In der vorliegenden Arbeit wurden drei Themenkomplexe behandelt, um genetisch bedingte Merkmale bei Hunden zu untersuchen. Die Analysen der Gene MLPH und MDR1 wurden auf-grund eines Kandidatengenansatzes durchgeführt. Dabei sollte im ersten Teil der Arbeit ein Gen identifiziert werden, das einen bestimmten Farbphänotyp erklärt, während in den Analysen zum MDR1-Gen untersucht wurde, ob es für dieses Gen noch neue, bislang nicht beschriebene Vari-anten bei Hunden gibt, die analog den Befunden im humanen MDR1-Gen eine funktionelle Wir-kung haben. Damit sollte überprüft werden, ob und in welchem Maße genetische Polymorphis-men über die Genregulation Einfluss auf den Phänotyp der Tiere haben.
Durch den Kandidatengenansatz wurde im ersten Teil der Studie eine monogene autosomal re-zessive Eigenschaft – die Farbdilution bei Hunden – untersucht und die wahrscheinliche moleku-largenetische Ursache für dieses Merkmal aufgeklärt. Der Ansatz führte deshalb zur Identifizie-rung des Gens, da nur drei Kandidatengene, die bereits bei Mensch und Maus beschrieben wa-ren, einen vergleichbaren Phänotyp verursachen. Außerdem ist das Merkmal – eine Farbvariation – eindeutig zu beurteilen und bei den in dieser Studie einbezogenen Hunderassen genetisch ho-mogen.
Die Untersuchung des über viele Arten hinweg konservierten MDR1-Gens führte zur Identifizie-rung eines neuen, bislang nicht beschriebenen Polymorphismus bei Hunden und es konnte ge-zeigt werden, dass dieser in vitro die Transkripthöhe des MDR1-Gens bei Elos beeinflusst und zudem einen geschlechtsabhängigen Effekt hat. Dieser geschlechtsabhängige Effekt weist auf eine komplexe Genregulation des caninen MDR1 hin, die noch weiter aufzuklären ist. Um diese näher zu untersuchen, sollte insbesondere die Promotorregion, die meist die regulatorischen Elemente enthält, analysiert werden.
Für die Aufklärung der molekulargenetischen Ursache der DCM beim Irischen Wolfshund er-wies sich der Kandidatengenansatz bislang nicht erfolgreich. Dies liegt an der hohen Anzahl po-tenzieller Kandidatengene, von denen bislang nur ein Teil identifiziert ist. Außerdem entspricht der Erbgang bei Irischen Wolfshunden einem polygenen Hauptgen-Modell, so dass eine Mutati-on im Hauptgen nicht alle DCM Fälle erklärt und die Zahl vMutati-on weiteren zur Erkrankung beitra-genden Genen nicht bekannt ist. Für die Untersuchungen haben wir ein dominantes Hauptgen innerhalb der Irischen Wolfshund Population postuliert. Um kausale Gene für die DCM zu
iden-tifizieren, sollte man in einer weiterführenden Studie statt eines Kandidatengenansatzes einen positionellen Ansatz über eine Assoziationsstudie nutzen, um anschließend assoziierte Regionen auf funktionelle Kandidatengene hin zu analysieren. Denn in der seit rund 100 Jahre bestehenden Zucht der Irischen Wolfshunde könnten sich Defektallele etabliert haben, die bei Mensch oder Maus nur selten zu einer DCM-Erkrankung führen. Für die Assoziationsstudien bieten sich SNP-Chips an, die eine Alternative zu den früheren positionellen Ansätzen der klassischen Familien-untersuchung mit anschließender Kopplungsanalyse darstellen. Für die Aufklärung multifaktori-eller Merkmale wie DCM ist es nicht nur nötig, Genregionen (QTL) einzugrenzen, sondern auch die Auswirkung der einzelnen Genorte und den Effekt zwischen den Genloci abzuschätzen. Denn die Ausprägung der Erkrankung wird durch verschiedene genetische Faktoren beeinflusst. Die Interaktion sowohl zwischen Genen als auch zwischen Allelen eines Gens, also der resultierende Genotyp aus verschiedenen Genen (Epistasie), prägt den Phänotyp der DCM.
6 Ausblick
Bislang steht die Hundegenomik, die das Zusammenwirken von Genprodukten verschiedener Gene und damit auch den molekularen Aufbau komplexer Eigenschaften erklärt, noch am An-fang. Bei der Suche nach kausalen Mutationen muss man sich – unabhängig, ob Kandidatengen- oder positioneller Ansatz - von der Vorstellung lösen, dass diese im proteinkodierenden Bereich des Gens liegen müssen. Vielmehr, so zeigen neuere Untersuchungen, liegen kausale Mutationen auch in Promotorbereichen, führen veränderte Kopienzahlen von Genen, Duplikationen von Genombereichen, Inversionen und Translokationen zu anderen Phänotypen. Letztere sind aber mit den bislang genutzten Sequenzierungsmethoden nur bedingt zu finden, denn sie erfordern die Sequenzierung einer hohen Anzahl von Basen an einer großen Anzahl von Individuen. So bietet die Kombination der jüngst entwickelten Hochdurchsatzstrategien für Genotypisierung, Sequen-zierung und Expression eher die Möglichkeit, molekulargenetische Ursachen von Merkmalen zu identifizieren. Die Kombination dieser Techniken sollte insbesondere das Auffinden regulatori-scher Mutationen erleichtern und die Chance bieten, die Interaktion der Gene besser zu verste-hen. Dadurch sollte die Klärung der molekularen Mechanismen näher rücken sowie die Variati-on komplexer Eigenschaften besser erklärt und vorausgesagt werden können und somit ein bes-seres Verständnis der Hundegenomik erhalten werden.
7 Zusammenfassung
In der vorliegenden Arbeit wurden mittels molekulargenetischer Methoden züchterisch relevante Merkmale bei Hunden (Canis lupus familiaris) untersucht. Das Ziel war, eine zum Phänotyp as-soziierte Genvariante zu finden bzw. die kausale Mutation zu identifizieren. Die Arbeit gliedert sich in drei Teile: In den ersten beiden Kapiteln wurden Gene analysiert, deren Mutation ursäch-lich für beobachtete Phänotypen - Farbdilution bei Pinschern beziehungsweise dilatative Kardi-omyopathie (DCM) bei Irischen Wolfshunden - sein könnten. Im abschließenden Teil der Arbeit wurden bei der Rasse Elo Polymorphismen im MDR1-Gen (Multidrug Resistance Gene oder ABCB1, ATP-binding Cassette, subfamily B member 1) charakterisiert und die Auswirkung der Genvarianten auf die Expression und damit den Phänotyp untersucht.
Im ersten Teil der Arbeit wurde das Dilutionsgen bei Hunden charakterisiert und die wahrschein-lich kausale Mutation für die Farbdilution identifiziert. Diese Analysen wurden hauptsächwahrschein-lich bei den Rassen Deutscher Pinscher und Dobermann Pinscher durchgeführt. Der Phänotyp der Farb-dilution wird monogen autosomal rezessiv vererbt. Um das bei Hunden kausale Gen für die Farbdilution zu identifizieren, wurde das Melanophilingen (MLPH), ein bei Mensch und Maus beschriebenes Kandidatengen für Farbaufhellung, sequenziert und auf Mutationen untersucht, die spezifisch bei Hunden mit aufgehellter Fellfarbe auftreten. Eine Assoziationsstudie mit 343 Hunden verschiedener Rassen zeigte, dass das MLPH-Gen mit der Farbverdünnung assoziiert ist.
Eine kausale Mutation im kodierenden Bereich des Gens konnte nicht nachgewiesen werden.
Allerdings konnte bei allen Tieren mit dieser Farbmutation des Fells eine gemeinsame Mutation direkt an der Spleißstelle des nicht-kodierenden ersten Exons des MLPH-Gens identifiziert wer-den. Diese Mutation könnte zu abnormalen Spleißprodukten führen und damit kausal für die Aufhellung der Fellfarbe bei Hunden sein. Expressionsanalysen bestätigten zudem, dass bei Hunden mit aufgehellter Fellfarbe die MLPH-Transkripthöhe verglichen mit Hunden ohne den Aufhellungsfaktor reduziert ist. Diese Ergebnisse deuten darauf hin, dass die Mutation im ersten Exon tatsächlich die kausale Mutation für die Farbdilution bei Hunden sein könnte.
Der zweite Teil der Arbeit befasst sich mit den molekulargenetischen Grundlagen der dilatativen Kardiomyopathie bei Irischen Wolfshunden. DCM ist eine Erkrankung, deren Ausprägung vom Zusammenspiel mehrerer Gene bestimmt wird. Ihre Vererbung bei Irischen Wolfshunden ent-spricht einem dominanten Hauptgen-Modell mit einem geschlechtsspezifischen Alleleffekt. In der Studie wurden insgesamt acht bei Mensch und Maus beschriebene Kandidatengene, TAZ,
ACTC1, CSRP, DES, PLN, SCGD, TMOD1 und TCAP, untersucht und auf Kopplung und Asso-ziation zu DCM bei Irischen Wolfshunden getestet. Alle acht Kandidatengene konnten als für DCM kausal bei Irischen Wolfshunden ausgeschlossen werden, da eine Kosegreagtion von Alle-len mit dem DCM Status nicht nachweisbar war.
Im dritten Teil der Arbeit wurde das MDR1-Gen bei der Hunderasse Elo charakterisiert. MDR1 kodiert ein transmembranes Transportprotein, das P-Glykoprotein, das u. a. eine wichtige Rolle im Stofftransport verschiedener Gewebe spielt. Ziel dieser Studie war, die Identifizierung bislang unbekannter caniner MDR1-Genvarianten und ihr Einfluss auf die Expression. Dazu wurde die cDNA von Elos sequenziert und vier Polymorphismen identifiziert, von denen einer, der c.3439A>G Polymorphismus, zu einem Met1147Val Aminosäureaustausch führte. Die anschlie-ßende Expressionsstudie an Haarwurzelzellen zeigte, dass Genotyp und Geschlecht der Tiere die relative Transkripthöhe von MDR1 beeinflussen. Bei G/G-Tieren konnte insgesamt eine niedri-gere relative Transkriptmenge nachgewiesen werden als bei A/A-Tieren. Die Auswertung nach Geschlecht und Genotyp ergab, dass der genotypspezifische Effekt nur durch die männlichen Tiere verursacht wurde. Bei männlichen A/A-Tieren konnte die höchste relative MDR1-Tran-skripthöhe gemessen werden. Der Unterschied zur TranMDR1-Tran-skripthöhe bei männlichen G/G-Tieren war signifikant. Die bei weiblichen A/A-Tieren gemessene relative MDR1-Transkripthöhe war im Vergleich zu männlichen Tieren des gleichen Genotyps verringert. Auch bei weiblichen A/A-Tieren war die relative MDR1-Transkriptmenge höher als bei weiblichen G/G-Tieren. Der geno-typspezifische Unterschied war jedoch nicht signifikant. Ob und welche Auswirkungen diese Er-gebnisse in-vivo auf den Transport MDR1-abhängiger Substrate haben, müssen weitere Studien zeigen.
8 Literaturnachweis
Aguirre-Hernández J, Sargan DR. Evaluation of candidate genes in the absence of positional in-formation: a poor bet on a blind dog! J Hered. 2005; 96: 475-484.
Anderson L. Genome-wide association analysis in domestic nimals: a powerful approach for ge-netic dissection of trait loci. Gege-netica. 2009; 136: 341-349.
Anistoroaei R, Christensen K. Mapping of the silver gene in mink and its association with the dilution gene in dog. Cytogenet Genome Res. 2007; 116: 316–318.
Arceci RJ, Baas F, Raponi R, Horwitz SB, Housman D, Croop JM. Multidrug resistance gene expression is controlled by steroid hormones in the secretory epithelium of the uterus. Mol Reprod Dev. 1990; 25: 101-109.
Aretz S, Uhlhaas S, Sun Y, Pagenstecher C, Mangold E, Caspari R, Möslein G, Schulmann K, Propping P, Friedl W. Familial adenomatous polyposis: aberrant splicing due to missense or silent mutations in the APC gene. Hum Mutat. 2004; 24: 370-380.
Arola AM, Sanchez X, Murphy RT, Hasle E, Li H, Elliott PM, McKenna WJ, Towbin JA, Bowles NE. Mutations in PDLIM3 and MYOZ1 encoding myocyte Z line proteins are in-frequently found in idiopathic dilated cardiomyopathy. Mol Genet Metab. 2007; 90: 435-440.
Austin VH. Selected case reports in small animal dermatology. Mod Vet Pract. 1975; 56: 31-34.
Austin VH. Alopecias of the dog and cat. Part II Mod Vet Pract. 1979; 60: 130-134.
Axiotis CA, Guarch R, Merino MJ, Laporte N, Neumann RD. P-glycoprotein expression is in-creased in human secretory and gestational endometrium. Lab Invest. 1991; 65: 577-581.
Barral DC, Seabra MC. The melanosome as a model to study organelle motility in mammals.
Pigment Cell Res. 2004;17: 111-118.
Breen M, Hitte C, Lorentzen TD, Thomas R, Cadieu E, Sabacan L, Scott A, Evanno G, Parker HG, Kirkness EF, Hudson R, Guyon R, Mahairas GG, Gelfenbeyn B, Fraser CM, André C, Galibert F, Ostrander EA. An integrated 4249 marker FISH/RH map of the canine ome.
BMC Genomics. 2004; 5: 65.
Breen M, Jouquand S, Renier C, Mellersh CS, Hitte C, Holmes NG, Chéron A, Suter N, Vignaux F, Bristow AE, Priat C, McCann E, André C, Boundy S, Gitsham P, Thomas R, Bridge WL, Spriggs HF, Ryder EJ, Curson A, Sampson J, Ostrander EA, Binns MM, Galibert F. Chro-mosome-specific single-locus FISH probes allow anchorage of an 1800-marker integrated radiation-hybrid/linkage map of the domestic dog genome to all chromosomes. Genome Res. 2001; 11: 1784-1795.
Broschk C, Distl O. Dilated cardiomyopathy (DCM) in dogs-pathological, clinical, diagnosis and genetic aspects. Dtsch Tierärztl Wochenschr. 2005; 112: 380-385.
Brownlie SE, Cobb MA. Observations on the development of congestive heart failure in Irish wolfhounds with dilated cardiomyopathy. J Small Anim Pract. 1999; 40: 371-377.
Burk O, Arnold KA, Geick A, Tegude H, Eichelbaum M. A role for constitutive androstane re-ceptor in the regulation of human intestinal MDR1 expression. Biol Chem. 2005; 386: 503-513.
Candille SI, Kaelin CB, Cattanach BM, Yu B, Thompson DA, Nix MA, Kerns JA, Schmutz SM, Millhauser GL, Barsh GS. A β-defensin mutation causes black coat color in domestic dogs.
Science. 2007; 318: 1418-1423.
Chamary JV, Hurst LD. Evidence for selection on synonymous mutations affecting stability of mRNA secondary structure in mammals. Genome Biol. 2005; 6: R75.
Chase K, Carrier DR, Adler FR, Ostrander EA, Lark KG. Interaction between the X chromo-some and an autochromo-some regulates size sexual dimorphism in Portuguese Water Dogs. Ge-nome Res. 2005; 15: 1820-1824.
Chase K, Sargan D, Miller K, Ostrander EA, Lark KG. Understanding the genetics of autoim-mune disease: two loci that regulate late onset Addison's disease in Portuguese Water Dogs.
Int J Immunogenet. 2006; 33: 179-184.
D'Adamo P, Fassone L, Gedeon A, Janssen EA, Bione S, Bolhuis PA, Barth PG, Wilson M, Haan E, Orstavik KH, Patton MA, Green AJ, Zammarchi E, Donati MA, Toniolo D. The X-linked gene G4.5 is responsible for different infantile dilated cardiomyopathies. Am J Hum Genet. 1997; 61: 862-867.
Dambach DM, Lannon A, Sleeper MM, Buchanan J. Familial dilated cardiomyopathy of young Portuguese water dogs. J Vet Intern Med. 1999; 13: 65-71.
Distl O, Vollmar AC, Broschk C, Hamann H, Fox PR. Complex segregation analysis of dilated cardiomyopathy (DCM) in Irish wolfhounds. Heredity. 2007; 99: 460-465.
Drögemüller C, Karlsson EK, Hytönen MK, Perloski M, Dolf G, Sainio K, Lohi H, Lindblad-Toh K, Leeb T. A mutation in hairless dogs implicates FOXI3 in Ectodermal Development.
Science. 2008; 321: 1462.
Duan J, Antezana MA. Mammalian mutation pressure, synonymous codon choice, and mRNA degradation. J Mol Evol. 2003; 57: 694-701.
Dukes-McEwan JI, Jackson J. The promises and problems of linkage analysis by using the cur-rent canine genome. Mamm Genome. 2002; 13: 667-672.
Fecht S, Wöhlke A, Hamann H, Distl O. Analysis of the canine mdr1-1Delta mutation in the dog breed Elo. J Vet Med A Physiol Pathol Clin Med. 2007; 54: 401-405.
Fellay J, Marzolini C, Meaden ER, Back DJ, Buclin T, Chave JP, Decosterd LA, Furrer H, Opravil M, Pantaleo G, Retelska D, Ruiz L, Schinkel AH, Vernazza P, Eap CB, Telenti A;
Swiss HIV Cohort Study. Response to antiretroviral treatment in HIV-1-infected individu-als with allelic variants of the multidrug resistance transporter 1: a pharmacogenetics study.
Lancet. 2002; 359: 30-36.
Feng J, Yan J, Buzin CH, Towbin JA, Sommer SS. Mutations in the dystrophin gene are associ-ated with sporadic dilassoci-ated cardiomyopathy. Mol Genet Metab. 2002; 77: 119-126.
Fojo AT, Ueda K, Slamon DJ, Poplack DG, Gottesman MM, Pastan I. Expression of a multidrug-resistance gene in human tumors and tissues. Proc Natl Acad Sci. 1987; 84: 265-269.
Fu XD. Towards a splicing code. Cell. 2004; 119: 736-738.
Fukuda M. Versatile role of Rab27 in membrane trafficking: focus on the Rab27 effector fami-lies. J Biochem. 2005; 137: 9-16.
Georges M. Mapping, fine mapping, and molecular dissection of quantitative trait Loci in do-mestic animals. Annu Rev Genomics Hum Genet. 2007; 8:131-162.
Geick A, Eichelbaum M, Burk O. Nuclear receptor response elements mediate induction of intes-tinal MDR1 by rifampin, J. Biol. Chem. 2001; 276: 14581-14587.
Gibbs RA, Weinstock GM, Metzker ML, Muzny DM, Sodergren EJ, Scherer S, Scott G, Steffen D, Worley KC, Burch PE, Okwuonu G, Hines S, Lewis L, DeRamo C, Delgado O, Dugan-Rocha S, Miner G, Morgan M, Hawes A, Gill R, Celera, Holt RA, Adams MD, Amanatides PG, Baden-Tillson H, Barnstead M, Chin S, Evans CA, Ferriera S, Fosler C, Glodek A, Gu Z, Jennings D, Kraft CL, Nguyen T, Pfannkoch CM, Sitter C, Sutton GG, Venter JC, Woo-dage T, Smith D, Lee HM, Gustafson E, Cahill P, Kana A, Doucette-Stamm L, Weinstock K, Fechtel K, Weiss RB, Dunn DM, Green ED, Blakesley RW, Bouffard GG, De Jong PJ, Osoegawa K, Zhu B, Marra M, Schein J, Bosdet I, Fjell C, Jones S, Krzywinski M,
Mathewson C, Siddiqui A, Wye N, McPherson J, Zhao S, Fraser CM, Shetty J, Shatsman S, Geer K, Chen Y, Abramzon S, Nierman WC, Havlak PH, Chen R, Durbin KJ, Egan A, Ren Y, Song XZ, Li B, Liu Y, Qin X, Cawley S, Worley KC, Cooney AJ, D'Souza LM, Martin K, Wu JQ, Gonzalez-Garay ML, Jackson AR, Kalafus KJ, McLeod MP, Milosavljevic A, Virk D, Volkov A, Wheeler DA, Zhang Z, Bailey JA, Eichler EE, Tuzun E, Birney E, Mongin E, Ureta-Vidal A, Woodwark C, Zdobnov E, Bork P, Suyama M, Torrents D, Alex-andersson M, Trask BJ, Young JM, Huang H, Wang H, Xing H, Daniels S, Gietzen D, Schmidt J, Stevens K, Vitt U, Wingrove J, Camara F, Mar Albà M, Abril JF, Guigo R, Smit A, Dubchak I, Rubin EM, Couronne O, Poliakov A, Hübner N, Ganten D, Goesele C, Hummel O, Kreitler T, Lee YA, Monti J, Schulz H, Zimdahl H, Himmelbauer H, Lehrach H, Jacob HJ, Bromberg S, Gullings-Handley J, Jensen-Seaman MI, Kwitek AE, Lazar J, Pasko D, Tonellato PJ, Twigger S, Ponting CP, Duarte JM, Rice S, Goodstadt L, Beatson SA, Emes RD, Winter EE, Webber C, Brandt P, Nyakatura G, Adetobi M, Chiaromonte F, Elnitski L, Eswara P, Hardison RC, Hou M, Kolbe D, Makova K, Miller W, Nekrutenko A, Riemer C, Schwartz S, Taylor J, Yang S, Zhang Y, Lindpaintner K, Andrews TD, Caccamo M, Clamp M, Clarke L, Curwen V, Durbin R, Eyras E, Searle SM, Cooper GM, Batzoglou S, Brudno M, Sidow A, Stone EA, Venter JC, Payseur BA, Bourque G, López-Otín C, Puente XS, Chakrabarti K, Chatterji S, Dewey C, Pachter L, Bray N, Yap VB, Caspi A, Tesler G, Pevzner PA, Haussler D, Roskin KM, Baertsch R, Clawson H, Furey TS, Hin-richs AS, Karolchik D, Kent WJ, Rosenbloom KR, Trumbower H, Weirauch M, Cooper DN, Stenson PD, Ma B, Brent M, Arumugam M, Shteynberg D, Copley RR, Taylor MS, Riethman H, Mudunuri U, Peterson J, Guyer M, Felsenfeld A, Old S, Mockrin S, Collins F;
Rat Genome Sequencing Project Consortium. Genome sequence of the Brown Norway rat yields insights into mammalian evolution. Nature. 2004; 428: 493-521.
Gutiérrez-Gil B, Wiener P, Williams JL. Genetic effects on coat colour in cattle: dilution of eu-melanin and phaeoeu-melanin pigments in an F2-Backcross Charolais x Holstein population.
BMC Genet. 2007; 8: 56.
Guyon R, Lorentzen TD, Hitte C, Kim L, Cadieu E, Parker HG, Quignon P, Lowe JK, Renier C, Gelfenbeyn B, Vignaux F, DeFrance HB, Gloux S, Mahairas GG, André C, Galibert F, Ost-rander EA.A 1-Mb resolution radiation hybrid map of the canine genome.Proc Natl Acad Sci. 2003; 100: 5296-5301.
He L, Gunn TM, Bouley DM, Lu XY, Watson SJ, Schlossman SF, Duke-Cohan JS, Barsh GS. A biochemical function for attractin in agouti-induced pigmentation and obesity. Nat Genet.
2001; 27: 40-47.
Hoffmeyer S, Burk O, von Richter O, Arnold HP, Brockmöller J, Johne A, Cascorbi I, Gerloff T, Roots I, Eichelbaum M, Brinkmann U. Functional polymorphisms of the human multidrug-resistance gene: multiple sequence variations and correlation of one allele with P-glycoprotein expression and activity in vivo. Proc Natl Acad Sci. 2000; 97: 3473-3478.
Hume AN, Collinson LM, Hopkins CR, Strom M, Barral DC, Bossi G, Griffiths GM, Seabra MC. The leaden gene product is required with Rab27a to recruit myosin Va to melano-somes in melanocytes. Traffic. 2002; 3: 193-202.
Ichida F, Tsubata S, Bowles KR, Haneda N, Uese K, Miyawaki T, Dreyer WJ, Messina J, Li H, Bowles NE, Towbin JA. Novel gene mutations in patients with left ventricular noncompac-tion or Barth syndrome. Circulanoncompac-tion. 2001; 103: 1256-1263.
Ishida Y, David VA, Eizirik E, Schäffer AA, Neelam BA, Roelke ME, Hannah SS, O'brien SJ, Menotti-Raymond M. A homozygous single-base deletion in MLPH causes the dilute coat color phenotype in the domestic cat. Genomics. 2006; 88: 698-705.
Jenkins NA, Copeland NG, Taylor BA, Lee BK. Dilute (d) coat colour mutation of DBA/2J mice is associated with the site of integration of an ecotropic MuLV genome. Nature. 1981; 293:
370-374.
Jordan SA, Jackson IJ. Melanocortin receptors and antagonists regulate pigmentation and body weight. Bioessays. 1998; 20: 603-606.
Karlsson EK, Baranowska I, Wade CM, Salmon Hillbertz NH, Zody MC, Anderson N, Biagi TM, Patterson N, Pielberg GR, Kulbokas EJ 3rd, Comstock KE, Keller ET, Mesirov JP, von Euler H, Kämpe O, Hedhammar A, Lander ES, Andersson G, Andersson L, Lindblad-Toh K. Efficient mapping of mendelian traits in dogs through genome-wide association.
Nat Genet. 2007; 39: 1321-1328.
Kawabata A, Momoi Y, Inoue-Murayama M, Iwasaki T. Canine mdr1 gene mutation in Japan. J Vet Med Sci. 2005; 67: 1103-1107.
Kerns JA, Newton J, Berryere TG, Rubin EM, Cheng JF, Schmutz SM, Barsh GS. Characteriza-tion of the dog Agouti gene and a nonagoutimutaCharacteriza-tion in German Shepherd Dogs Mamm Genome. 2004; 15: 798-808.
Kimchi-Sarfaty C, Oh JM, Kim IW, Sauna ZE, Calcagno AM, Ambudkar SV, Gottesman MM. A
"silent" polymorphism in the MDR1 gene changes substrate specificity. Science. 2007;
315: 525-528.
Kirkness EF, Bafna V, Halpern AL, Levy S, Remington K, Rusch DB, Delcher AL, Pop M, Wang W, Fraser CM, Venter JC. The dog genome: survey sequencing and comparative analysis.
Science. 2003; 301: 1898-1903.
Krawczak M, Thomas NS, Hundrieser B, Mort M, Wittig M, Hampe J, Cooper DN. Single base-pair substitutions in exon-intron junctions of human genes: nature, distribution, and conse-quences for mRNA splicing. Hum Mutat. 2007; 28: 150-158.
Laukner A. Coat color in dogs 2: Clinical significance. Tierärztl Prax Ausg K Kleintiere Heimtie-re. 1998; 26: 124-128.
Li R, Mignot E, Faraco J, Kadotani H, Cantanese J, Zhao B, Lin X, Hinton L, Ostrander EA, Patterson DF, de Jong PJ. Construction and characterization of an eightfold redundant dog genome bacterial artificial chromosome library. Genomics. 1999; 58: 9-19.
Lindblad-Toh K, Wade CM, Mikkelsen TS, Karlsson EK, Jaffe DB, Kamal M, Clamp M, Chang JL, Kulbokas EJ 3rd, Zody MC, Mauceli E, Xie X, Breen M, Wayne RK, Ostrander EA, Ponting CP, Galibert F, Smith DR, DeJong PJ, Kirkness E, Alvarez P, Biagi T, Brockman W, Butler J, Chin CW, Cook A, Cuff J, Daly MJ, DeCaprio D, Gnerre S, Grabherr M, Kel-lis M, Kleber M, Bardeleben C, Goodstadt L, Heger A, Hitte C, Kim L, Koepfli KP, Parker HG, Pollinger JP, Searle SM, Sutter NB, Thomas R, Webber C, Baldwin J, Abebe A, Abou-elleil A, Aftuck L, Ait-Zahra M, Aldredge T, Allen N, An P, Anderson S, Antoine C,
Lindblad-Toh K, Wade CM, Mikkelsen TS, Karlsson EK, Jaffe DB, Kamal M, Clamp M, Chang JL, Kulbokas EJ 3rd, Zody MC, Mauceli E, Xie X, Breen M, Wayne RK, Ostrander EA, Ponting CP, Galibert F, Smith DR, DeJong PJ, Kirkness E, Alvarez P, Biagi T, Brockman W, Butler J, Chin CW, Cook A, Cuff J, Daly MJ, DeCaprio D, Gnerre S, Grabherr M, Kel-lis M, Kleber M, Bardeleben C, Goodstadt L, Heger A, Hitte C, Kim L, Koepfli KP, Parker HG, Pollinger JP, Searle SM, Sutter NB, Thomas R, Webber C, Baldwin J, Abebe A, Abou-elleil A, Aftuck L, Ait-Zahra M, Aldredge T, Allen N, An P, Anderson S, Antoine C,