N 2 , 9-Diacetylguanin - Chemische Synthese

5.3 Chemische Synthese

5.3.18 N 2 , 9-Diacetylguanin

C₉H₉N₅O₃ [235,20 g·mol⁻¹]

7,55 g (0,050 mol) Guanin, 90,0 mL Essigs¨aureanhydrid, 180 mL Essigs¨aure und 0,611g (0,050mol) 4-(Dimethylamino)pyridin wurden in einem Kolben gegeben. Die Reaktionsmischung wurde bei 125 ^◦C erhitzt. Nach 18 Stunden entstand eine klare L¨osung. Das L¨osungsmittel wurde unter Vakuum entfernt. Der R¨uckstand wurde noch mehrmals mit destilliertem Wasser gewaschen und abfiltriert. Der Feststoff wurde unter Vakuum getrocknet.

Ausbeute: 9,39 g (0,040mol), weißer Feststoff, 80 % DC(DCM:MeOH, 10:1): R_f: 0,27

MS (HRMS, positiv Modus): [M+Na]⁺

m/z berechnet: 258,0598

m/z gemessen: 258,0598

1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.45 (1H, s, H-8), 2.82 (3H, s, OCH3), 2.21 (3H, s, COCH₃)

13C-NMR(101 MHz, DMSO-d6):δ = 173.8, 168.0, 154.7, 148.4, 147.9, 137.5, 121.5, 24.7, 23.9

5.3.19 2-Amino-6-chlorpurin

C₅H₄ClN₅ [169,57 g·mol⁻¹]

9,39g (0,040mol) N²,9-Diacetylguanin, 18,2g (0,120mol) Methyltriethylammonium-chlorid und 5,56 mL (0,040 mol) Triethtylamin wurden in 100 mL abs. Acetonitril zugegeben und auf 50 ^◦C erhitzt. 7,33 mL (0,080 mol) Phosphorylchlorid wurden dann bei dieser Temperatur langsam gegeben. Danach wurde die Reaktionsmischung bei 50 ^◦C noch weitere 4 Stunden ger¨uhrt. Nach Abk¨uhlung wurde NaOH- L¨osung (24,0 g in 150 mL) zugegeben und bei 80 ^◦C 2 Stunden erhitzt. Dann wurden 100 mLdestilliertes Wasser dazugegossen und auf Raumtemperatur abgek¨uhlt. Mit 10 % HCl-L¨osung wurde der pH-Wert auf 7 gestellt. Die Mischung wurde 15 Min bei Raum-temperatur ger¨uhrt und dann bei 4 ^◦C ¨Ubernacht stehen gelassen. Der entstandene Niederschlag wurde abfiltriert, mit destilliertem Wasser gewaschen und unter Vakuum getrocknet.

Ausbeute: 9,39 g (0,040 mol), weißer Feststoff, 80 % DC (DCM:MeOH, 10:1): R_f: 0,38

MS(HRMS, negativ Modus): [M-H]⁻

m/z berechnet: 168,0082

m/z gemessen: 168,0080 (1,2 ppm)

1H-NMR(400 MHz, DMSO-d₆):δ= 12.83 (1H, s, NH), 8.08 (1H, s,H-8), 6.75 (2H, s, NH₂)

13C-NMR (101 MHz, DMSO-d₆):δ = 159.9, 155.0, 149.0, 141.3, 123.2

5.3.20 9-Acetyl-2-amino-6-chlorpurin

C₇H₆ClN₅O [211,61 g·mol⁻¹]

5,08 g (0,030 mol) 2-Amino-6-chlorpurin, 8,50 mL (0,090 mol) Essigs¨aureanhydrid und 12,5 mL (0,090 mol) Triethylamin wurden zusammen gemischt. Das Gemisch wurde bei 80 ^◦C 1,5 Stunden ger¨uhrt. Danach wurde 50 mL Toluol zugegeben und der Feststoff wurde abfiltriert und noch dreimal mit 15mL Isopropanol gewaschen.

Der Feststoff wurde dann unter Vakuum abgetrocknet.

Ausbeute: 3,80 g (0,018mol), brauner Feststoff, 60 % DC(DCM:MeOH, 10:1): R_f: 0,40

MS (HRMS, positiv Modus): [M-H]⁻

m/z berechnet: 210,0188

m/z gemessen: 210,0188

1H-NMR(400 MHz, DMSO-d₆):δ = 8.54 (1H, s,H-8), 7,26 (2H, s, NH₂), 2,82 (3H, s, COCH3)

13C-NMR (101 MHz, DMSO-d6): δ = 167.9, 160.3, 153.1, 150.3, 139.9, 124.2, 24.7

5.3.21 6-Chlor-2-iodpurin

C₅H₂ClIN₄ [280,45 g·mol⁻¹]

3,60 g (0,017 mol) 9-Acetyl-2-amino-6-chlorpurin, 3,30 g (0,026 mol) Iod und 8,30 mL (0,062 mol) Isopentylnitrit wurden in 50,0 mL abs. Tetrahydrofuran zusammen gemischt. Das Gemisch wurde bei 55 ^◦C 2 Stunden ger¨uhrt. Danach wurde 100 mL 15 % Na₂S₂O₃ zugegeben und mit Methylisobutylketon extrahiert. Die orgainsche Phase wurde dann noch mehrmals mit 10 % NaOH-L¨osung extrahiert. Der pH-Wert der w¨assrigen Phase wurde auf pH 4-5 gestellt und bei 4^◦C ¨Ubernacht stehen gelassen.

Der Niederschlag wurde abfiltriert, mit destilliertem Wasser gewaschen und unter Vakuum getrocknet.

Ausbeute: 1,82 g (6,50 mmol), gelber Feststoff, 50 % DC (DCM:MeOH, 10:1): R_f: 0,57

MS (HRMS, positiv Modus): [M-H]⁻

m/z berechnet: 278,8940

m/z gemessen: 278,8940

1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6):δ = 14.02 (1H, s, NH), 8.63 (1H, s, H-8)

13C-NMR (101 MHz, DMSO-d₆): δ = 154.7, 147.8, 146.9, 130.3, 117.4

5.3.22 1,2-O -Isopropyliden-5-O -(4-methybenzoyl)-α-D-xylo-furanose

C₁₆H₂₀O₆ [308,33 g·mol⁻¹]

15,0 g (0,100 mol) D-Xylose wurden in 300 mL abs. Aceton suspendiert und mit 10,7 mL konz. (0,200 mol) Schwefels¨aure versetzt. Das Reaktionsgemisch wurde bei Raumtemperatur ger¨uhrt. Nach 1 Stunde ist das Gemisch klar geworden. Die L¨osung wurde auf 0 ^◦C abgek¨uhlt und mit NaOH neutralisiert (pH 7). Das Salz wurde ab-filtriert und noch mit Aceton gewaschen. Das L¨osungsmittel wurde unter Vakuum entfernt. Der R¨uckstand wurde mit 50 mL destilliertem Wasser versetzt und mehr-fach mit n-Hexan extrahiert. Die w¨assrige Phase wurde unter Vakuum eingeengt. Das Produkt wurde dreimal mit Ethanol/Toluol (1:1) koevaporiert und bis Gewichtskon-stanz eingetrocknet. 14,7 g (0,077 mol) Produkt wurden mit 10,0 mL abs. Pyridin koevaporiert und dann in 50,0mLabs. Pyridin aufgel¨ost. Die L¨osung wurde in einem Eisbad auf 0^◦C abgek¨uhlt. 10,3 mL (0,077 mol) p-Toluoylchlorid wurden innerhalb von ca. 30 Min zugetropft, wobei die Temperatur immer zwischen -1 und +1 ^◦C blieb. Die Reaktionsmischung wurde 1 Stunde bei 0^◦C ger¨uhrt. Anschließend wurde die L¨osung auf Eis gegossen und mit Ethylacetat mehrmals extrahiert. Die organische Phase wurde noch mit 1M Salzs¨aure dreimal gewaschen und mit MgSO₄ getrocknet.

Das L¨osungsmittel wurde unter Vakuum entfernt und das Produkt unter Vakuum bis Gewichtskonstanz eingetrocknet.

Ausbeute: 20,6 g (0,067mol), weißer Feststoff, 87 % DC(n-Hexan:EtOAc 2:1): R_f: 0,38

MS (ESI, positiv Modus): [M+Na]⁺

m/z berechnet: 331,12

m/z gemessen: 331,17

1H-NMR (400 MHz, CDCl₃):δ = 7.93 (2H, d, ³J = 8,2 Hz, Ar-H), 7.24 (2H, d, ³J

= 8,0 Hz, Ar-H), 5.95 (1H, d, ³J = 3,6 Hz, H-1), 4.76 (1H, q, ³J = 9,1 Hz, H-2), 4.58 (1H, d, ³J = 3,6 Hz, H-3), 4.93-4.35 (2H, m, H-5), 4.18 (1H, d, ³J = 2,2 Hz, H-4), 2.41 (3H, s, Ar-CH₃), 1.50 (3H, s, CCH₃), 1.32 (3H, s, CCH₃)

1H-NMR (101 MHz, CDCl₃): δ = 167.6, 144.5, 130.1, 129.3, 126.6, 112.0, 104.9, 85.2, 78.7, 74.5, 61.4, 26.9, 26.3, 21.8

5.3.23 3-Deoxy-1,2-O -isopropyliden-5-O -(4-methylbenzoyl)-α-D-ribofuranose

C₁₆H₂₀O₅ [292,33 g·mol⁻¹]

15,4 g (0,050 mol) 1,2-O-Isopropyliden-5-O-(methybenzoyl)-α-D-xylofuranose wur-den in 150mLabs. Acetonitril aufgel¨ost und dann mit 30,5g(0,250mol) 4-(Dimethyl-amino)pyridin umgesetzt. 8,30 mL (0,060 mol) Phenylchlorthionocarbonat wurden zugegeben. Die Reaktionsmischung wurde bei Raumtemperatur ger¨uhrt. Nach 2 Stun-den wurde das L¨osungsmittel unter Vakuum entfernt. Der R¨uckstand wurde mit 100 mL Ethylacetat aufgenommen und zweimal mit 1M HCl, ges¨attigter NaHCO₃ -L¨osung gewaschen. Das Ethylacetat wurde unter Vakuum entfernt. 17,8g (0,040mol) 1,2-O-Isopropyliden-5-O-(4-methybenzoyl)-3-O -(phenoxythiocarbony-l)-α-D-xylofur-anose wurden in 250mLabs. Toluol aufgel¨ost. 1,32g(8,00mmol) AIBN und 15,9mL

(0,060mol) Tributylzinnhydid wurden zugegeben. Die Reaktionsmischung wurde bei 75^◦C bis zum Verschwinden des Edukts erhitzt. Nach 5 Stunden wurde das L¨ osungs-mittel unter Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde s¨aulenchromatographisch an Kieselgel gereinigt (Eluent: n-Hexan:Diethyleter 9:1 - 4:1).

Ausbeute: 8,89 g (0,031mol), farbloses ¨Ol, 76 % DC(n-Hexan:Diethyleter 4:1): R_f: 0,28

MS (ESI, positiv Modus): [M+Na]⁺

m/z berechnet: 315,12

m/z gemessen: 315,15

1H-NMR (400 MHz, CDCl₃): δ = 7.93 (2H, d, ³J = 8,2 Hz, Ar-H), 7.21 (2H, d,

3J= 8,0 Hz, Ar-H), 5.85 (1H, d, ³J = 3,7 Hz, H-1), 4.75 (1H, t, ³J = 4,2 Hz, H-2), 4.54 (2H, ddd,³J₁ = 10,3 Hz,³J₂ = 5,5 Hz, ³J₃ = 3,5 Hz,H-4), 4.49 (1H, dd, ²J = 11,7 Hz, ³J = 3,5 Hz, H-5a), 4.33 (1H, dd, ²J = 11,7 Hz, ³J = 5,4 Hz, H-5b), 2.38 (3H, s, Ar-OCH₃), 2.16 (1H, dd, ²J = 13,2 Hz, ³J = 4,2 Hz, H-3a), 1.74 (1H, ddd,

2J = 13,0 Hz, ³J₁ = 10,4 Hz, ³J₂ = 4,6 Hz, H-3b), 1.52 (3H, s, CCH₃), 1.31 (3H, s, CCH₃)

13C-NMR (101 MHz, CDCl₃): δ = 166.4, 143.8, 129.8, 129.1, 127.2, 111.4, 105.8, 80.4, 75.9, 65.2, 35.5, 26.8, 26.2, 21.7

5.3.24 3-Deoxy-5-O -(4-methylbenzoyl)-α,β-D-ribofuranose

C₁₃H₁₆O₅ [252,26 g·mol⁻¹]

5,82 g (0,020 mol) 3-Deoxy-1,2-O-isopropyliden-5-O -(4-methylbenzoyl)-α-D-ribofur-anose wurden in 150mLAcetonitril aufgel¨ost, dann mit 10,0mLdestilliertem Wasser und 4,56 g (0,024 mol) p-Toluolsulfons¨aure versetzt. Die Reaktionsmischung wurde bei Raumtemperatur 48 Stunden ger¨uhrt. Nach DC war das Edukt nicht mehr zu se-hen. 200 mL ges¨attigte NaHCO3-L¨osung wurden zugegeben und dreimal mit jeweils 100mLChloroform extrahiert. Die organische Phase wurde danach mit NaCl-L¨osung gewaschen, ¨uber MgSO4 getrocknet und eingeengt. Das Rohprodukt wurde s¨ aulen-chromatographisch an Kieselgel gereinigt (Eluent: EtOAc:n-Hexan 3:1). Es entstand ein farbloses ¨Ol, das nach einigem Stehen bei 4^◦C kristallisiert.

Ausbeute: 4,20 g (0,017 mol), weißer Feststoff, 85 % DC (EtOAc:n-Hexan 3:1): Rf: 0,36

MS (ESI, positiv Modus): [M+Na]⁺

m/z berechnet: 275,09

m/z gemessen: 275,07

1H-NMR(400 MHz, CDCl₃):δ = 7.93 (4H, d,³J = 8,5 Hz, Ar-H), 7.23 (4H, d,³J= 7,2 Hz, Ar-H), 5.42 (1H, d, ³J = 4,0 Hz, H-1α), 5.33 (1H, s, H-1β), 4.73-4.62 (2H, m,H-4_αβ), 4.42-4.31 (5H, m,H-2_αβ, H-5aa⁰b), 4.25 (1H, dd,²J = 11,8 Hz,³J = 5,4 Hz, H-5b⁰), 2.40 (3H, s, Ar-CH3), 2.39 (3H, s, Ar-CH3), 2.17-2.03 (4H, m,H-3)

13C-NMR (101 MHz, CDCl₃): δ = 166.9, 166.7, 144.1, 129.9, 129.3, 127.3, 127.2, 103.2, 97.2, 76.5, 75.9, 71.8, 67.7, 66.5, 34.8, 34.1, 21.8

5.3.25 1,2-Di-O -acetyl-3-deoxy-5-O -(4-methylbenzoyl)-α,β-D-ribofuranose

C₁₇H₂₀O₇ [336,34 g·mol⁻¹]

4,20 g (0,017 mol) 3-Deoxy-5-O-(4-methylbenzoyl)-α,β-D-ribofuranose wurden in 50,0mL abs. Pyridin aufgel¨ost. 6,50mL Essigs¨aureanhydrid (0,069mol) wurden zu-gegeben. Die Reaktionsmischung wurde bei Raumtemperatur ger¨uhrt. Nach 3 Stun-den war das Edukt nicht mehr zu sehen. Unter starkem R¨uhren wurden Eis und NaHCO₃-L¨osung in die L¨osung gegossen. Die w¨asserige Phase wurde mehrmals mit Ethylacetat extrahiert. Die organische Phase wurde jeweils zweimal mit 1 M HCl, NaCl-L¨osung gewaschen und ¨uber MgSO₄ getrocknet. Das L¨osungsmittel wurde un-ter Vakuum bei 30^◦C entfernt. Das Rohprodukt wurde s¨aulenchromatographisch an Kieselgel gereinigt (Eluent: n-Hexan:EtOAc 2:1).

Ausbeute: 5,20 g (0,015mol), farbloses ¨Ol, 88 % DC(n-Hexan:EtOAc 2:1): R_f: 0,52

MS (ESI, positiv Modus): [M+Na]⁺

m/z berechnet: 359,11

m/z gemessen: 359,16

1H-NMR(400 MHz, CDCl3):δ= 7.94 (2H, d,³J = 7,9 Hz, Ar-H), 7.23 (2H, d,³J = 8,0 Hz, Ar-H), 6.43 (0,25H, d,³J = 4,3 Hz,H-1_α), 6.19 (0,75H, s,H-1_β), 5.31 (0,3H, td, ³J1 = 8,4 Hz, ³J2 = 4,4 Hz, H-4), 5.23 (0,7H, d, ³J = 4,5 Hz, H-4), 4.74-4.67 (1H, m, H-2), 4.50 (0,8H, dd, ²J = 11,9 Hz, ³J = 3,8 Hz, H-5a), 4.42 (0,2H, dd, ²J

= 12,0 Hz,³J = 3,4 Hz,H-5a), 4.32 (1H, dd,²J = 11,9 Hz,³J = 5,5 Hz, H-5b), 2.41

(3H, s, Ar-CH3), 2.17-2.03

13C-NMR (101 MHz, CDCl₃): δ = 170.2, 170.1, 169.9, 169.4, 166.5, 166.4, 144.1, 129.9, 129.8, 129.4, 129.2, 127.2, 127.0, 99.6, 94.9, 78.9, 75.9, 71.9, 66.0, 65.9, 31.7, 30.0, 21.8, 21.2, 21.0, 20.7

5.3.26 6-Chlor-2-iod-9-[(2

⁰

-O -acetyl-3

⁰

-deoxy-5

⁰

-O -(4-methy-lbenzoyl)-β-D-ribofuranosyl]purin

C₂₀H₁₈ClIN₄O₅ [556,74 g·mol⁻¹]

1,40 g (5,00 mmol) 6-Chlor-2-iodpurin wurde in 100 mL abs. Acetonitril suspen-diert. 1,40 mL (5,50 mmol) N,O-Bis(trimethylsilyl)acetamid wurde zugegeben. Die Mischung wurde bei Raumtemperatur ger¨uhrt, bis eine klare L¨osung entstand. 1,90g (5,50mmol) 1,2-Di-O-acetyl-3-deoxy-5-O-(4-methylbenzoyl)-α,β-D-ribofuranose und 1,00 mL(5,50 mmol) Trimethylsilyltriflat wurden zugegeben. Das Reaktionsgemisch wurde 15 Min bei Raumtemperatur und dann bei 80 ^◦C ( ¨Olbad wurde auf 80 ^◦C vorgeheizt) 1 Stunde ger¨uhrt. Anschließend wurde die L¨osung auf Raumtempera-tur abgek¨uhlt und 30 mL Ethylacetat zugegeben. Die organische Phase wurde mit NaHCO₃-L¨osung gewaschen und mit Na₂SO₄ getrocknet. Das L¨osungsmittel wurde unter Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde s¨aulenchromatographisch an Kiesel-gel gereinigt (Eluent: n-Hexan:EtOAc 1:1).

Ausbeute: 1,83 g (3,30 mmol), weißer Schaum, 66 % DC (n-Hexan:EtOAc 2:3): R_f: 0,41

MS (HRMS, positiv Modus): [M+Na]⁺

m/z berechnet: 578,9903

m/z gemessen: 578,9878 (4,3 ppm)

1H-NMR (400 MHz, CDCl₃): δ = 8.14 (0,53H, s, H-8), 8.12 (0,49H, s, H-8), 7.80-7.77 (2H, m, Ar-H), 7.20 (2H, d, ³J = 8,4 Hz, Ar-H), 6.07 (0,35H, d, ³J = 1,2 Hz, H-1⁰), 6.04 (0,65H, d, ³J = 1,5 Hz, H-1⁰), 5.94 (0,35H, d, ³J = 5,2 Hz, H-2⁰), 5.77 (0,65H, d, ³J = 6,2 Hz, H-2⁰), 4.81-4.75 (1H, m,H-4⁰), 4.72 (1H, dt, ²J = 12,3 Hz,

3J = 3,5 Hz, H-5a⁰), 4.51 (1H, dt,²J = 12,3 Hz, ³J = 4,6 Hz,H-5b⁰), 2.78 (1H, ddd,

2J = 14,1 Hz, ³J₁ = 10,1 Hz, ³J₂ = 6,2 Hz, H-3a⁰), 2.40 (3H, s, Ar-CH₃), 2.36 (1H, ddd, ²J = 14,0 Hz, ³J₁ = 5,8 Hz, ³J₂ = 1,6 Hz, H-3b⁰), 2.17 (3H, s, COCH₃)

13C-NMR (101 MHz, CDCl₃): δ = 170.4, 166.3, 166.2, 159.9, 151.5, 151.4, 151.0, 150,9, 144.5, 144.4, 144.2, 144.1, 132.4, 129.7, 129.6, 129.5, 129.4, 126.6, 126.5, 116.8, 116.7, 90.8, 90.6, 79.7, 79.6, 77.9, 75.9, 64.5, 64.2, 33.1, 32.9, 21.8, 21.0

5.3.27 2-Iod-3

⁰

-deoxyadenosin

C10H12IN5O3 [377,14 g·mol⁻¹]

1,67 g (3,00 mol) 6-Chlor-2-iod-9-[(2⁰-O-acetyl-3⁰-deoxy-5⁰-O -(4-methylbenzoyl))-β-D-ribofuranosyl]purin wurde noch mit 100mLges¨attigter Ammoniak/abs. Methanol-L¨osung aufgel¨ost. Die L¨osung wurde in 125^◦C 18 Stunden bei Autoklav erhitzt. Nach Abk¨uhlung wurde das L¨osungsmittel unter Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde

s¨aulenchromatographisch an Kieselgel gereinigt (Eluent: DCM:MeOH 9:1).

Ausbeute: 0,905 g (2,40 mmol), weißer Feststoff, 80 % DC (DCM:MeOH 9:1): R_f: 0,35

MS (HRMS, positiv Modus): [M-H]⁻

m/z berechnet: 375,9912

m/z gemessen: 375,9894 (4,8 ppm)

1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6):δ= 8.29 (1H, s,H-8), 7.67 (2H, s, NH2), 5.79 (1H, d, ³J = 2,2 Hz, H-1⁰), 5.65 (1H, d, ³J = 4,2 Hz, 2⁰-OH), 4.98 (1H, t, ³J = 5,9 Hz, 5⁰-OH), 4.53-5.52 (1H, m, H-2⁰), 4.37-4.31 (1H, m, H-4⁰), 3.67(1H, ddd, ²J = 12,0 Hz, ³J₁ = 5,1 Hz, ³J₂ = 3,5 Hz, H-5a⁰), 3.51 (1H, ddd,²J = 12,0 Hz, ³J₁ = 5,0 Hz,

3J2 = 4,4 Hz, H-5b⁰), 2.22 (1H, ddd, ²J = 13,3 Hz, ³J1 = 8,9 Hz, ³J2 = 5,8 Hz, H-3a⁰), 1.91 (1H, ddd, ²J = 13,0 Hz, ³J₁ = 6,2 Hz, ³J₂ = 3,0 Hz, H-3b⁰)

13C-NMR (101 MHz, DMSO-d6): δ = 155.9, 149.4, 138.8, 120.8, 118.9, 90.4, 80.9, 74.7, 62.4, 34.0

5.3.28 6-Chlor-2-iod-9-[2

⁰

-deoxy-3

⁰

,5

⁰

-di-O -(4-methylbenzoyl)-β-D-ribofuranosyl]purin

C₂₆H₂₂ClIN₄O₅ [632,83 g·mol⁻¹]

1,40g (5,00mmol) 6-Chlor-2-iodpurin wurde in 100mL abs. Acetonitril suspendiert.

Die Suspension wurde 5 Min bei Raumtemperatur ger¨uhrt. 0,710g(12,5mmol)

Kali-umhydroxid Pulver und 0,110mL(0,330mmol) Tris(2-(2-methoxyethoxy)ethyl)amin (TDA-1) wurden in der Suspension eingesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 15 Min bei Raumtemperatur ger¨uhrt. Anschließend wurden 2,33 g (6,00 mmol) 2-Deoxy-3,5-di-O-(4-methylbenzoyl)-l-α-D-ribofuranosylchlorid zugegeben. Nach 30 Min zeig-te die DC, dass das Edukt nicht mehr zu sehen war. Der Niederschlag wurde abfiltriert und der Filterkuchen mit 100mL heißem Aceton gewaschen. Die Filtrate wurden un-ter Vakuum eingeengt. Der Rohprodukt wurde s¨aulenchromatographisch an Kieselgel gereinigt (Eluent: n-Hexan:EtOAc 2:1).

Ausbeute: 2,12 g (3,35 mmol), weißer Feststoff, 63 % DC(n-Hexan:EtOAc 3:2): R_f: 0,45

MS (HRMS, positiv Modus): [M+Na]⁺

m/z berechnet: 655,0216

m/z gemessen: 655,0183 (5,0 ppm)

1H-NMR (400 MHz, Aceton-d₆): δ = 8.64 (1H, s, H-8), 8,00 (2H, d, ³J = 8,2 Hz, Ar-H), 7.85 (2H, d, ³J = 8,2 Hz, Ar-H), 7.36 (2H, d,³J = 8,1 Hz, Ar-H), 7.26 (2H, d,³J = 8,1 Hz, Ar-H), 6.70 (1H, t, ³J = 6,8 Hz, H-1⁰), 5.93 (1H, dt, ³J1 = 6,6 Hz,

3J₂ = 2,8 Hz, H-3⁰), 4.80-4.66 (3H, m, H-4⁰, H-5⁰), 3.36 (1H, dt, ²J = 14,6 Hz, ³J

= 6,9 Hz, H-2a⁰), 3.02 (1H, ddd, ²J = 14,5 Hz, ³J1 = 6,4 Hz, ³J2 = 3,0 Hz, H-2b⁰), 2.43 (3H, s, Ar-CH₃), 2.39 (3H, s, Ar-CH₃)

13C-NMR(101 MHz, Aceton-d6):δ = 166.6, 166.5, 153.4, 150.4, 146.0, 145.3, 145.0, 133.4, 130.7, 130.5, 130.3, 130.2, 128.1, 117.0, 86.5, 84.1, 76.1, 64.9, 38.0, 21.8

5.3.29 2-Iod-2

⁰

-deoxyadenosin

C₁₀H₁₂IN₅O₃ [377,14 g·mol⁻¹]

1,67 g (3,00 mol) 6-Chlor-2-iod-9-[2⁰-deoxy-3⁰,5⁰-di-O -(4-methylbenzoyl)-β-D-ribofu-ranosyl]purin wurde noch mit 100 mL ges¨attigter Ammoniak/abs. Methanol-L¨osung aufgel¨ost. Die L¨osung wurde in 125^◦C 18 Stunden bei Autoklav erhitzt. Nach Abk¨ uhl-ung wurde das L¨osungsmittel unter Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde s¨ aulen-chromatographisch an Kieselgel gereinigt (Eluent: DCM:MeOH 9:1).

Ausbeute: 0,849 g (2,25 mmol), weißer Feststoff, 75 % DC (DCM:MeOH 9:1): R_f: 0,35

MS (HRMS, positiv Modus): [M-H]⁻

m/z berechnet: 375,9912

m/z gemessen: 375,9897 (4,0 ppm)

1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆):δ= 8.23 (1H, s,H-8), 7.69 (2H, s, NH₂), 6,25 (1H, t, ³J = 6,6 Hz, H-1⁰), 5.30 (1H, d, ³J = 4,2 Hz, 3⁰-OH), 4.93 (1H, t, ³J = 5,7 Hz, 5⁰-OH), 4.39-4.37 (1H, m, H-3⁰), 3.85 (1H, q, ³J = 4,3 Hz, H-4⁰), 3.59 (1H, dt, ²J

= 11,8 Hz, ³J = 4,9 Hz, H-5a⁰), 3.53-3.48 (1H, m, H-5b⁰), 2.66-2.60 (1H, m, H-2a⁰), 2.27 (1H, ddd, ²J = 13,2 Hz, ³J₁ = 6,0 Hz, ³J₂ = 3,2 Hz, H-2b⁰)

13C-NMR (101 MHz, DMSO-d6): δ = 155.9, 149.5, 139.1, 120.8, 119.0, 87.9, 83.4, 70.8, 61.7, 48.6

5.3.30 2

⁰

-Deoxy-3

⁰

,5

⁰

-di-O -acetylguanosin

C₁₄H₁₇N₅O₆ [351,31 g·mol⁻¹]

5,70g (0,020mol) 2⁰-Deoxyguanosin Monohydrat, 0,240g (2,00 mmol) 4-(Dimethyl-amino)pyridin und 8,34mL(0,060mol) Triethylamin wurden mit 100mLabs. Aceto-nitril umgesetzt. 8,30mL (0,060mol) Essigs¨aureanhydrid wurde langsam zugetropft Die Reaktionsmischung wurde 3 Stunden bei Raumtemperatur ger¨uhrt. Anschließend wurde die Reaktion durch Zugabe von Methanol beendet. Die L¨osungsmittel wurden unter Vakuum entfernt. Der R¨uckstand wurde mit abs. Acetonitril koevaporiert und dann abfiltriert. Der Feststoff wurde noch mit Ethanol/Diethylether (1:3) gewaschen und unter Vakuum getrocknet.

Ausbeute: 7,05 g (0,020mol), weißer Feststoff, 100 % DC(DCM:MeOH, 10:1): R_f: 0,39

MS (ESI, positiv Modus): [M+H]⁺

m/z berechnet: 352,13

m/z gemessen: 352,10

1H-NMR(400 MHz, DMSO-d6):δ= 10.66 (1H, s, NH), 7.91 (1H, s,H-8), 6.49 (2H, s, NH₂), 6,13 (1H, dd, ³J₁ = 8,7 Hz, ³J₂ = 5,9 Hz, H-1⁰), 5.29 (1H, dt, ³J₁ = 6,2 Hz, ³J2 = 1,9 Hz, H-3⁰), 4.29-4.24 (1H, m, H-5a⁰), 4.21-4.16 (2H, m, H-4⁰, H-5b⁰), 2.91 (1H, ddd,²J = 14,2 Hz, ³J₁ = 8,7 Hz, ³J₂ = 6,4 Hz, H-2a⁰), 2.45 (1H, ddd, ²J

= 14,2 Hz, ³J1 = 5,9 Hz, ³J2 = 2,1 Hz, H-2b⁰), 2.08 (3H, s, COCH3), 2.03 (3H, s, COCH₃)

13C-NMR(101 MHz, DMSO-d6):δ= 170.2, 170.0, 156.7, 153.7, 151.1, 135.1, 116.8,

82.6, 81.5, 74.5, 63.6, 35.5, 20.8, 20.5

5.3.31 2-Amino-6-chlor-9-[(3

⁰

,5

⁰

-di-O -acetyl-2

⁰

-deoxy)-β-D-r-ibofuranosyl]purin

C₁₄H₁₆ClN₅O₅ [369,76 g·mol⁻¹]

7,05 g (0,020 mol) 2⁰-Deoxy-3⁰,5⁰-di-O-acetylguanosin, 5,00 g (0,030 mol) Tetrae-thylammoniumchlorid und 15,2 mL (0,120 mol) N,N-Dimethylanilin wurden in 100 mL abs. Acetonitril unter Schutzgas umgesetzt und auf 0 ^◦C abgek¨uhlt. 11,0 mL (0,120 mol) Phosphorylchlorid wurden unter dieser Temperatur langsam zugetropft.

Danach wurde die Reaktionsmischung noch 10 Min bei Raumtemperatur ger¨uhrt und anschließend unter R¨uckfluss 15 Min erhitzt ( ¨Olbad wurde auf 100 ^◦C vorgeheizt).

Nach k¨urz Abk¨uhlung wurden die fl¨uchtigen Substanzen unter Vakuum entfernt. Der R¨uckstand wurde mit Eis 15 Min ger¨uhrt, dann mehrmals mit Chloroform extra-hiert. Die organische Phase wurde anschließend mit 5 % NaHCO₃-L¨osung gewaschen und ¨uber Na2SO4 getrocknet. Das Rohprodukt wurde s¨aulenchromatographisch an Kieselgel gereinigt (Eluent: DCM:MeOH 98:2).

Ausbeute: 4,81 g (0,013 mol), weißer Schaum, 45 % DC (DCM:MeOH, 95:5): R_f: 0,45

MS (ESI, positiv Modus): [M+H]⁺

m/z berechnet: 370,09

m/z gemessen: 370,08

1H-NMR(400 MHz, CDCl3):δ= 7.91 (1H, s, H-8), 6.28 (1H, dd,³J1 = 7,7 Hz,³J2

= 6,2 Hz,H-1⁰), 5.41 (1H, dt,³J₁ = 6,2 Hz,³J₂ = 2,3 Hz,H-3⁰), 5.29 (2H, br, NH₂), 4.44 (1H, dd, ²J = 13,3 Hz, ³J = 5,9 Hz, H-5a⁰), 4.37-4.33 (2H, m, H-4⁰, H-5b⁰), 2.95 (1H, ddd,²J = 14,2 Hz, ³J₁ = 7,7 Hz, ³J₂ = 6,4 Hz, H-2a⁰), 2.55 (1H, ddd, ²J

= 14,2 Hz, ³J1 = 6,1 Hz, ³J2 = 2,6 Hz, H-2b⁰), 2.12 (3H, s, COCH3), 2.07 (3H, s, COCH₃)

13C-NMR (101 MHz, CDCl3): δ = 170.7, 170.4, 159.1, 153.2, 151.7, 140.6, 125.9, 84.8, 82.6, 74.5, 63.8, 36.9, 21.1, 20.9

5.3.32 2-Amino-6-chlor-9-(2

⁰

-deoxy-β-D-ribofuranosyl)purin

C₁₄H₁₆ClN₅O₅ [369,76 g·mol⁻¹]

150 mL 25 % w¨assriges Ammoniak wurden mit 4,81 g (0,013 mol) 2-Amino-6-chlor-9-[( 3⁰,5⁰-di-O-acetyl-2⁰-deoxy)-β-D-ribofuranosyl]purin umgesetzt. Die Reaktionsmi-schung wurde bei Raumtemperatur 15 Stunden ger¨uhrt. Danach wurde L¨osungsmittel unter Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde s¨aulenchromatographisch an Kiesel-gel gereinigt (Eluent: DCM:MeOH 10:1).

Ausbeute: 2,57 g (9,00 mmol), weißer Feststoff, 69 % DC(DCM:MeOH, 10:1): R_f: 0,33

MS (ESI, negativ Modus): [M+HCOO]⁻

m/z berechnet: 330,06

m/z gemessen: 330,08

1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6):δ= 8.34 (1H, s,H-8), 6.94 (1H, s, NH2), 6.22 (1H, dd, ³J₁ = 7,1 Hz,³J₂ = 6,4 Hz,H-1⁰), 5.28 (1H, d,³J = 4,1 Hz, 3⁰-OH), 4.93 (1H, t,

3J = 5,5 Hz, 5⁰-OH), 4.37 (1H, dd,³J1 = 6,7 Hz,³J2 = 3,4 Hz, H-3⁰), 3.85-3.82 (1H, m, H-4⁰), 3.61-3.48 (2H, m, H-5⁰,), 2.61 (1H, ddd, ²J = 13,2 Hz, ³J₁ = 7,4 Hz, ³J₂

= 5,9 Hz, H-2a⁰), 2.26 (1H, ddd, ²J = 13,2 Hz, ³J1 = 6,2 Hz,³J2 = 3,4 Hz,H-2b⁰)

13C-NMR (101 MHz, DMSO-d₆): δ = 159.7, 153.7, 149.4, 141.0, 123.5, 87.7, 83.0, 70.5, 61.5

5.3.33 2-Amino-6-chlor-9-[2

⁰

-deoxy-5

⁰

-O -(tert -butyldimethy-lsilyl)-β-D-ribofuranosyl]purin

C₁₆H₂₆ClN₅O₃Si [399,95 g·mol⁻¹]

2,57g(9,00mmol) 2-Amino-6-chlor-9-(2⁰-deoxy-β-D-ribofuranosyl)purin, 1,42g(9,45 mmol)tert-Butyldimethylsilylchlorid, 0,16g (1,35mmol) 4-(Dimethylamino)pyridin und 1,25mL(9,00mmol) Triethylamin wurden in 75mL Dimethylformamid/Dichlor-methan (2/1) aufgel¨ost und unter Schutzgas bei Raumtemperatur 20 Stunden ger¨uhrt.

Die Reaktion wurde mit Methanol beendet und das L¨osungsmittel wurde unter Vaku-um entfernt. Das Rohprodukt wurde s¨aulenchromatographisch an Kieselgel gereinigt (Eluent: DCM:MeOH 97:3).

Ausbeute: 2,98 g (7,45 mmol), weißer Schaum, 83 % DC (DCM:MeOH, 95:5): R_f: 0,39

MS (HRMS, positiv Modus): [M+H]⁺

m/z berechnet: 400,1556

m/z gemessen: 400,1550 (4,0 ppm)

1H-NMR (400 MHz, MeOD-d₄): δ = 8.25 (1H, s, H-8), 6.33 (1H, t, ³J = 6,4 Hz, H-1⁰), 4.55 (1H, dt, ³J₁ = 5,9 Hz, ³J₂ = 3,9 Hz, H-3⁰), 4.00 (1H, q, ³J = 3,5 Hz, H-4⁰), 3.89 (1H, dd, ³J₁ = 11,4 Hz, ³J₂ = 3,4 Hz, H-5a⁰), 3.82 (1H, dd, ³J₁ = 11,4 Hz,³J₂ = 3,7 Hz,H-5b⁰), 2.69 (1H, dt,²J = 13,5 Hz, ³J = 6,2 Hz,H-2a⁰), 2.45 (1H, ddd, ²J = 13,5 Hz, ³J₁ = 6,4 Hz, ³J₂ = 4,2 Hz, H-2b⁰), 0.87 (9H, s, SiC(CH₃)₃), 0.06 (3H, s, SiCH₃), 0.05(3H, s, SiCH₃)

13C-NMR (101 MHz, MeOD-d₄): δ = 161.6, 154.6, 151.5, 142.4, 125.2, 89.1, 85.6, 72.2, 64.4, 41.4, 26.4, 19.3

5.3.34 2-Amino-6-chlor-9-[2

⁰

,3

⁰

-dideoxy-5

⁰

-O -(tert -butyldime-thylsilyl)-β-D-ribofuranosyl]purin

C₁₆H₂₆ClN₅O₂Si [383,95 g·mol⁻¹]

2,80 g (7,00 mmol) 2-Amino-6-chlor-9-[2⁰-deoxy-5⁰-O-(tert -butyldimethylsilyl)-β-D-ribofuranosyl]purin und 4,27g (0,035mol) 4-(Dimethylamino)pyridin wurden in 150 mLabs. Acetonitril aufgel¨ost. Unter Schutzgas wurden 1,38mL (0,010mol) Phenyl-chlorothionocarbonat langsam zugegeben. Die Reaktionsmischung wurde bei Raum-temperatur 10 Stunden ger¨uhrt. Das L¨osungsmittel wurde unter Vakuum entfernt.

Der R¨uckstand wurde in Dichlormethan aufgenommen und mit 1M HCl (2×20mL) gewaschen. Die organische Phase wurde anschließend mit ges¨attigter NaCl-L¨osung (3

× 20mL) gewaschen und ¨uber Na2SO4 getrocknet. Das Produkt wurde dreimal mit 20 mL abs. Toluol koevaporiert und dann in 80,0 mL abs. Toluol aufgel¨ost. 0,25 g (1,50 mmol) AIBN und 2,00mL (7,50 mmol) Tributylzinnhydrid wurden in die Re-aktion umgesetzt. Die ReRe-aktionsmischung wurde 1 Stunde unter R¨uckfluss erhitzt.

Das L¨osungsmittel wurde danach unter Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde s¨aulenchromatographisch an Kieselgel gereinigt (Eluent: DCM:MeOH 97:3).

Ausbeute: 1,65 g (4,30 mmol), weißer Schaum, 61 % DC (DCM:MeOH, 95:5): R_f: 0,43

MS (HRMS, positiv Modus): [M+H]⁺

m/z berechnet: 384,1617

m/z gemessen: 384,1629 (3,1 ppm)

1H-NMR (400 MHz, CDCl₃): δ = 8.22 (1H, s, H-8), 6.17 (1H, dd, ³J₁ = 6,5 Hz,

3J₂ = 3,2 Hz,H-1⁰), 5.47 (2H, br, NH₂), 4.22 (1H, ddt, ³J₁ = 9,6 Hz, ³J₂ = 6,4 Hz,

3J₃ = 3,3 Hz, H-4⁰), 3.93 (1H, dd, ²J = 11,3 Hz,³J = 3,3 Hz, H-5a⁰), 3.73 (1H, dd,

2J = 11,3 Hz, ³J = 3,3 Hz,H-5b⁰), 2.51-2.34 (2H, m,H-2⁰), 2.17-2.00 (2H, m,H-3⁰), 0.89 (9H, s, SiC(CH3)3), 0.07 (6H, s, Si(CH3)2)

13C-NMR(101 MHz, CDCl₃):δ= 159.0, 153.1, 151.1, 140.9, 125.8, 85.3, 82.2, 64.4, 33.2, 26.1, 25.4, 18.6, -5.2, -5.3

5.3.35 6-Chlor-2-iod-9-[2

⁰

,3

⁰

-dideoxy-5

⁰

-O -(tert -butyldimeth-ylsilyl)-β-D-ribofuranosyl]purin

C₁₆H₂₄ClIN₄O₂Si [494,83 g·mol⁻¹]

1,61 g (4,20 mmol) 2-Amino-6-chlor-9-[2⁰,3⁰-dideoxy-5⁰-O-(tert -butyldimethylsilyl)-β-D-ribofuranosyl]purin wurden in 50,0 mL abs. Tetrahydrofuran aufgel¨ost. 1,07 g (4,20mmol) Iod, 3,40mL (42,0mmol) Diiodmethan, 0,92 g (4,83 mmol) Kupfer(I)-jodid und 1,70mL (12,6mmol) Isopentylnitrit wurden mit der L¨osung versetzt. Die Reaktionsmischung wurde unter R¨uckfluss 1 Stunde erhitzt. Nach Abk¨uhlung wurde der Feststoff abfiltriert. Das Filtrat wurde unter Vakuum eingeengt und der R¨ uck-stand wurde s¨aulenchromatographisch an Kieselgel gereinigt (Eluent: DCM: MeOH 99:1).

Ausbeute: 1,73 g (3,50 mmol), gelbes ¨Ol, 83 % DC(DCM:MeOH, 98:2): Rf: 0,49

MS (HRMS, negativ Modus): [M+HCOO]⁻

m/z berechnet: 539,0384

m/z gemessen: 539,0373 (2,0 ppm)

1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 8.59 (1H, s, H-8), 6.34 (1H, dd, ³J1 = 6,5 Hz,

3J₂ = 2,6 Hz, H-1⁰), 4,27 (1H, ddt, ³J₁ = 8,9 Hz, ³J₂ = 5,9 Hz, ³J₃ = 2,8 Hz,H-4⁰), 4.05 (1H, dd, ²J = 11,5 Hz, ³J = 2,8 Hz,H-5a⁰), 3.76 (1H, dd, ³J1 = 11,5 Hz, ³J2

= 2,9 Hz, H-5b⁰), 2.61-2.52 (1H, m, H-2a⁰), 2.41 (1H, ddt, ²J = 13,6 Hz, ³J₁ = 6,8 Hz, ³J2 = 3,2 Hz, H-2b⁰), 2.21-2.11 (1H, m, H-3a⁰), 2.08-2.00 (1H, m, H-3b⁰), 0.91

(9H, s, SiC(CH3)3), 0.11 (3H, s, SiCH3), 0.10 (3H, s, SiCH3)

13C-NMR(101 MHz, CDCl₃):δ= 151.7, 150.2, 144.3, 132.3, 116.3, 86.3, 82.8, 64.0, 34.0, 26.1, 24.8, 18.7, -5.2, -5.3

5.3.36 2-Iod-2

⁰

,3

⁰

-dideoxyadenosin

C₁₀H₁₂IN₅O₂ [361,14 g·mol⁻¹]

80,0 mL ges¨attigte Ammoniak/abs. Ethanol-L¨osung wurden mit 1,63g (3,30 mmol) 6-Chlor-2-iod-9-[2⁰,3⁰-dideoxy-5⁰-O-(tert-butyldimethylsilyl)-β-D-ribofuranosyl]purin versetzt und bei Raumtemperatur 24 Stunden ger¨uhrt. Danach wurde das L¨ osungs-mittel unter Vakuum entfernt. 1,33 g (2,80 mmol) Produkt wurde in 25,0 mL abs.

Tetrahydrofuran aufgel¨ost. 2,80mL(1,00mol/L) Tetrabutylammoniumfluorid/Tetr-ahydrofuran-L¨osung wurden zugegeben. Die Reaktionsmischung wurde bei Raumtem-peratur ger¨uhrt. Nach 3 Stunden war das Edukt nicht mehr zu sehen. Das L¨ osungs-mittel wurde unter Vakuum entfernt. Der R¨uckstand wurde s¨aulenchromatographisch an Kieselgel gereinigt (Eluent: DCM:MeOH 95:5).

Ausbeute: 0,832 g (2,30 mmol), weißer Stoff, 82 % DC (DCM:MeOH, 95:5): R_f: 0,31

MS (HRMS, positiv Modus): [M+H]⁺

m/z berechnet: 362,0108

m/z gemessen: 362,0106 (0,55 ppm)

1H-NMR(400 MHz, DMSO-d6):δ = 8.29 (1H, s,H-8), 7.68 (2H, s, NH2), 6.13 (1H, dd,³J₁ = 6,7 Hz, ³J₂ = 3,5 Hz,H-1⁰), 4.93 (1H, t,³J = 5,6 Hz, 5-OH), 4.09 (1H, tt,

3J1 = 7,9 Hz, ³J2 = 4,2 Hz, H-4⁰), 3.61 (1H, ddd, ²J = 11,7 Hz, ³J1 = 5,4 Hz, ³J2

= 4,1 Hz,H-5a⁰), 3.49 (1H, dt,²J = 11,8 Hz, ³J = 5,0 Hz,H-5b⁰), 2.45-2.30 (2H, m, H-2⁰), 2.07-1.98 (2H, m, H-3⁰)

13C-NMR (101 MHz, DMSO-d₆): δ = 155.9, 149.3, 138.8, 120.8, 118.9, 84.2, 81.9, 62.7, 31.8, 25.6

5.3.37 2-Ethinyl-3

⁰

-deoxyadenosin

C12H13N5O3 [275,26 g·mol⁻¹]

Die Reaktionsdurchf¨uhrung siehe im allgemeinen Verfahren f¨ur die Sonogashira-Reak-tion. Die Umsetzung erfolgte mit 0,377 g (1,00 mmol) 2-Iod-3⁰-deoxyadenosin und 38,1 mg (0,200 mmol) Kupfer(I)-jodid, 0,210 mL (1,50 mmol) Trimethylsilylacety-len, 70,2mg(0,100mmol) Dichlorbis(triphenylphosphin)palladium(II) und 0,420mL (3,00mmol) Triethylamin.

Ausbeute: 0,221g (0,803 mmol), weißer Feststoff, 80 % ¨uber 2 Schritte.

DC(DCM:MeOH 10:1): R_f: 0,33

MS (HRMS, positiv Modus): [M+H]⁺

m/z berechnet: 276,1091

m/z gemessen: 276,1091

1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6):δ= 8.44 (1H, s,H-8), 7.46 (2H, s, NH2), 5.85 (1H, d, ³J = 1,9 Hz, H-1⁰), 5.67 (1H, d, ³J = 4,2 Hz, 2⁰-OH), 5,05 (1H, t, ³J = 5,5 Hz, 5⁰-OH), 4.54-4.52 (1H, m, H-2⁰), 4.39-4.33 (1H, m, H-4⁰), 3.99 (1H, s, CCH), 3.70 (1H, ddd, ²J = 12,0 Hz, ³J₁ = 5,0 Hz, ³J₂ = 3,5 Hz, H-5a⁰), 3.53 (1H, ddd, ²J = 11,9 Hz, ³J1 = 5,4 Hz,³J2 = 4,2 Hz,H-5b⁰), 2.26 (1H, ddd,²J = 13,0 Hz, ³J1 = 8,9 Hz, ³J₂ = 5,7 Hz, H-3a⁰), 1.93 (1H, ddd,²J = 13,0 Hz, ³J₁ = 6,1 Hz, ³J₂ = 2,8 Hz, H-3b⁰)

13C-NMR (101 MHz, DMSO-d₆): δ = 155.8, 148.8, 144.6, 139.9, 118.9, 90.6, 83.4, 80.8, 74.9, 74.7, 62.4, 33.8

5.3.38 2-Ethinyl-2

⁰

-deoxyadenosin

C12H13N5O3 [275,26 g·mol⁻¹]

Die Reaktionsdurchf¨uhrung siehe im allgemeinen Verfahren f¨ur die Sonogashira-Reak-tion. Die Umsetzung erfolgte mit 0,377 g (1,00 mmol) 2-Iod-2⁰-deoxyadenosin und 38,1 mg (0,200 mmol) Kupfer(I)-jodid, 0,210 mL (1,50 mmol) Trimethylsilylacety-len, 70,2mg(0,100mmol) Dichlorbis(triphenylphosphin)palladium(II) und 0,420mL (3,00 mmol) Triethylamin.

Ausbeute: 0,224 g (0,814 mmol), weißer Feststoff, 81 % ¨uber 2 Schritte.

DC (DCM:MeOH 10:1): R_f: 0,33

MS (HRMS, positiv Modus): [M+H]⁺

m/z berechnet: 276,1091

m/z gemessen: 276,1097 (2,2 ppm)

1H-NMR(400 MHz, DMSO-d₆):δ = 8.41 (1H, s,H-8), 7.48 (2H, s, NH₂), 6,31 (1H, t, ³J = 6,5 Hz, H-1⁰), 5.30 (1H, d, ³J = 4,1 Hz, 3⁰-OH), 5.04 (1H, t, ³J = 5,6 Hz, 5⁰-OH), 4.41-4.38 (1H, m,H-3⁰), 4.00 (1H, s, CCH), 3.87 (1H, q,³J = 4,0 Hz,H-4⁰), 3.61 (1H, dt, ²J = 11,7 Hz,³J = 4,8 Hz, H-5a⁰), 3.54-3.49 (1H, m,H-5b⁰), 2.70-2.63 (1H, m,H-2a⁰), 2.27 (1H, ddd, ²J = 13,1 Hz, ³J₁ = 6,0 Hz,³J₂ = 3,1 Hz,H-2b⁰)

13C-NMR (101 MHz, DMSO-d₆): δ = 155.8, 148.9, 144.6, 140.4, 119.0, 87.9, 83.6, 83.3, 75.0, 74.8, 70.8, 61.7

5.3.39 2-Ethinyl-2

⁰

, 3

⁰

-dideoxyadenosin

C₁₂H₁₃N₅O₂ [259,26 g·mol⁻¹]

Die Reaktionsdurchf¨uhrung siehe im allgemeinen Verfahren f¨ur die Sonogashira-Rea-ktion. Die Umsetzung erfolgte mit 0,361g(1,00mmol) 2-Iod-2⁰,3⁰-deoxyadenosin und 38,1mg(0,200mmol) Kupfer(I)-jodid, 0,210mL(1,50mmol) Trimethylsilylacetylen, 70,2 mg (0,100 mmol) Dichlorbis(triphenylphosphin)palladium (II) und 0,420 mL (3,00mmol) Triethylamin.

Ausbeute: 0,212g (0,818 mmol), weißer Stoff, 82 % ¨uber 2 Schritte.

DC(DCM:MeOH, 95:5): R_f: 0,33

MS (HRMS, positiv Modus): [M+H]⁺

m/z berechnet: 260,1142

m/z gemessen: 260,1145 (1,2 ppm)

1H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆):δ= 8.43 (1H, s,H-8), 7.46 (2H, s, NH₂), 6.19 (1H, dd, ³J₁ = 6,7 Hz, ³J₂ = 3,7 Hz, H-1⁰), 4.99 (1H, t, ³J = 4,9 Hz, 5-OH), 4.14-4.08 (1H, m, H-4⁰), 3.99 (1H, s, CCH), 3.63 (1H, dt,²J = 11,7 Hz, ³J = 3,9 Hz,H-5a⁰), 3.50 (1H, dt, ²J = 11,7 Hz, ³J = 4,4 Hz, H-5b⁰), 2.46-2.32 (2H, m, H-2⁰), 2.08-1.98 (2H, m, H-3⁰)

13C-NMR (101 MHz, DMSO-d₆): δ = 155.8, 148.7, 144.6, 139.9, 118.9, 84.3, 83.4, 81.9, 74.8, 62.7, 31.9, 25.5

5.3.40 2-Ethinyl-3

⁰

-deoxyadenosin-5

⁰

-monophosphat

C₂₄H₄₄N₇O₆P [557,62 g·mol⁻¹]

Die Reaktionsdurchf¨uhrung siehe im allgemeinen Verfahren f¨ur die Monophosphory-lierung. Die Umsetzung erfolgte mit 55,0mg (0,200 mmol) 2-Ethinyl-3⁰ -deoxyadeno-sin und 64,0mg(0,300mmol) 1,8-Bis(dimethylamino)naphthalin und 24,0µL(0,260 mmol) Phosphorylchlorid.

Ausbeute: 52,4 mg (0,094 mmol), brauner Feststoff, 47 % (UV Bestimmung) MS (HRMS, negativ Modus): [M-2HNEt₃+H]⁻

m/z berechnet: 354,0609

m/z gemessen: 354,0596 (3,7 ppm)

1H-NMR(400 MHz, D2O):δ = 8.42 (1H, s, H-8), 5.96 (1H, s,H-1⁰), 4.74-4.71 (2H, m, H-2⁰, H-4⁰), 4.23 (1H, ddd, ²J = 12,2 Hz, ³J₁ = 4,3 Hz, ³J₂ = 2,4 Hz, H-5a⁰), 4.03 (1H, dt,²J = 11,4 Hz,³J = 4,6 Hz, H-5b⁰), 3.51 (1H, s, CCH), 3.18 (4H, q, ³J

= 7,3 Hz, (NCH₂CH₃)₃), 2.36 (1H, ddd, ²J = 14,3 Hz,³J₁ = 9,6 Hz,³J₂ = 5,4 Hz, H-3a⁰), 2.20 (1H, ddd, ²J = 13,9 Hz,³J1 = 5,8 Hz, ³J2 = 2,4 Hz, H-3b⁰), 1.26 (9H, t,³J = 7,3 Hz, (NCH₂CH₃)₃)

13C-NMR (101 MHz, D2O): δ = 154.6, 147.7, 144.3, 140.4, 90.7, 80.9, 80.8, 80.1, 75.7, 64.9, 46.5, 32.8, 8.2

31P-NMR (162 MHz, D2O): δ = 1.13 (s)

5.3.41 2-Ethinyl-2

⁰

-deoxyadenosin-5

⁰

-monophosphat

C₂₄H₄₄N₇O₆P [557,62 g·mol⁻¹]

Die Reaktionsdurchf¨uhrung siehe im allgemeinen Verfahren f¨ur die Monophosphory-lierung. Die Umsetzung erfolgte mit 55,0mg (0,200mmol) 2-Ethinyl-2⁰ -deoxyadeno-sin und 64,0mg (0,300mmol) 1,8-Bis(dimethylamino)naphthalin und 24,0µL(0,260 mmol) Phosphorylchlorid.

Ausbeute: 48,6 mg (0,094 mmol), brauner Feststoff, 44 % (UV Bestimmung) MS (HRMS, negativ Modus): [M-2HNEt₃+H]⁻

m/z berechnet: 354,0609

m/z gemessen: 354,0597 (3,4 ppm)

1H-NMR (400 MHz, D2O): δ = 8.42 (1H, s, H-8), 6.31 (1H, t, ³J = 6,6 Hz, H-1⁰), 4.70 (1H, dt, ³J₁ = 6,2 Hz, ³J₂ = 3,4 Hz, H-3⁰), 4.27-4.24 (1H, m, H-4⁰), 4.06-3.98 (2H, m,H-5⁰), 3.51 (1H, s, CCH), 3.18 (6H, q,³J = 7,3 Hz, (NCH2CH3)3), 2.75 (1H, dt, ²J = 13,8 Hz, ³J = 6,7 Hz, H-2a⁰), 2.63 (1H, ddd, ²J = 13,8 Hz, ³J₁ = 6,0 Hz,

3J2 = 3,8 Hz,H-2b⁰), 1.24 (11H, t,³J = 7,3 Hz, (NCH2CH3)3)

13C-NMR (101 MHz, D₂O): δ = 154.7, 148.1, 144.5, 140.5, 118.0, 86.0, 83.6, 80.6, 76.2, 71.3, 64.4, 46.6, 39.5, 8.2

31P-NMR (162 MHz, D₂O): δ = 1.31 (s)

5.3.42 2-Ethinyl-2

⁰

,3

⁰

-dideoxyadenosin-5

⁰

-monophosphat

C₂₄H₄₄N₇O₅P [541,62 g·mol⁻¹]

Die Reaktionsdurchf¨uhrung siehe im allgemeinen Verfahren f¨ur die Monophosphory-lierung. Die Umsetzung erfolgte mit 52,0mg (0,200mmol) 2-Ethinyl-2⁰,3⁰ -dideoxyad-enosin und 64,0 mg (0,300 mmol) 1,8-Bis(dimethylamino)naphthalin und 36,7 µL (0,400 mmol) Phosphorylchlorid.

Ausbeute: 66,1 mg (0,122 mmol), brauner Feststoff, 61 % (UV Bestimmung) MS (HRMS, negativ Modus): [M-2HNEt3+H]⁻

m/z berechnet: 338,0660

m/z gemessen: 338,0660

1H-NMR (400 MHz, D2O): δ = 8.39 (1H, s, H-8), 6.14 (1H, dd, ³J1 = 6,5 Hz, ³J2

= 2,6 Hz,H-1⁰), 4.46-4.40 (1H, m,H-4⁰), 4.08 (1H, ddd,²J = 11,4 Hz,³J1 = 5,2 Hz,

3J₂ = 3,1 Hz, H-5a⁰), 3.93 (1H, dt, ²J = 11,5 Hz,³J = 5,3 Hz, H-5b⁰), 3.49 (1H, s, CCH), 3.13 (9H, q,³J = 7,3 Hz, (NCH2CH3)3), 2.65-2.55 (1H, m, H-2a⁰), 2.43-2.38 (1H, m, H-2b⁰), 2.26-2.19 (1H, m, H-3a⁰), 2.13-2.05 (1H, m,H-3b⁰) 1.22 (15H, t, ³J

= 7,2 Hz, (NCH2CH3)3)

13C-NMR (101 MHz, D₂O): δ = 154.6, 147.6, 144.3, 140.5, 118.1, 84.9, 81.3, 80.6, 76.1, 65.8, 46.5, 32.1, 25.2, 8.2

31P-NMR (162 MHz, D₂O): δ = 1.51 (s)

5.3.43 2

-Ethinyl-3

⁰⁰

-deoxy-NAD

⁺

C₂₉H₄₂N₈O₁₃P₂ [772,64 g·mol⁻¹]

Die Reaktionsdurchf¨uhrung siehe im allgemeinen Verfahren f¨ur die Synthese von NAD⁺ Analoga. Die Umsetzung erfolgte mit 10,0mg (0,030mmol) β-Nicotinamidri-bosemonophosphat, 16,2 mg (0,100 mmol) 1,1⁰-Carbonyldiimidazol und 4,45 µL (0,032 mmol) Triethylamin und 11,2 mg (0,020 mmol) 2-Ethinyl-3⁰ -deoxyadenosin-5⁰-monophosphat.

Ausbeute: 3,52 mg (4,53 µmol), brauner Feststoff, 23 % (UV Bestimmung) MS (HRMS, positiv Modus): [M-HNEt₃+2H]⁺

m/z berechnet: 672,1215

m/z gemessen: 672,1215

1H-NMR(400 MHz, D2O):δ= 9.36 (1H, s, HN-2), 9.16 (1H, d,³J = 6,0 Hz,HN-6), 8.91 (1H, d,³J = 7,9 Hz,H_N-4), 8.40 (1H, s,H_A-8), 8.26 (1H, t,³J = 6,8 Hz,H_N-5), 6.06 (1H, d, ³J = 5,4 Hz, H-1⁰⁰), 5.94 (1H, br, H-1⁰), 4.52-4.44 (3H, m, H-4⁰, H-2⁰⁰, H-4⁰⁰), 4.36-4.10 (6H, m, H-2⁰, H-3⁰, H-5⁰, H-5⁰⁰), 3.55 (1H, s, CCH), 3.22 (15H, q,

3J = 7,3 Hz, (NCH2CH3)3), 2.46 (1H, ddd, ²J = 14,4 Hz, ³J1 = 9,2 Hz, ³J2 = 6,0 Hz, H-3a⁰⁰), 2.28-2.23 (1H, m,H-3b⁰⁰), 1.30 (24H, t, ³J = 7,3 Hz, (NCH₂CH₃)₃)

31P-NMR (162 MHz, D2O): δ = -11.21 (1P, d, ³J = 20,4 Hz), -11.67 (1P, d, ³J = 20,4 Hz)

5.3.44 2

-Ethinyl-2

⁰⁰

-deoxy-NAD

⁺

C29H42N8O13P2 [772,64 g·mol⁻¹]

Die Reaktionsdurchf¨uhrung siehe im allgemeinen Verfahren f¨ur die Synthese von NAD⁺-Analoga. Die Umsetzung erfolgte mit 10,0mg (0,030mmol) β-Nicotinamidri-bosemonophosphat, 16,2 mg (0,100 mmol) 1,1⁰-Carbonyldiimidazol und 4,45 µL (0,032 mmol) Triethylamin und 11,2 mg (0,020 mmol) 2-Ethinyl-2⁰ -deoxyadenosin-5⁰-monophosphat.

Ausbeute: 3,88 mg (5,02 µmol), brauner Feststoff, 25 % (UV Bestimmung) MS (HRMS, positiv Modus): [M-HNEt₃+2H]⁺

m/z berechnet: 672,1215

m/z gemessen: 672,1217 (0,30 ppm)

1H-NMR(400 MHz, D2O):δ= 9.32 (1H, s, HN-2), 9.06 (1H, d,³J = 6,0 Hz, HN-6), 8.89 (1H, d,³J = 7,9 Hz,H_N-4), 8.43 (1H, s,H_A-8), 8.22 (1H, t,³J = 7,1 Hz,H_N-5), 6.28 (1H, t, ³J = 6,7 Hz, H-1⁰⁰), 6.02 (1H, d, ³J = 5,2 Hz, H-1⁰), 4.50-4.49 (1H, m, H-4⁰), 4.47-4.41 (2H, m,H-2⁰,H-3⁰⁰), 4.31-4.30 (1H, mH-3⁰), 4.27-4.12 (5H, m,H-4⁰⁰, H-5⁰, H-5⁰⁰), 3.53 (1H, s, CCH), 3.21 (6H, q, ³J = 7,2 Hz, (NCH2CH3)3), 2.85 (1H, dt, ²J = 13,8 Hz,³J = 6,8 Hz, H-2a⁰⁰), 2.64 (1H, ddd, ²J = 13,8 Hz, ³J₁ = 6,1 Hz,

3J2 = 3,3 Hz, H-2b⁰⁰), 1.29 (9H, t,³J = 7,2 Hz, (NCH2CH3)3)

31P-NMR (162 MHz, D₂O): δ = -11.34 (1P, d, ³J = 21,2 Hz), -11.68 (1P, d, ³J = 21,2 Hz)

5.3.45 2

-Ethinyl-2

⁰⁰

,3

⁰⁰

-dideoxy-NAD

⁺

C₂₉H₄₂N₈O₁₂P₂ [756,64 g·mol⁻¹]

Die Reaktionsdurchf¨uhrung siehe im allgemeinen Verfahren f¨ur die Synthese von NAD⁺-Analoga. Die Umsetzung erfolgte mit 10,0mg(0,030mmol) β-Nicotinamidri-bosemonophosphat, 16,2 mg (0,100 mmol) 1,1⁰-Carbonyldiimidazol und 4,45 µL (0,032mmol) Triethylamin und 10,8mg(0,020mmol) 2-Ethinyl-2⁰,3⁰ -deoxyadenosin-5⁰-monophosphat.

Ausbeute: 3,82 mg (5,05 µmol), brauner Feststoff, 25 % (UV Bestimmung) MS (HRMS, positiv Modus): [M-HNEt₃+2H]⁺

m/z berechnet: 656,1266

m/z gemessen: 656,1263 (0,46 ppm)

1H-NMR(400 MHz, D2O):δ= 9.34 (1H, s, HN-2), 9.12 (1H, d,³J = 6,0 Hz,HN-6),

6,70 mL (0,050 mol) Triethylenglycol wurden in 150 mL abs. Dichlormethan auf-gel¨ost. Unter N₂ wurde die L¨osung auf 0 ^◦C abgek¨uhlt. Unter dieser Temperatur wurden 28,6 g (0,150 mol) Tosylchlorid, 20,9 mL (0,150 mol) Triethylamin und 0,300 g (2,50 mmol) 4-(Dimethylamino)pyridin langsam zugegeben. Danach wur-de die L¨osung langsam auf Raumtemperatur aufgew¨armt und anschließend weitere 18 Stunden ger¨uhrt. Die Reaktionsmischung wurde dreimal mit destilliertem Was-ser gewaschen und die organische Phase ¨uber MgSO4 getrocknet. Das L¨osungsmittel wurde unter Vakuum entfernt. Der R¨uckstand wurde dann in 100 mL abs. Dime-thylformamid aufgel¨ost. 6,50 g (0,100 mol) Natriumazid und 0,920 g (2,50 mmol) Tetrabutylammoniumiodid wurden dann zugegeben. Die Reaktionsmischung wur-de bei 80 ^◦C 18 Stunden ger¨uhrt. Nach Abk¨uhlung wurde die Reaktionsmischung dreimal mit Ethylacetat extrahiert. Die organische Phase wurde noch dreimal mit NaHCO3-L¨osung gewaschen und ¨uber MgSO4 getrocknet. Das L¨osungsmittel wurde

unter Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde s¨aulenchromatographisch an Kiesel-gel gereinigt (Euent: n-Hexsan:EtOAc 3:1).

Ausbeute: 7,87 g (0,039mol), farbloses ¨Ol, 79 % DC(n-Hexan:EtOAc 2:1): R_f: 0,49

MS (ESI, positiv Modus): [M+Na]⁺

m/z berechnet: 223,09

m/z gemessen: 222,98

1H-NMR(400 MHz, CDCl₃):δ = 3.70-3.67 (m, 8H, CH₂OCH₂CH₂OCH₂), 3.39 (t, 4H,³J = 5,2 Hz, N₃CH₂)

13C-NMR(101 MHz, CDCl₃):δ = 70.9, 70.3, 50.8

Im Dokument Synthesen von NAD<sup>+</sup>-Analoga und ihre Anwendungen (Seite 128-160)