOMO 2014; COBRIN et al. 2016), in Betracht gezogen werden, dass eine Erhöhung der NGAL-Konzentration im Serum nicht spezifisch für eine renale Dysfunktion ist. Dies spiegelt die komplexe Rolle des NGAL in zahlreichen entzündlichen und neoplastischen Prozessen der inneren Organe wider (CHAKRABORTY et al. 2011; CHAKRABORTY et al. 2012).

Zukünftige Studien zum Vergleich der NGAL-Konzentration im Serum caniner Patienten mit verschiedenen systemisch-entzündlichen, renalen und neoplastischen

Diskussion

Erkrankungen erscheinen sinnvoll, um den Nutzen von Serum-NGAL als Biomarker beim Hund weiter zu evaluieren.

NGAL agiert zudem als Regulator des Eisenstoffwechsels (GOETZ et al. 2002) und könnte im Fall von Blutungen erhöht sein, welche im Rahmen der nekrotisierenden Vaskulitis bei SRMA entstehen (TIPOLD u. SCHATZBERG 2010). Um dies näher zu differenzieren, untersuchten wir eine mögliche Assoziation des Erythrozytengehalts und der NGAL-Konzentration im Liquor (Tabelle im Anhang, Tabelle 3). Jedoch konnte nur eine schwache, positive Assoziation statistisch detektiert werden. Es ist daher davon auszugehen, dass der NGAL-Gehalt nicht in jedem Fall durch Hämorrhagien beeinflusst wird, eventuell abhängig von der Chronizität der Erkrankung. Es ist außerdem möglich, dass die in den Liquorproben gefundenen Erythrozyten iatrogen bei der Liquorentnahme durch Punktion nahegelegener, kleiner Blutgefäße in die Probe gelangten. Weitere Studien sollten eine Gruppe mit zerebrovaskulären Prozessen (Blutung, Infarkt) beinhalten, um die NGAL-Konzentration in Blut und Liquor dieser Hunde zu evaluieren.

Sowohl bei Menschen als auch Hunden wurde NGAL als Biomarker in Serum und Urin zur frühen Detektion der akuten Niereninsuffizienz postuliert (HAASE et al. 2011; AHN u. HYUN 2013; HSU et al. 2014b), es wurde außerdem ein erhöhter Gehalt an NGAL im Urin bei Hunden mit Erkrankung der unteren Harnwege festgestellt (DAURE et al.

2013). Daher wurden in die vorliegende Studie und die statistische Analyse auch renale Funktionsparameter und, falls vorhanden, Ergebnisse der Urinanalyse miteinbezogen (Tabelle siehe Anhang, Tabelle 2). Es wurde jedoch in dieser Studie nur eine schwache, positive Assoziation zwischen der NGAL-Konzentration im Serum und der Plasma-Kreatinin-Konzentration oder dem Leukozytengehalt im Urin festgestellt. Die statistische Auswertung könnte jedoch dadurch beeinflusst sein, dass nur bei einer kleinen Anzahl der Hunde in dieser Studie eine Nierenerkrankung festgestellt wurde (n = 2, histopathologisch bestätigt) und keiner der Patienten eine erhöhte Plasma-Kreatinin-Konzentration zum Zeitpunkt der Liquor- und Serum-Probennahme zeigte. Sechzehn Hunde hatten klinische Anzeichen einer Harnwegsinfektion zum Zeitpunkt der Probennahme (fünf Hunde mit intrakranieller

Diskussion

Neoplasie, drei Hunde mit akuter SRMA, drei Hunde mit Myelopathie, zwei Hunde mit IE und je ein Patient der Gruppen „SRMA in Remission“, „SRMA Rezidiv“ sowie „MUO“

(Tabelle 4 im Anhang).

Im Rahmen der Auswertung wurden mehrere Ausreißer mit sehr stark erhöhten NGAL-Konzentrationen im Liquor identifiziert. In der Gruppe mit akuter SRMA wurde einer der höchsten insgesamt gemessenen NGAL-Werte bei einem Patienten nachgewiesen, der im Verlauf nach Reduktion der Prednisolondosis ein Rezidiv erlitt.

Die anderen Ausreißer der SRMA-Gruppe mit sehr hoher NGAL-Konzentration im Liquor hatten jedoch entweder ein gutes Behandlungsergebnis (Follow-Up Periode sieben bzw. siebzehn Monate) oder der weitere Verlauf der Erkrankung war unbekannt (n = 1). Der Patient mit der höchsten NGAL-Liquor Konzentration in der „MUO“-Gruppe wurde auf Wunsch der Besitzer ad tabulam euthanasiert, anschließend wurde mittels histopathologischer Untersuchung eine ungewöhnlich stark ausgeprägte, sterile, eitrige Meningoenzephalitis diagnostiziert. Die anderen beiden Ausreißer dieser Gruppe hatten einen positiven Verlauf. Ein Patient mit Bandscheibenvorfall mit außerordentlich hohem NGAL-Liquor-Messwert hatte initial einen guten Behandlungserfolg, aber erlitt nur vier Monate später einen weiteren Bandscheibenvorfall an einer anderen Lokalisation. Der zweite Ausreißer der Gruppe

„kompressive Myelopathie“ mit sehr hoher NGAL-Konzentration war bereits ein Jahr vor Diagnose und Probennahme an einem anderen Bandscheibenvorfall operiert worden.

Interessanterweise litt ein Patient mit besonders hohem NGAL-Gehalt im Liquor an einem vermutlichen Choroidplexustumor, was zu Ergebnissen einer früherer Studie passt (MARQUES et al. 2008), die den Choroidplexus als einen der wichtigsten Orte für die intrathekale NGAL-Synthese identifizierte. Jedoch war keine histopathologische Untersuchung bei diesem Patienten durchgeführt worden, um die Diagnose zu bestätigen. Bei einem weiteren Hund mit intrakranieller Neoplasie und sehr hohen NGAL-Werten im Liquor wurde in der histopathologischen Untersuchung ein Meningeom mit vermutlich sekundärer, umgebender Enzephalitis des Hirnstamms nachgewiesen. Der dritte Ausreißer dieser Gruppe zeigte zentral-vestibuläre

Diskussion

Symptome und das MRT zeigte eine extra-axiale Masse mit dem Verdacht auf ein Meningeom, aber eine pathologische Untersuchung lag nicht vor.

Ein Patient mit akuter SRMA, der sehr hohe NGAL-Serumkonzentrationen hatte, erlitt nach Reduktion der Prednisolongabe ein Rezidiv, dies traf jedoch nicht auf die zwei übrigen SRMA-Patienten mit sehr hohen NGAL-Werten im Serum zu (Follow-Up Periode in beiden Patienten zwei Monate). Es wurden keine besonderen anamnestischen Faktoren oder Besonderheiten bei den anderen Ausreißern aus der Myelopathie- oder IE- Gruppe mit stark erhöhten NGAL-Serumwerten gefunden, wobei die Patienten entweder einen guten Therapieerfolg zeigten oder der Verlauf nicht weiter nachverfolgt werden konnte.

Hohe Serum-NGAL-Konzentrationen wurden als negativer prognostischer Faktor in Patienten mit Sepsis und Schädel-Hirn-Trauma beschrieben (WANG et al. 2015;

Im Dokument Die Rolle des Proteins Lipocalin-2 bei immunmediierten Entzündungen des caninen zentralen Nervensystems (Seite 53-0)