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Konstrukte für die Expression von Epitop-markierten Fusionsproteinen in Sf9- Sf9-Zellkultur

Im Dokument 250 in Drosophila melanogaster (Seite 131-134)

4.1.9. Plasmide 1. Vektoren

4.1.9.5. Konstrukte für die Expression von Epitop-markierten Fusionsproteinen in Sf9- Sf9-Zellkultur

pVL-GST-FLAG-DTAFII250-NT750

pVL-GST-FLAG-Derivat mit einer Insertion eines 0,8 kb DTAFII 250-NT750-cDNA-Fragments. pVL-GST-FLAG-DTAFII250-NT750 wurde durch Klonierung der 0,8 kb NdeI/XbaI-DTAFII250-NT750-cDNA aus pET19b-DTAFII250-NT750 in NdeI/XbaI-verdauten pVL-GST-FLAG -Vektor kloniert.

pVL-GST-FLAG-DTAFII250-NT1400

pVL-GST-FLAG-Derivat mit einer Insertion eines 1.5 kb DTAFII 250-NT1400-cDNA-Fragments. pVL-GST-FLAG-DTAFII250-NT1400 wurde durch Klonierung der 1.5 kb

NdeI/XbaI-DTAFII2 5 0 - N T 1 4 0 0-cDNA aus pTbSTOP-DTAFII2 5 0 - N T 1 4 0 0 in NdeI/XbaI-verdauten pVL-GST-FLAG -Vektor kloniert.

pVL-GST-FLAG-DTAFII250-CT1500

pVL-GST-FLAG-Derivat mit einer Insertion eines 1.7 kb DTAFII 250-CT1500-cDNA-Fragments. pVL-GST-FLAG-DTAFII250CT1500 wurde durch Klonierung der 1.7 kb NdeI/XbaI-DTAFII250-CT1500-cDNA aus pTbSTOP-D T A FII2 5 0 - C T 1 5 0 0 in NdeI/XbaI-verdauten pVL-GST-FLAG -Vektor kloniert.

pVL-GST-FLAG-DTAFII250-CT1600

pVL-GST-FLAG-Derivat mit einer Insertion eines 1.4 kb DTAFII 250-CT1600-cDNA-Fragments. pVL-GST-FLAG-DTAFII250CT1600 wurde durch Klonierung der 1.4 kb NdeI/XbaI-DTAFII250-CT1600-cDNA aus pTbSTOP-D T A FII2 5 0 - C T 1 6 0 0 in NdeI/XbaI-verdauten pVL-GST-FLAG -Vektor kloniert.

pVL-GST-FLAG-DTAFII250-CT1700

pVL-GST-FLAG-Derivat mit einer Insertion eines 1.2 kb DTAFII 250-CT1700-cDNA-Fragments. pVL-GST-FLAG-DTAFII250CT1700 wurde durch Klonierung der 1.2 kb NdeI/SmaI-DTAFII2 5 0 - C T 1 7 0 0-cDNA aus pTbSTOP-DTAFII2 5 0 - C T 1 7 0 0 in NdeI/SmaI-verdauten pVL-GST-FLAG -Vektor kloniert.

pVL-GST-FLAG-DTAFII250-CT1800

pVL-GST-FLAG-Derivat mit einer Insertion eines 0,8 kb DTAFII 250-CT1800-cDNA-Fragments. pVL-GST-FLAG-DTAFII250CT1800 wurde durch Klonierung der 0,8 kb NdeI/SmaI-DTAFII2 5 0 - C T 1 8 0 0-cDNA aus pTbSTOP-DTAFII250-CT1800 i n NdeI/SmaI-verdauten pVL-GST-FLAG -Vektor kloniert.

pVL-GST-FLAG-DTAFII250-CT1900

pVL-GST-FLAG-Derivat mit einer Insertion eines 0,5 kb DTAFII 250-CT1900-cDNA-Fragments. pVL-GST-FLAG-DTAFII250CT1900 wurde durch Klonierung der 0,5 kb NdeI/SmaI-DTAFII2 5 0 - C T 1 9 0 0-cDNA aus pTbSTOP-DTAFII250-CT1900 i n NdeI/SmaI-verdauten pVL-GST-FLAG -Vektor kloniert.

pVL-GST-FLAG-DTAFII250-CT1500-1900

pVL-GST-FLAG-Derivat mit einer Insertion eines 1.4 kb DTAFII 250-CT1500-1900-cDNA-Fragments. pVL-GST-FLAG-DTAFII2 5 0 C T 1 5 0 0 - 1 9 0 0 wurde durch Klonierung der 1.4 kb NdeI/XbaI-DTAFII250-CT1500-1900-cDNA aus pTbSTOP-DTAFII250-CT1500-1900 in NdeI/XbaI-verdauten pVL-GST-FLAG -Vektor kloniert.

pVL-GST-FLAG-DTAFII250-CT1500-1800

pVL-GST-FLAG-Derivat mit einer Insertion eines 0,9 kb DTAFII 250-CT1500-1800-cDNA-Fragments. pVL-GST-FLAG-DTAFII2 5 0 C T 1 5 0 0 - 1 8 0 0 wurde durch Klonierung der 0,9 kb NdeI/XbaI-DTAFII250-CT1500-1800-cDNA aus pTbSTOP-DTAFII250-CT1500-1800 in NdeI/XbaI-verdauten pVL-GST-FLAG -Vektor kloniert.

pVL-GST-FLAG-DTAFII250-CT1500-1700

pVL-GST-FLAG-Derivat mit einer Insertion eines 0,6 kb DTAFII 250-CT1500-1700-cDNA-Fragments. pVL-GST-FLAG-DTAFII2 5 0 C T 1 5 0 0 - 1 7 0 0 wurde durch

125 Klonierung der 0,6 kb NdeI/XbaI-DTAFII250-CT1500-1700-cDNA aus pTbSTOP-DTAFII250-CT1500-1700 in NdeI/XbaI-verdauten pVL-GST-FLAG -Vektor kloniert.

pVL-GST-FLAG-DTAFII250-CT1500-1600

pVL-GST-FLAG-Derivat mit einer Insertion eines 0,3 kb DTAFII 250-CT1500-1600-cDNA-Fragments. pVL-GST-FLAG-DTAFII2 5 0 C T 1 5 0 0 - 1 6 0 0 wurde durch Klonierung der 0,3 kb NdeI/XbaI-DTAFII250-CT1500-1600-cDNA aus pTbSTOP-DTAFII250-CT1500-1600 in NdeI/XbaI-verdauten pVL-GST-FLAG -Vektor kloniert.

pPB22-His-DTAFII250-NT1400

pPB22-His-stat92E-CT -Derivat mit einer Insertion eines 1.5 kb DTAFII 250-NT1400-cDNA-Fragments. pPB22-His-DTAFII250-NT1400 wurde durch Klonierung der 1.5 kb NdeI/BamHI-DTAFII250-NT1400-cDNA aus pTbSTOP-DTAFII250-NT1400 in NdeI/BamHI-verdauten pPB22-His-Vektor kloniert. Die stat92E-CT-cDNA wurde hierbei durch die Insertion der DTAFII250-NT1400-cDNA entfernt.

pPB22-His-DTAFII250-CT1500

pPB22-His-stat92E-CT -Derivat mit einer Insertion eines 1.7 kb DTAFII 250-CT1500-cDNA-Fragments. pPB22-His-DTAFII250-NT1400 wurde durch Klonierung der 1.5 kb NdeI/BamHI-DTAFII250-CT1500-cDNA aus pTbSTOP-DTAFII250-CT1500 in NdeI/BamHI-verdauten pPB22-His-Vektor kloniert. Die stat92E-CT-cDNA wurde hierbei durch die Insertion der DTAFII250-CT1500-cDNA entfernt.

pPB22-His-DTAFII250-CT1900

pPB22-His-stat92E-CT -Derivat mit einer Insertion eines 0.5 kb DTAFII 250-CT1900-cDNA-Fragments. pPB22-His-DTAFII250-CT1900 wurde durch Klonierung der 0,5 kb NdeI/BamHI-DTAFII250-CT1900-cDNA aus pTbSTOP-DTAFII250-CT1900 in NdeI/BamHI-verdauten pPB22-His-Vektor kloniert. Die stat92E-CT-cDNA wurde hierbei durch die Insertion der DTAFII250-NT1400-cDNA entfernt.

4.1.9.6. Konstrukte für die Expression rekombinanter Histone in E. coli pET3a-H2A (Luger et al., 1997)

pET3a (Rosenberg et al., 1987)-Derivat mit einer Insertion der Sequenz für das Xenopus laevis Histon H2A. Vektor zur Expression von Histon H2A in E. coli.

pET3a-H2B (Luger et al., 1997)

pET3a (Rosenberg et al., 1987)-Derivat mit einer Insertion der Sequenz für das Xenopus laevis Histon H2B. Vektor zur Expression von Histon H2B in E. coli.

pET3a-H3 (Luger et al., 1997)

pET3a (Rosenberg et al., 1987)-Derivat mit einer Insertion der Sequenz für das Xenopus laevis Histon H3. Vektor zur Expression von Histon H3 in E. coli.

pET3a-H4 (Luger et al., 1997)

pET3a (Rosenberg et al., 1987)-Derivat mit einer Insertion der Sequenz für das Xenopus laevis Histon H4. Vektor zur Expression von Histon H4 in E. coli.

4.1.9.7. Konstrukte für die Herstellung DIG-markierter cDNA-Fragmente für die in situ

Im Dokument 250 in Drosophila melanogaster (Seite 131-134)