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NukleinsäureNukleinsäureDesoxyriboseDesoxyriboseTriphosphatTriphosphatEin Nukleotid – Grundbaustein der DNA

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Academic year: 2021

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(1)

CH2 O

OH O

O O O - P = O O - P = O O - P = O

O

-

Nukleinsäure Nukleinsäure Desoxyribose

Desoxyribose

Triphosphat Triphosphat

Ein Nukleotid – Grundbaustein der DNA

(2)

DNA-Synthese: W

DNA-Synthese: Wie werden Nukleotide miteinander verknüpft?

CH2 O

OH O O O

-

O - P = O

-

O - P = O

-

O - P = O O

-

Base CH2 O

OH O O O O - P = O O - P = O O - P = O

O

Base

OH O O - P = O O - P = O

O

O CH2 O O O O O - P = O O - P = O O - P = O

O

Base

CH2 O

OH O O - P = O

Base

(3)

Die Kette wächst!

DNA-Polymerase

(4)

Didesoxynukleotid (ddNTP)

CH2 O

OH O O O O - P = O O - P = O

O - P = O O

Base

Desoxynukleotid (dNTP)

Didesoxynukleotide:

Didesoxynukleotide: Eine wichtige OH-Gruppe wird entfernt

(5)

Einbauen von Fehlern:

Einbauen von Fehlern: ddNTP‘s

CH2 O

OH O O O O - P = O O - P = O O - P = O

O

Base O

CH2

OH O O O O - P = O O - P = O O - P = O

O

Base

Keine Reaktion!!!

Keine Reaktion!!!

(6)

Eine Sequenzierung = 4 Ansätze Eine Sequenzierung = 4 Ansätze

Ansatz A Ansatz C Ansatz G

H

T

H

C

H

G

Ansatz T

DNA Primer Polymerase

DNA Primer Polymerase

DNA Primer Polymerase

DNA

Primer

Polymerase

(7)

Die Synthesereaktion:

Die Synthesereaktion: Eine Vorlage – viele verschiedene

Produkte

(8)

Fragmente verschiedener Länge – a

Fragmente verschiedener Länge – aber das Ende ist gleich!!!

GCGTAAGGCATAGAC GC

GCGTAAGGC

GCGTAAG

GCGTAAGGCATAG GCG

G

GCGTAAGGCATAGACG GCGTAAGG

Ansatz C Ansatz G Ansatz T Ansatz A

GCGTAAGGCAT GCGT

GCGTAAGGCATAGT GCGTA

GCGTAA

GCGTAAGGCA

GCGTAAGGCATA

(9)

Ansatz C Ansatz G Ansatz T Ansatz A

---A ---A ---A ---A

---C ---C

---C

---G

---G ---G

G

---G ---G

---T ---T

---T

Fragmente verschiedener Länge Fragmente verschiedener Länge

aber das Ende ist gleich !!! Fragmente verschiedener Länge

Fragmente verschiedener Länge

(10)

Gelelektrophorese:

Gelelektrophorese: Das Wirrwar wird geordnet

A C G T

+

-

(11)

G

Die Sequenz wird gelesen Die Sequenz wird gelesen

+ -

A C G T

C A G A T A C G G A A T G G

C

(12)

Referenzen

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