2 Material und Methoden
3.4 Quantitative Auswertung der mittleren Dichte der Leptinexpression
Zur besseren Beurteilbarkeit der signifikanten Werte werden nur jeweils vier Gruppen pro Diagramm und damit zwei Vergleiche grafisch dargestellt. Die Balken der verschiedenen Gruppen kommen somit in mehreren Abbildungen vor.
3.4.1 Wildtyp-Ratten jung vs. alt
Die histologische Auswertung ergab eine signifikante (p<0,0001) Erhöhung der mittleren Dichte der Leptinexpression bei den alten Wildtyp-Ratten im Vergleich mit den jungen Wild-typ-Ratten (Abbildung 13). Bei den Wt_m_14-Ratten betrug die mittlere Zunahme im Ver-gleich zu den jüngeren Wt_m_3-Ratten 9,0 %. Der Ver-gleiche Effekt zeigte sich bei der Gegenü-berstellung der weiblichen Tiere. Dort lag der signifikante (p<0,0001) Unterschied von Wt_w_14 zu Wt_w_3 bei 16,4 %.
0 25 50 75 100
125 *
W t_m_14
Wt_m_3 W t_w _3 Wt_w _14
*
jung alt
Leptinexpression (mittlere Dichte)
Abbildung 13: Mittlere Dichte der Leptinexpression im Leberschnitt bei Wildtyp-Ratten; * markiert den signi-fikanten Unterschied (p<0,0001) in einer Geschlechtsgruppe zwischen jungen und alten Ratten.
Zur Errechnung der Mittelwerte und des SEM wurden pro Gruppe (5 Tiere) n=40 Einzelmess-werte verwendet. Pro Tier wurden von vier Schnitten jeweils zwei Fotos (Fläche pro Foto:
0,27 mm²) benutzt. Die Messfläche für jeden Einzelmesswert betrug 0,54 mm². Bei fünf Tieren pro Gruppe ergab dies eine Gesamtmessfläche von 10,8 mm².
Ergebnisse 25
3.4.2 HDtg-Ratten jung vs. alt
Bei den Huntington transgenen Ratten waren signifikante Effekte (p=0,0001) bei dem Ver-gleich der männlichen Jungtiere mit den männlichen Alttieren zu erkennen (Abbildung 14). Bei den HDtg_m_14-Ratten war die mittlere Dichte der Leptinexpression im Vergleich zu den HDtg_m_3-Ratten um 7,6 % höher. Bei den korrespondierenden weiblichen Versuchstie-ren gab es keine signifikanten Effekte.
0 25 50 75 100
125 *
HDtg_m_14
HDtg_m_3 HDtg_w _3 HDtg_w _14
jung alt
Leptinexpression (mittlere Dichte)
Abbildung 14: Mittlere Dichte der Leptinexpression im Leberschnitt bei HDtg-Ratten; * markiert den signifi-kanten Unterschied (p<0,0001) in einer Geschlechtsgruppe zwischen jungen und alten Ratten.
Zur Errechnung der Mittelwerte und des SEM wurden pro Gruppe n=40 Einzelmesswerte ver-wendet. Pro Tier wurden von vier Schnitten jeweils zwei Fotos (Fläche pro Foto: 0,27 mm²) benutzt. Die Messfläche für jeden Einzelmesswert betrug 0,54 mm². Bei fünf Tieren pro Grup-pe ergab dies eine Gesamtmessfläche von 10,8 mm².
Ergebnisse 26
3.4.3 Wildtyp-Ratten männlich vs. weiblich
Nach histologischer Auswertung waren signifikante Effekte (p<0,01) bei dem Vergleich der gesunden, männlichen Jungtiere mit den gesunden, weiblichen Jungtieren zu erkennen (Ab-bildung 15). Hier wiesen die weiblichen Ratten eine niedrigere mittlere Dichte der Leptinexp-ression auf als die männlichen Tiere. Die Abnahme bei den Wt_w_3-Ratten im Vergleich zu den Wt_m_3-Ratten betrug 5,6 %. Keine Signifikanz konnte jedoch bei dem Vergleich der alten Wildtyp-Tiere gefunden werden.
0 25 50 75 100 125
#
W t_m_14 Wt_w _14
W t_m_3 W t_w _3
männlich weiblich
Leptinexpression (mittlere Dichte)
Abbildung 15: Mittlere Dichte der Leptinexpression im Leberschnitt bei Wildtyp-Ratten; # markiert den signi-fikanten Unterschied (p<0,01) zwischen männlichen und weiblichen Ratten mit gleichem Le-bensalter. Zur Errechnung der Mittelwerte und des SEM wurden pro Gruppe n=40 Einzel-messwerte verwendet. Pro Tier wurden von vier Schnitten jeweils zwei Fotos (Fläche pro Foto:
0,27 mm²) benutzt. Die Messfläche für jeden Einzelmesswert betrug 0,54 mm². Bei fünf Tieren pro Gruppe ergab dies eine Gesamtmessfläche von 10,8 mm².
Ergebnisse 27
3.4.4 HDtg-Ratten männlich vs. weilblich
Im Gegensatz zu der Vergleichsgruppe der Wildtyp-Ratten wurden signifikante Effekte (p<0,0001) bei dem Vergleich der kranken männlichen Alttiere mit den kranken weiblichen Alttieren festgestellt (Abbildung 16). Bei den HDtg_w_14-Ratten wurden durchschnittlich um 7,9 % niedrigere Werte gemessen als bei den HDtg_m_14-Ratten. Bei den jungen HDtg-Ratten konnte bei dem Geschlechtervergleich kein signifikanter Effekt festgestellt wer-den.
0 25 50 75 100 125
#
HDtg_m_14
HDtg_m_3 HDtg_w _3 HDtg_w _14
männlich weiblich
Leptinexpression (mittlere Dichte)
Abbildung 16: Mittlere Dichte der Leptinexpression im Leberschnitt bei HDtg-Ratten; # markiert den signifi-kanten Unterschied (p<0,0001) zwischen männlichen und weiblichen Ratten mit gleichem Le-bensalter. Zur Errechnung der Mittelwerte und des SEM wurden pro Gruppe n=40 Einzel-messwerte verwendet. Pro Tier wurden von vier Schnitten jeweils zwei Fotos (Fläche pro Foto:
0,27 mm²) benutzt. Die Messfläche für jeden Einzelmesswert betrug 0,54 mm². Bei fünf Tieren pro Gruppe ergab dies eine Gesamtmessfläche von 10,8 mm².
Ergebnisse 28
3.4.5 Jungtiere Wildtyp vs. HDtg-Ratten
Signifikante Effekte waren bei dem Vergleich der kranken Jungtiere mit den gesunden Jung-tieren zu erkennen. Sowohl bei den männlichen, als auch bei den weiblichen JungJung-tieren zeigte sich bei den HDtg-Tieren eine Erhöhung der Leptinexpression im Vergleich mit den korres-pondierenden Wildtyp-Tieren (Abbildung 17). Im Vergleich zu den Wt_m_3-Tieren wiesen die HDtg_m_3-Ratten durchschnittlich um 4,2 % höhere Werte auf (p<0,05). Bei den HDtg_w_3-Ratten waren gegenüber den Wt_w_3-Ratten die Werte um 11,4 % höher (p<0,0001).
0 25 50 75 100 125
Wt_m_3 W t_w _3 HDtg_m_3 HDtg_w _3
§ §
gesund krank
Leptinexpression (mittlere Dichte)
Abbildung 17: Mittlere Dichte der Leptinexpression im Leberschnitt bei Wildtyp- und HDtg-Ratten; § mar-kiert den signifikanten Unterschied (männlich: p<0,05; weiblich: p<0,0001) zwischen jungen gesunden und kranken Ratten mit gleichem Geschlecht. Zur Errechnung der Mittelwerte und des SEM wurden pro Gruppe n=40 Einzelmesswerte verwendet. Pro Tier wurden von vier Schnitten jeweils zwei Fotos (Fläche pro Foto: 0,27 mm²) benutzt. Die Messfläche für jeden Einzelmesswert betrug 0,54 mm². Bei fünf Tieren pro Gruppe ergab dies eine Gesamtmessflä-che von 10,8 mm².
Ergebnisse 29
3.4.6 Alttiere Wildtyp vs. HDtg-Ratten
Bei den Alttieren konnten nur signifikante Effekte bei den weiblichen Tieren, nicht jedoch bei den männlichen Ratten, festgestellt werden (Abbildung 18). Allerdings verminderten sich im Gegensatz zu den Jungtieren bei den Weibchen die Werte der mittleren Dichte der Leptinexp-ression bei den kranken HDtg-Tieren. Im Vergleich mit den Wt_w_14-Ratten wurde bei den HDtg_w_14-Ratten eine Reduktion um 6,0 % festgestellt (p<0,01).
0 25 50 75 100 125
Wt_m_14 Wt_w _14 HDtg_m_14 HDtg_w _14
§
gesund krank
Leptinexpression (mittlere Dichte)
Abbildung 18: Mittlere Dichte der Leptinexpression im Leberschnitt bei Wildtyp- und HDtg-Ratten; § mar-kiert den signifikanten Unterschied (p<0,01) zwischen alten gesunden und kranken Ratten mit gleichem Geschlecht. Zur Errechnung der Mittelwerte und des SEM wurden pro Gruppe n=40 Einzelmesswerte verwendet. Pro Tier wurden von vier Schnitten jeweils zwei Fotos (Fläche pro Foto: 0,27 mm²) benutzt. Die Messfläche für jeden Einzelmesswert betrug 0,54 mm². Bei fünf Tieren pro Gruppe ergab dies eine Gesamtmessfläche von 10,8 mm².
Ergebnisse 30
3.4.7 Immunhistologische Fotografien der Leptinexpression in der Leber
Abbildung 19:
Lebergewebe mit einer hohen Leptinsynthese;
Leptin rot angefärbt.
Abbildung 20:
Lebergewebe mit einer geringen Leptinsynthese;
Leptin rot angefärbt.
100 μm
100 μm
Ergebnisse 31
3.5 Quantitative Auswertung der Ob-Rezeptor exprimierenden Zellen