DMEM-Kulturmedium 500 ml DMEM 2mM L-Glutamin
5 ml Penicillin/Streptomycin 10% FCS
RPMI-Kulturmedium 397 ml RPMI 1640 2mM L-Glutamin
5 ml Penicillin/Streptomycin 1,5g Natrium Bicarbonat 4,5g Glukose
10 mM HEPES 1 mM Na-Pyruvat
500 µl ß-Mercaptoethanol 10% FCS
PBS-1 fach 100 ml 10 x PBS
900 ml Aqua dest.
0,01% DNase-Lösung DMEM mit 0,01% DNase I
Anhang
54 7.2 Geräte und Herstellernachweis
Arbeitsbank HERAsafe Heraeus Kendro, D-Hanau
Autoklav H&P Labortechnik AG,
D-Oberschleissheim;
Zirbus technology, D-Osterode
Brutschränke Kendro Laboratory Products GmbH,
D-Langenselbold
Drehtisch für Petrischalen WLD-Tec GmbH, D-Göttingen
Drigalski-Spatel Roth, D-Karlsruhe
ELISA Quantikine kit
TNF-a, IL-6, MIP-2, CCL-2, KC
R&D Systems, D-Wiesbaden
ELISA-TGF-β1 R&D Systems, D-Wiesbaden
Exsikator Omnilab, D-Garbsen
Fireboy Integra Bioscience AG, CH-Chur
Gefrierschrank, -20 °C Liebherr, CH-Bulle
Gefrierschrank, -80 °C Kendro Laboratory Products GmbH, D-Hanau
Gefrierschrank, -80 °C Sanyo, D-München
Glaswaren Schott Duran, Brand D-Wertheim
Käfigstation Biozone, UK-Margate
Kanüle 24 gauge BD Bioscience, D-Heidelberg
Kühlschrank Liebherr, CH-Bulle
Magnetrührer IKA-Werke GmbH & Co.KG,
D-Staufen
Mikroskop Leica, D-Solms
Mikroskop Zeiss, D-Göttingen
Multipette Eppendorf, D-Hamburg
Neubauer Zählkammer (0,0025 mm² Tiefe)
Brand, D-Wertheim
Anhang
55
pH-Meter WTW GmbH, D-Weilheim
Photometer Molecular Devices,
D-Ismaning/München
Pipetboy Integra Bioscience AG, CH-Chur
Pipetten Eppendorf Research, D-Hamburg
Pipettenspitzen Eppendorf Research, D-Hamburg
Präzisionswage Denver Instruments USA-Denver
Röhrchen-Taumelroller Bibby Sterilin, UK-Staffordshire Rollinkubatorsystem Integra Bioscience AG, CH-Chur Rüttelgerät (Vortex) Reax top, Heidolph Instruments GmbH & Co.KG,
D-Schwabach
Rüttelplattform Duomax 1030 Heidolph D-Schwabach Serelogische Pipette,steril
2 ml, 5 ml, 10 ml, 25 ml, and 50 ml
Sarstedt, D-Nümbrecht
SofmaxPro Molecular Devieces, USA-Sunnyval
Software SoftMax Pro Molecular Devieces, USA-Sunnyvale
Sterilbank Kendro Laboratory Products GmbH,
D-Hanau
Tiefkühltruhe Kendro Laboratory Products GmbH,
D-Hanau
Tischzentrifuge Kendro Laboratory Products GmbH, D-Hanau
Waage Kern und Sohn GmbH,
D-Balingen-Frommern
Wasserbad Julabo, D-Seelbach
Zentrifugen Multifuge 3 SR Heraeus Kendro, D-Hanau Zentrifugen Biofuge fresco Heraeus Kendro, D-Hanau Zytozentrifuge Cytospin 4 Thermo Scientific USA-Waltham
Anhang
56 7.3 Verbrauchsmaterialien
15 und 50 ml-Tubes Falcon, D-Heidelberg
24-Well-Platten TPP, CH-Trasadingen, Falcon, D-Heidelberg
24-Well-Transwell-Platten BD Bioscience, D-Heidelberg 2-Mercaptoethanol Invitrogen, D-Darmstadt
Accutase PAA Laboratories GmbH, A-Pasching
Agarose PAA Laboratories GmbH, A-Pasching
Agarplatten 5% Schafsblut BD Biosciences, D-Heidelberg Ammoniumchlorid Merck Merck, D-Darmstadt
Azur Eosin-Methylenblau Lösung Merck, D-Darmstadt
BSA Sigma, D-München
BSA Sigma, D-Taufkirchen
Butterfly 21g Sarstedt, D-Nümbrecht
CD 45 Antikörper Becton Dickinson, D-Heidelberg CD16/32 Antikörper Becton Dickinson, D-Heidelberg
Nylonnetz 100µm Falcon, D-Heidelberg
Destilliertes Wasser Delta Select, D-Dreieich
D-Glucose Applichem, D-Darmstadt
DMEM Invitrogen, D-Darmstadt
DMSO Roth, D-Karlsruhe
Dnase I DNase I, Serva D-Heidelberg
Dispase Collaborative Research, USA-Bedford
Dulbecco's PBS 10x PAA, A-Pachingen
EDTA Biochrom, D-Berlin
Anhang
57
Einmalpipetten Sarstedt, D-Nürnberg
Ethanol Roth, D-Karlsruhe
FCS Gold PAA Laboratories GmbH, A-Pasching
Fibronectin Invitrogen, D-Darmstadt
Filterzuschnitte
für Cytozentrifugenpräparate
Schleicher & Schuell, D-Dassel
Flexible Mikrotiterplatte Falcon, D-Heidelberg Giemsa Merck, D-Darmstadt Merck, D-Darmstadt
Giesma’s Lösung Merck, D-Darmstadt
Glukose Invitrogen, D-Darmstadt
Haematoxylin Invitrogen, D-Darmstadt
HBSS (mit und ohne Phenolrot) PAA Laboratories GmbH, A-Pasching
HEPES, 1M Invitrogen, D-Darmstadt
Insulinspritze B. Braun GmbH, D-Melsungen
Isoflurane Baxter, D-Unterschleissheim
Kollagenase A Roche, CH-Risch
Kyrorhörchen Brand, D-Wertheim
Leukosilk BSN medical GmbH + Co. KG,
D-Hamburg
L-Glutamin Invitrogen, D-Darmstadt
May-Grünwald Lösung Merck, D-Darmstadt, Germany
Müllbeutel Brand, D-Wertheim
Na-Azid Sigma, D-München
Natrium-Bicarbonat PAA, A-Pachingen
Natrium-Pyruvat PAA, A-Pachingen
Anhang
58
Cell-Strainer 40 µm BD Biosciences, D-Heidelberg
Objektträger Thermo Scientific, USA-Waltham
Omnifix Spritze Braun, D-Melsungen
PBS 10-fach PAA-Laboratories GmbH,
A-Pasching
PBS/EDTA 46,3ml 1xPBS
3,7 ml EDTA
pH 7,2 mit NaOH einstellen Penicillin/Streptomycin Invitrogen, D-Darmstadt
Perfusorspritze B. Braun GmbH, D-Melsungen
Pipettenspitzen Eppendorf, D-Hamburg
Presskorkuntersetzer Roth, D-Karlsruhe
Propidiumjodid BD Pharmingen, USA-San Jose
Reaktionsgefäße, 1,5 und 2 ml Safe-Lock, Eppendorf, D-Hamburg RPMI 1640 mit Phenolrot ohne
L-Glutamin
PAA Laboratories GmbH, A-Pasching
Rundbodenröhrchen, 5 ml Polystyrol, Falcon, D-Heidelberg
Saponin Roth, D-Karlsruhe
Serologische Pipetten, 5-50 ml Sarstedt, D-Nümbrecht S-Monovette (Li-Heparin) Sarstedt, D-Nümbrecht
Spritzen Omnifix®-F 1 ml Luer, B.Braun AG,
D-Melsungen
Streptavidin APC Promega, USA-Madison
Todd-Hewitt-Broth (THB) Oxoid, UK-Basingstoke Trypan Blue, 0,5% (w/v) in 0,9% saline Biochrom, D-Berlin
Tween 20 Sigma, D-Taufkirchen
Anhang
59
Venenverweilkanülen BD MicrolaneTM 3, 24Gx1’’-Nr.17, 0,55mmx25mm,BD Bioscience, D-Heidelberg
Zählkammer Neubauer Improved, Karl Hecht Assistent GmbH, D-Sondheim
Zellkulturflasche T 25, T 75 Greiner Bio, D-Solingen-Wald
Anhang
61 7.5 Eidesstattliche Erklärung
Erklärung nach § 2 Abs. 2 Nr. 6 und 7 nach PromO
Ich erkläre, dass ich die der Medizinischen Hochschule Hannover zur Promotion eingereichte Dissertation mit dem Titel: Einfluss alveolarepithelialer TGF-β Sekretion auf die Abwehrfunktion von Alveolarmakrophagen gegenüber Streptococcus pneumoniae in der Abteilung für Experimentelle Pneumologie der Medizinischen Hochschule Hannover unter Betreuung von Univ.-Prof. Ulrich A. Maus mit der Unterstützung durch das Strucmed-Programm ohne sonstige Hilfe durchgeführt und bei der Abfassung der Dissertation keine anderen als die dort aufgeführten Hilfsmittel benutzt habe.
Die Gelegenheit zum vorliegenden Promotionsverfahren ist mir nicht kommerziell vermittelt worden. Insbesondere habe ich keine Organisation eingeschaltet, die gegen Entgelt Betreuerinnen und Betreuer für die Anfertigung von Dissertationen sucht oder die mir obliegenden Pflichten hinsichtlich der Prüfungsleistungen für mich ganz oder teilweise erledigt.
Ich habe diese Dissertation bisher an keiner in- oder ausländischen Hochschule zur Promotion eingereicht. Weiterhin versichere ich, dass ich den beantragten Titel bisher noch nicht erworben habe.
Ergebnisse der Dissertation wurden als Tagungsbeitrag vorgestellt:
Öffentliches Abschluss-Symposium des StrucMed Programms 2012, 09.03.2012, Medizinische Hochschule Hannover.
Köln, den 10.07.2015
Danksagung
62 7.6 Danksagung
Mein besonderer Dank gilt meinem Doktorvater Prof. Dr. Ulrich A. Maus für die Überlassung des interessanten Themas und die hervorragende Betreuung und unbegrenzte Unterstützung. Mit seiner konstruktiven Kritik und vielen wertvollen Ratschlägen hat er maßgeblich zum Gelingen dieser Arbeit beigetragen.
Bei Herrn Prof. Dr. Dr. Thomas Thun möchte ich mich für die Kobetreuung und die konstruktiven Diskussionen meiner Arbeit bedanken.
Ich bedanke mich bei allen Mitarbeitern der Abteilung für Experimentelle Pneumologie für die Unterstützung in allen Phasen meiner Arbeit sowie für die großartige Arbeitsatmosphäre. Mein besonderer Dank gilt Regina Maus und Jennifer Bohling für die ausgezeichnete experimentelle Einarbeitung und die stets zuverlässige große Unterstützung in Rat und Tat. Bei Svenja Kosin möchte ich mich für die gute Zusammenarbeit im Labor bedanken. Bei Dr.
Kathrin Steinwede bedanke ich mich für ihre hilfreiche und geduldige Art sowie ihre ausgezeichnete Unterstützung.
Ein ganz besonderer Dank gilt meiner Mutter und meinem Freund Alexander, die mir stets zur Seite standen und mir viel Kraft geschenkt haben.