Histamin und Histidindecarboxylasen im oberen Verdauungstrakt yon Mensch, Hund,
Meerschweinchen und Ratte
WILFRIED LORENZ, KLAUS PFLEGER und E U G E N W E R L E Klinisch-Chemisches Institut an der Chirurgischen Klinik der Universit~t Miinchen
(Direktor: Prof. Dr. Dr. E. WE~LE) Eingegangen am 3. Mai 1967
Histamine and Histidine Decarboxylase in The Upper Digestional Tract o]
Man, Dog, Guinea Pig and Rat
Summary. 1. The highest histamine content in tissues of the upper digestional tract of man, dog, guinea pig and rat is found in stomach, oesophagus and tongue.
2. At p i t 7.0 extracts of oesophagus and fundus of the stomach showed a high activity of histidin decarboxylase in the guinea pigs. At p i t 8.0 formation of histamine could be demonstrated in all regions of the stomach, in thyroid gland and thymus.
3. I n the corpus and pylorus of the stomach of guinea pigs histamine is strongly catabolized to the extent of 500/o by diamin oxidase and histamine methyltrans- ferase. This could be demonstrated in experiments with inhibitors of these enzymes, i.e. aminoguanidine respectively p-CMB and ehlorpromazine.
4. At pH 7.0 deearboxylation of histidine in rats is high in all tissues of t h e upper digestional tract, especially in the stomach, thyroid gland and submaxillary gland. At pH 8.0 histidine is strongly decarboxylated only in extracts of the tongue.
5. The assay of histidine deearboxylase in tissues of the guinea pigs at pH 7.0 should be performed in the presence of 1.25 × 10 -~ ~ aminoguanidine and 5 × 10-4~f p-CMB respectively chlorpromazine. At pH 8.0 aminoguanidine prevents the catabolism of histamine sufficiently, whereas p-CMB inhibits the unspecific HDC.
The specific I-IDC of the stomach of the rat is also completely inhibited by 5 × 10-4M p-CMB.
6. The specific and unspecific ttDC in tissues of guinea pig are characterized by pH-optimum, inhibition respectively activation by benzene, inhibition by a-methylhistidine and a-methyldopa.
7. The difficulties of the assay of histidine decarboxylases in homogenates and crude extracts are discussed.
Key- Words: Histamine -- Histidine Decarboxylase -- Upper Digestional Tract -- Man -- Dog -- Rodents.
Zusammeu/assung. 1. Von den untersuchten Organen des oberon Verdauungs- trakts haben Zunge, Oesophagus and/~agen bei Mensch, Hund, ~eerschweinehen und Ratte den h6chsten Histamingehalt.
2. Histidindeearboxylierung li~flt sich beim Meersehweinchen bei ptI 7,0 in Extrakten vor allem aus Magenfundus and Oesophagus, bei pH 8,0 aus Magen- fundus, -corpus and -pylorus sowie aus Schilddriise und Thymus nachweisen.
3. I-Iistamin wird vor allem in Homogenatea yon Corpus und Pylorus des Meersehweinchenmagens stark umgesetzt. Diaminoxydase und Histaminmethyl- transferase sind n u t zu 500/0 daffir verantwortlich, was sich in Versuchen mit
Histamin und Histidindecarboxylasen im oberen Verdauungstrakt 151 Hemmstoffen dieser Enzyme, Aminoguanidin bzw. p-Chlormercuribenzoat und Chlorpromazin naehweisen lieB.
4. Bei der Ratte ist die ttistidindeearboxylierung in Extrakten aus den Organen des oberen Verdauungstraktes bei ptt 7,0 ausnahmslos stark; am grSBten bei Magen, Schflddriise und Speicheldr~se. Bei pH 8,0 finder man nur in der Zunge eine starke Decsrboxylierung.
5. In Meerschweinchenorganen gelingt der Nachweis der Histidindecarboxylie- rung bei pH 7,0 am besten in Gegenwart yon 1,25× 10 -4 M Aminoguanidin und 5 × 10 -~ M p-Chlormereuribenzoat oder Chlorpromazin. Bei pI-I 8,0 geniigt Amino- guanidin allein, da p-Chlormereuribenzoat die unspezifische ItDC hemmt. Beim t~attenmagen wird (lurch 5× 10 -t M p-0MB auch die spezifische ItDC zu 100°/0 gehemmt.
6. Dureh pit-Optimum, Verhalten gegentiber Benzol, c~-Methyldopa und a-Methylhistidin werden die gefundenen Enzyme als spezifische und unspezifische HDC charakterisiert.
7. Die Problematik der AktivitEtsbestimmung der ttistidindecarboxylasen in Homogenaten und I~ohextrakten wird diskutiert.
Schli~sselwSrter: I-Iis~amin -- Histidindeearboxylasen -- oberer Verdauungs-
t r a k t - - M e n s e h - - H n n d - - N a g e t i e r e
I n friiheren U n t e r s u c h u n g e n h a b e n wir H i s t a m i n u n d Histidin- d e c a r b o x y l a s e n in E x t r a k t e n aus Speieheldrtisen, Schflddrfise, T h y m u s u n d Magen verschiedener S£ugetiere nachgewiesen (WE~LE u. Lo~v.~z, 1964; WE~LE U. LOEESZ, 1966; LOrEnZ u. WE~LE, 1967; LOEESz et al., 1967). Die wirkliche A k t i v i t ~ t der H i s t i d i n d e c a r b o x y l a s e n k o n n t e dabei n u r gemessen werden, w e n n der weitere U m s a t z y o n t t i s t a m i n wirksam v e r h i n d e r t w u r d e (LorENz et al., 1967), wobei es ira allgemeinen n i c h t geniigte, n u r die D i a m i n o x y d a s e zu h e m m e n . Bei O r g a n e x t r a k t e n y o n Mensch, H u n d , Meerschweinchen u n d Maus ist es wichtiger, die H i s t a m i n - m e t h y l t r a n s f e r a s e auszuschalten (SCHAY~, 1959), z. B. d u r c h Zusatz y o n Chlorpromazin oder p-CMB (LINDAItL, 1958). I n der vorliegenden A r b e i t werden weitere Befunde aus d e m Gebiet des oberen V e r d a u u n g s t r a k t e s mitgeteilt.
~Iethodik
1. Untersuchungsmaterial und Ab/ci~rzungen
HDC ttistidindecarboxylase (L-Histidin-CarboxylyaseEC 4.1.1.22), aus Roh- extrakten dutch ttomogenisieren 1 : 2 m~t bidest. Wasser und Zentrifugieren gewon- hen (LorEnz n. W]s~LE, 1967); DAO Diaminoxydase (Diamin: 02-Oxydoreduktase EC 1.¢.3.6), HMT Histaminmethyltransferase (EC 2.1.1.8), PALP Pyridoxalphosphat (Fluka), AG Aminoguanidin (Sehuehardt, Miinchen), p-CMB ~o-Chlormereuribenzoat (Roth, Karlsruhe). CPt~ (Chlorpromazin)verdanken wir den Farbenfabriken Bayer, a-Methyldopa und c¢-Methylhistidin der Firma Merck, Sharp & Dohme, New Jersey.
2. Verwendete Gewebe
Menschliehes Obduktionsmaterial yon 25--50jghrigen, mgnnlichen Verkehrs- toten ~. Organe yon 2--3j~hrigen m~nnliehen Bastarddackeln. Die Tiere warden 1 Dem Gerichtsmedizinischen Institut der Universit~t Miinehen danken wir fiir die Uberlassung der menschlichen Organe.
naeh 12 Std Fasten mR Pernocton bet~ub~ und dann entblutet. Organe yon weib- lichen Meersehweinchen und weiblichen Ratten aus etwa gleiehaltrigen Wiirfen derselben Zucht. Die Tiere wurden nach 12 Std Fasten mit ~ther beti~ubt und dureh Herzincision entblutet. Bei der Zunge des Hundes wurde Schleimhaut yon Muskulatur dutch Abschaben getrennt. Magenmucosa und -museularis wurden im Bereich der Submucosa voneinander abgezogen (histologiseh gesichert !).
3. Histaminbestimmung
Der Histamingehalt wurde nach SHo]a~ et al. (1959) in der Modifikation yon BUR]~H~TER (1962) bestimmt. Die fluorometrisehen MeBergebnisse stimmten mit gelegentlich am isolierten Meersehweinehenileum durchgefiihrten Parallelbestim- mungen fiir alle Organe fiberein. Die dem Histamin zugeschriebene Aktivitat wurde in diesen Versuchen dureh 1--5 ~g Antistin/12 ml Badfliissigkeit vollstandig ge- hemmt. Der Histamingehalt der Organe wird ausgedriickt in Mikrogramm Hist- amindihydrochlorid/g Frischgewicht.
d. Ansdtze zur Histidindecarboxylasebestimmung ( T a b . l ) Tabelle 1. Testmischung zur Bestimmung der Aktivitdt der s19ezi]ischen
Histidindecarboxylase (1oH 7,0)
Hauptgef~B 0,8 ml Rohextrakt 0,27 g Gewebe 1,5 ml Phosphatpuffer pH 7,0, 0,4 M,
Na~HPOJKH2PO~
0,1 ml Aminoguanidin Endkonz. 1,3- i0 -~ M 0,1 ml ~o-CNIB Endkonz. 5,0 • 10 -~ !~I SeitengefaB 0,5 ml L-Histidin Endkonz. 1,0.10 -8 NI
Inkubation in der Warburgapparatur, Temperatur 37 ° C, Stickstoffatmosph~re, Endvolumen 3,0 ml, alle Reagentien in bidest. Wasser gelSst. Reaktionsstop mit 0,5 ml 3 N Perchlors~ure, Histaminbestimmung siehe oben. Zur Bestimmung der unsl~ezi/ischeu HDC bei pH 8,0 wurde p-CMB durch 20 mg Benzol ersetzt und Phosphatpuffer pH 8,0 verwendet.
Proteinbestimmung. l~ach WEICHSELBAUM (1946). Bei der Schilddrfise wird auf eeUul~res Protein bezogen, das nur 1/8 des Gesamtproteins betr~gt (GRAB, 1933).
De]initionen. Nullwert (NW) ist der Histaminwert in Ans~itzen mit s~ure- inaktiviertem Enzym und Substratzusatz, Leerwert (LW) der mit intaktem Enzym ohne Substratzusatz, also nur mit endogenem Substrat, Hauptwert (HW) der mit intaktem Enzym und Substratzusatz Ibis zur Substrats~ittigung (TELFO~I) U. W]~ST, 1961)].
Die Enzymaktivit~t wird ausgedriiekt in pmol Histaminzuwachs/mg Protein und 3 Std. Die Umreehnung in die alte Definition Mikrogramm Histaminbfldung/g Gewebe und 3 Std erfolgt nach der Gleichung:
t~g/g
/)tool/rag Protein -~ mg Protein/g 5450.
Der Faktor kommt dureh das Molekulargewicht yon Histamindihydrochlorid (185) zustande. 1 ~g = 5450/~mol Histamindihydrochlorid. Der Histaminzuwachs bei Substratsdttigung errechnet sich aus der Differenz yon Haupt- und Nullwert, nicht yon Haupt- und Leerwert, da frfiher gezeigt wurde, da~ aus endogenem Histidin entstehendes Histamin im Leeransatz die Aktivit~ meist viel zu niedrig erscheinen l ~ t ( W ~ u. LORV,~z, 1966). Der Histaminzqzwachs aus der Decarb-
Histamin und Histidindecarboxylasen im oberen Verdauungstrakt 153 oxylierung yon endogenem Histidin errechnet sich aus der Differenz yon Leer- und Nullwer~; er wurde bestimmt, da die geringe Substratkonzentration etwa derjenigen entspricht, die bei versehiedenen Isotopenmethoden verwendet wird (K~m, soN, 1962; SC]~AYE~ et al., 1955). Negative Leerwerte kennzeiehnen den Histaminumsatz, der trotz geniigender Hemmstoffkonzentrationen fiir die DAO und HMT noch auftritt, bedingt durch noeh unbekannten Umsatz des Histamins
(LOR]~Z u. WnRLE, 1967).
Ergebnisse
1. Histamingehalt in Organen des oberen Verdauungstralctes AuBer dem Magen enthalten Zunge und Oesophagus aller Species groBe tIistaminmengen. I m Magen von Mensch, Itund, Meerschweinchen und Kaninehen (Wv.~L~ u. Lo~v,~z, 1964) finder sich H i s t a m i n fiber- wiegend im Fundus- und Corpusbereich, wo auch die meisten Belegzellen v o r k o m m e n (PL~NK, 1932). Beim Meerschweinchen f/~llt der hohe Histamingehal~ im Pylorus auf. Die Unterschiede im Histamingehalt der Organe bei den einzelnen Species stehen nieht in Beziehung zum Mast- zellgehalt (S~LY~, 1965).
Tabelle 2. Histamingehalt in Organen des oberen Verdauungstraktes yon Mensch, Hund, Meerschwelncheu und Ratte
Mittelwert 4- Standardabweichung der Histamingehalte in Mi~rogramm/Gramm Gewebe. Einteilung des Magens nach Plen~ (1932). Es wurden ]eweils yon ein und demselben Individuum alle au/ge]i~hrten Organe entnommen, n = Anzahl der unter-
suchten Organe
Organe Mensch Hund Meerschweinchen Ratte
Zunge 7,3 ± 0,8 6,0 ± 1,5 7,7
Schleimhau~ 12,1 4- 2,9
Muskulatur 13,5 4- 3,5
Submandibularis 3,5 4- 0,7 19,9 4- 1,5 4,2 4- 0,6 31,0 Schilddriise 1,5 4- 0,4 2,2 ± 0,9 24,1 4- 4,1 32,0
Thymus 1,1 13,4 ± 3,9 4,9 4- 1,2 21,4
Oesophagus 8,9 4- 1,1 39,0
oberer Teil 10,1 4- 3,2 14,0 4- 2,3 unterer Tail 17,8 4- 3,1 18,2 4- 1,0
Magen 39,0
Fundus 11,0 =L 0,6 83,0 4- 16,0 7,8 4- 2,4 Corpus 17,3 ± 3,0 88,0 4- 17,0 12,7 4- 1,9 Pylorus 5,3 4- 2,1 53,0 4- 10,0 12,5 4- 1,4
n 3 6 30 8
2. Histidindecarboxylasen im oberen Verdauungstrakt des IVleersehweinchens
(T~b 8)
Der Bezug der E n z y m a k t i v i t ~ t a u f Protein verdeutlicht die hohe Konzentration der H D C im Magen. Bei p i t 7,0, dem O p t i m u m der spe- zifischen ItDC, finder sich n u r in Fundu8 und Oesophagus eine starke
Tabelle 3. Histldindecarboxytierung dumb Ex~rakte aus Orffanen des obe+'en Ver- dauungs~raktes des Meerschu, einchens bei p H 7,0 u~u~ 8,0
Enzymaktivigit i~ pmol Hi~taminzuwach~/mg Protein~3 Std. Bezugswert ist der ~uIl- weft. Mittelwert ~ Standardabw~ichung. 30 Femuchstiere; O~rgane yon ]e 10 Tieren
gemischt. Sons~ige Bedingungen siehe Methodik
Protein pH 7,0 pH 8,0
Organe
mg/g LW HW LW HW
Zungo 178 -- 1 6 ~ 16 5 5 ± 11 -- i6~: 6 Submandibularis 263 8 ~ 14 16 ± 16 ~ 22 ± 6 6:{: 3 Schilddriise 133 --I08 ~ 40 16 ~: 8 33 :L 6 55 ~ 6 Thymus 143 -- 1t _~- 8 38 ± 33 -- 49 ~ 38 60 ~ 27 Oesophagus 150 22 ~ 22 324 ± 180 -- 44 ± 109 16 ~ t6 M~gen
Fundus 80 27 ~ 190 245 :]: 136 80 ~ 202 229 ~: 98 Corpus 84 --17~ ~ 22 33 ~ 22 --158 ~ 136 223 ~ 98 Pylorus 60 --169 ~ 22 27 ± 11 --223 =J= 60 354 ± 88 Aktivitat, bei p H 8,0, dem Optimum der mlspezifisehen HDC, im Bereleh aller Magenabschnitte. Die Ergebnisse spreehen auf Grund der Aktivitat bei p i t 7,0 bzw. 8,0 ( L o r e n z , 1965; W~ISSBACH e t a l . , 1960; W~L]~ u.
LOREnz, 1966) fiir eine spezifische HDC in Zunge, Oesophagus und Magenfandus, fiir eine unspezifisehe in allen Magenabschnitten, ferner in Schildch'fise und Thymus. Der starke Abfall der Histaminwerte im Leeransat, z yon etwa 25 °/0 des Nullwertes, der vor allem in E x t r a k t e n yon Pylorus und Corpus stattfindet, kann dureh die Hemmst~)ffe Anfino- guanidin, p-CMB und Chlorpromazin allein oder in Kombination aueh in hohen Konzentrationen (Lol~E~z u. Ww~LE, 1967) nicht verhindert werden. Ohne Zusatz dieser Stoffe betragt der Abfall der Histaminwerte sogar 50 °/0; 25 °/o des ttistamins dfirften daher dutch DAO und H M T umgeset, zt werden, ttistamin wird also dutch Gewebe des Meersehwein- chenmagens gut mel~bar abgebaut, im Gegensa~z zu Befumden bei anderen Species (CoD~, 1956, 1965).
AuBer DAO und HMT mfissen andere Enzyme, wahrseheinlich Enzyme der Transamilfierung (ITo et al., 1960), der Acetylierung (TABo~, 1966) und der Nneleotidbildung (ALIWSA~OS, 1966) fiir den Itistamin- umsatz verantwortlieh gemacht werden, fiir die es in Ansfi, tzen zur Decarboxylasebestimmung noeh keine Hemmstoffe gibt.
3. Histidindecarboxylasen i m oberon Verdauungstrakt der Ratt~
Negative Werte treten dabei nicht auf. Da b e i d e r l~atte ttistamin fast ausschlieBlich durch oxydative Desaminierung umgesetzt ~-ird ( B J ~ 5 , 1963; SCHAY~, 1959), ist iu Gegenwart y o n Aminognanidin auch im Leeransatz Itistaminbfldung aus endogenem Substrat naeh- weisbar. Bei allen geprfiften Organextrakten ist die Decarboxylierung
Histamin und Histidindecarboxylasen im oberen Verdauungstr~kt 155 Tabe]le 4. Histidindecarboxylierung dutch Extrakte aus Organen des oberen Ver-
dauungstraktes der l~atte bei pH 7,0 und pH 8,0
Enzymaktivltiit in 19tool~rag Protein~3 Std. Bezugswert ist der Nullwert. Sonstige Be- dingungen siehe Methodik. Auch bei pH 7,0 wurde nut Aminoguanidin zugesetzt.
Histaminwerte yon einer Dolgpelbestimmung der vereinigten Organe von 8 Tieren
Protein pit 7,0 pH 8,0
Organe
mg/g LW I-IW HW
Zunge 40 164 398 1360
Subm~ndibularis 165 235 398 65
Schilddriise 35 474 654 0
Thymus 96 186 404 207
Oesophagus 48 0 567 0
Magen 81 268 1360 202
bei pI-I 7,0 stark, am st£rksten in Magen und Schilddri~se. Bei p H 8,0 findet man nur im Zungenextralct eine starke Decarboxy]ierung. Die Be- funde sprechen also ffir eine spezi/ische HDC in allen untersuehten 0r- ganen und eine unspezifische HDC in der Zunge, Thymus trod ~ a g e n .
4. Abgrenzung der spezi/ischen yon der unspezifischen H D C in Organextralcten des Meerschweinchens
Bei den erw~hnten Organextrakten des Meerschweinchens finder man bei p H 7,0 in Gegenwart yon p-CMB und AG hShere Deearboxylierungs- raten als in Abwesenheit dieser Stoffe. Bei p t I 8,0 wird die Decarboxylie- rung in Gegenwart yon p-CMB verhindert, p-CMB h e m m t die unspezi- fisehe I-I_istidindecarboxylase (LoRw~z et al., im Druck) und kann zur Differenzierung der beiden E n z y m e beim Meerschweinchen verwendet werden. Uberrasehenderweise h e m m t ~-CMB auch die spezifische HDC des Rattenmagens, und zwar 5 • 10 -4 M bereits zu 100 °/o. Die spezifisehe HDC des Rattenmagens unterscheidet sieh daher yon der spezifisehen tIDC der Sehweine- und Rindersehflddriise und der in Meersehweinehen- organen.
Dureh Benzol ~ r d bei p H 7,0 die Histidindeearboxylierung in allen Magenabsehnitten des Meersehweinehens zu 60--100°/o gehemmt, bei p i t 8,0 dagegen bis zu 600 °/o aktiviert.
Bei pl=[ 7,0 h e m m t ~-Methylhistidin ( 5 - l 0 -2 M) in allen Magen.
absehnitten zu 100 °/0, i • 10 -~ IV[ ~-Methy]dopa ist ohne Wirkung. Bei p H 8,0 wird die Decarboxylierung dureh ~-Methyldop~, nieht aber durch
~-MethylMstidin gehemmt. Damit sind die bei p H 7,0 bzw. 8,0 ~Mrk- samen Deearboxylasen der untersuehten Organe ira Sinue yon W~iss-
~Ac~ et al. (1960) eindeutig als spezifisehe und unspezifisehe HDC eharakterisiert.
l l ~ a u n y n - S c h m i e d e b c r g s Arch. P h a r m a k . exp. P a t h , , Bd. 258
Bei Extrakten aus Meersehweinehenorganen hemmt Chlorpromazin, ein wirksamer Hemmstoff der ttMT, in I • 10 -~ M Konzentration beide Deearboxylasen, die unspeziiische HDC zu 25 0/0, die spezifisehe HDC zu 100 °/0. 5 • 10 -~ M eignet es sigh als Itemmstoff fiir die HMT zur Be- stimmung beider Decarboxylasen.
Diskussion
1. Zum Vorkommen der spezi/ischen Histidindecarboxylase
Each neueren Untersuchungen verschiedener Autoren (DAwsoN et al., 1965; TWL~O~D, 1965) sollen Meerschweinchenorgane nur die unspezi/ische Histidindecarboxylase enthalten, der auf Grund ihrer hohen Michaelis- konstante in vivo keine Bedeutung im Histaminstoffwechsel zukommen sol1 (ScHAYER, 1959, 1966). Dies wiirde bedeuten, daI~ das Histamin der Meerschweinchenorgane aus dem Darmlumen stammt. Auch bei Itund und Katze (WA~o~, 1964) und beim Menschen konnte spezifische HDC yon nennenswerter St~rke nicht nachgewiesen werden. Die endogene Histaminbildung k~me dan~ch nur bei der Ratte in Betraeht, bei der eine hochaktive ItDC seit langem nachgewiesen ist (Sc~AYE~, 1957).
Demgegeniiber wurde aber, vor allem in unserem Laboratorium, in jiingster Zeit eine reeht aktive spezifisehe HDC in Organen yon Rind (WV,~LV, u. Lo~zNz, •966), Schwein (LoreNz u. W~.~L~, 1967; LorEnz et al., unverSffentlicht; WV,~L~ u. LorEnz, 1966), Hund (LoreNz et al., 1967; LORENZ et al., unverSffentlieht; W~RT,E U. LOrenz, 1966), Katze (ERzAV~C et al., 1967), Kaninchen (Wv,~T,~ u. LoReNz, 1964), Maus ( R o s ~ G ~ , 1962; SMITer u. COD~, •967) und aueh beim Menschen (LINDB]]RG et ~1., 1963; Lo~v,~z et al., 1967) festgestellt. Wie in dieser Arbeit beschrieben, gelingt es mit Hilfe yon Hemmstoffen der Histamin- methyltransferase (T-CMB und Chlorpromazin) aueh beim Meerschweln- chen in verschiedenen Organen das spezifische Enzym nachzuweisen, vor allem in Magen und Submandibularis, in denen die Bedeutung yon Histamin als physiologiseher Stimulator der Sekretion mit grSBter Wahr- seheinlichkeit angenommen ~ r d (B~oD~ et al., 1966; Co~v,, 1956; CoD~, 1965; E~zAv~c et al., 1967; LoRw~z et al., 1967; W~r,v, u. Lo~v,~z, 1966). So ist durch Injektion der Antihistaminiea Phenergan, Antistin, Benadryl, Thephorin und Hibernon in die A. maxillaris externa die par~sympathiseh induzierte Speiehelsekretion spezi]i~ch hemmb~r (Lo- r e n z et al., 1967). Dabei erwies es sieh, daI~ die spezifische HDC der Submandibularis yon Katze (ERJAVEC et al., 1967) und Hund (LorEnz et al., unverSffentlieht) dutch einen Sekretionsreiz, ausgelSst z. B. durch Pilocarpin, induziert werden kann, ~hnlich wie die spezifisehe ItDC des Rattenmagens (KAH~so~v et al., 1963) und der Capfllarendothelien (ScHAY]~R, 1966).
Histamin und Histidindeearboxylasen im oberen Verdauungstrakt 157 2. Zur Problematilc der Bestimmung der HDC-Aktivitdt in
Gewebshomogenaten und -extrakten
Wh~d bei der Bestimmung der HDC-Aktivit/~ in Organhomogenaten und -extrakten das eatstandene Histamin zugrunde gelegt, so werden in verschiedenen Organen yon Meerschweinehen, Hund, K a t z e und Menseh in Gegenwart yon Aminoguanidin zu niedrige Werte erhalten. Denn aul~er der DAO setzea noch eine Reihe anderer E n z y m e Histamin urn.
In solchen F/~llen kann versuch~ werden, die wirkliche Aktivi~/~t der HDC durch Zusatz yon Hemmstoffen anderer E n z y m e des Histamin- umsatzes zu erfassen, wobei die HDC-Aktivit/~t nich~ wesentlich beein- tr/~chtigt werden darf. In Gegenwart yon p-CMB oder Chlorpromazin als Hemmstoffen der HMT gelingt es tats~chlich, in versehiedenen Or- ganen den Umsatz des gebfldeten Histamins vollst/~ndig zu verhindern
(Lo~v, Nz u. WERLE, 1967; W~nLE u. L o r e n z , 1966).
Es gibt aber Organe, in denen tro~z der H e m m u n g der DAO uncl der H M T noch ein bedeutender Histaminumsatz s~attfinde~ (siehe oben).
Solange noeh keine Itemmstoffe bekannt sind, die diesen ttistamin- umsatz verhindern, kann die Deearboxylase-Aktivit/~t nur angen/~her~
bestimmt werden, eventuell unter Zuhilfenahme yon Ans/~tzen, in denen naeh Bloekierung der Histidindecarboxylase (z. B. dutch ~-lV[ethyldopa, Carb/ithoxymethylthioimidazol und Semicarbazid) der Histaminver- braueh innerhalb der Versuchszeit bestimmt und bei der Decarboxylie- rungsrate berficksichtigt wird.
Auf keinen Fall d a f t bei Homogenaten oder Rohextrakten, wie bisher fiblich, die Aktivit/~t der I-IDC aus der Differenz der Histaminwerte von Itaupt- und Leerwert erreehnet werden, weft nach unseren Befunden (LoaE~z u. WE~LE, 1967; WERLE U. LOnE~Z, 1966) es dabei zu Fehlern bis zu 50 °/o und mehr kommen kann. Auch die Verwendung yon mar- kiertem Histidin bringt keinen Vorteil, wenn dabei Histamin bestimmt wird (AuRES u. C~A~K, 1964). S ~ T H U. CODE (1967) wiesen bereits d a r a u f hin, dal~ aueh bei Einsatz yon carboxyl-x~C-markiertem Histidin der His~aminumsatz gehemm~ werden muB.
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Prof. Dr. Dr. EvGE~ WE~L~
Kliniseh-Chemisehes Institut der Chirurg. Universitiits-Klinik 8000 Miinehen 15
Nu]baumstral~e 20
