Begleitprojekt zur Bestimmung von MGMT

In einer Begleitstudie (Hegi M et al., 2005) zu der publizierten EORTC-Studie zur Ersttherapie des Glioblastoms (Stupp R et al., 2005) konnte die Methylierung des MGMT (O6-Methylguanine-DNA Methyltransferase)-Promotors (die die Ablesung des durch MGMT kodierten Reparaturenzyms verhindert) als unabhängiger prognostisch günstiger Faktor gesichert werden. Patienten mit methyliertem Promotor, die mit der Kombinationstherapie behandelt wurden, überlebten im Median 21,7 Monate im Vergleich zu 15,3 Monaten bei Patienten, die nur mit Strahlentherapie behandelt wurden. Ohne MGMT-Methylierung war der Unterschied zwischen den Behandlungsgruppen nicht mehr signifikant.

Deshalb soll in der Phase B der Studie im Rahmen eines „translational-research“ Projekts die Aktivität von MGMT bei den eingeschlossenen Patienten bestimmt werden. Die Bestimmung wird nicht zur Stratifizierung der Patienten im Studienprotokoll benutzt, soll aber in die Studienauswertung einfließen, um zu sichern, dass MGMT auch bei der von uns vorgeschlagenen Kombinationstherapie einen unabhängigen prognostischen Faktor darstellt. Die hierzu benutzte Methode verwendet Paraffinmaterial aus den zur Diagnosesicherung anfallenden Paraffinblöcken.

Nach Isolierung von DNA aus Paraffin wird die DNA mittels einer methylierungsspezifischen PCR-Methode (two-step nested PCR) amplifiziert, die eine Differenzierung zwichen dem methylierten und unmethylierten MGMT-Promotor erlaubt (Hegi M et al., 2005). Die Bestimmung des Methylierungsstatus erfolgt in Kooperation mit der Autorin der Originalpublikation:

Dr. Monika Hegi, PhD

Laboratory of Tumor Biology and Genetics, Department of Neurosurgery University Hospital (CHUV)

BH19-110 1011 Lausanne, Schweiz

Durch die Begleitstudie werden die Patienten keiner zusätzlichen Belastung ausgesetzt, da lediglich ohnehin gewonnenes Material verwendet wird. Die Patienten werden in der ergänzten Patientenaufklärung (Version 2.0, Amendment 1 vom 15.06.05) über die Begleitstudie aufgeklärt.

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18. Literaturverzeichnis

Black P M. Brain tumors. N Eng J Med 324:1471-1476, 1991.

Brada M, Hoang-Xuan K, Rampling R, et al. Multicenter phase II trial of temozolomide in patients with glioblastoma multiforme at first relapse. Ann Oncol 12(2):259-66, 2001.

Brindley CJ, Antoniw P, Newlands ES. Plasma and tissue disposition of mitozomide in mice. Br. J.

Cancer 53: 91-97, 1986.

Brock C, Newlands ES, Stevens MFG, Wedge SR, Wheelhouse RT. Temozolomid: a review of its discovery, chemical properties, pre-clinical development and clinical trials. Cancer Treatment Reviews 23: 35-61, 1997.

Brock CS, Newlands, ES, Wedge, SR, et al. Phase I trial of Temozolomid using an extended continouse oral schedule. Cancer Res 58: 4363-4367, 1998.

Cobbs CS, et al., Expression of nitric oxide synthase in human central nervous system tumors.

Cancer Res 15;55(4):727-30, 1995.

Davis FG, Freels S, Grutsch J, Barlas S, Brem S. Survival rates in patients with primary malignant brain tumors stratified by patient age and tumor histological type: an analysis based on Surveillance, Epidemiology, and End Results (SEER) data, 1973-1991. J Neurosurg 88(1):1-10, 1998.

Denny BJ, Wheelhouse RT, Stevens MFG, Tsang LLH, Slack JA. NMR and molecular modelling investigation of the mechanism of activation of the antitumor drug metabolites of Temozolomid and its interaction with DNA. Biochemistry 33: 9045-9051, 1994.

Fabel K, Dietrich J, Hau P, et al. Long-term stabilization in patients with malignant glioma after treatment with liposomal doxorubicin. Cancer 92(7):1936-42, 2001.

Friedman HS, Dolan ME, Pegg AE, et al. Activity of Temozolomid in the treatment of central nervous system tumor xenografts. Cancer Research 55: 2853-2857, 1995.

Gabizon A, Chemla M, Tzemach D, Horowitz AT, Goren D. Liposome longevity and stability in circulation: effects on the in vivo delivery to tumors and therapeutic efficacy of encapsulated anthracyclines. J Drug Target 3(5):391-8, 1996.

Gabizon A, et al., Polyethylene glycol-coated (pegylated) liposomal doxorubicin. Rationale for use in solid tumours. Drugs 54 Suppl 4:15-21, 1997a. Review.

Gabizon, A., Goren, D., Horowitz, A.T. et al. Long-circulating liposomes for drug delivery in cancer therapy: a rewiev of biodistribution studies in tumor bearinag animals. Adv. Drug Deliv 24:337-344.

1997b. Review.

Goren D, Horowitz AT, Zalipsky S. et al. Targeting of stealth liposomes to erbB-2 (HER/2) receptor:

in vitro and in vivo studies. Br. J. Cancer 74: 1749-1756, 1996.

Hau Version 4.0 vom 15.06.05 Page 48 of 67

Hau P, Fabel K, Baumgart U, Rummele P, Grauer O, Bock A, Dietmaier C, Dietmaier W, Dietrich J, Dudel C, Hubner F, Jauch T, Drechsel E, Kleiter I, Wismeth C, Zellner A, Brawanski A, Steinbrecher A, Marienhagen J, Bogdahn U. Pegylated liposomal doxorubicin-efficacy in patients with recurrent high-grade glioma. Cancer. 100(6):1199-207, 2004.

Hegi ME, Diserens AC, Gorlia T, Hamou MF, de Tribolet N, Weller M, Kros JM, Hainfellner JA, Mason W, Mariani L, Bromberg JE, Hau P, Mirimanoff RO, Cairncross JG, Janzer RC, Stupp R.

MGMT gene silencing and benefit from temozolomide in glioblastoma. N Engl J Med. 352(10):997-1003, 2005.

Martin FJ. Pegylated liposomal DOX: Scientific rationale and preclinical pharmacology. Oncology 10 (11), Suppl. 11, 1997.

Pegg A.E. Mammalian O6-alkylguanin-DNA-alkyltransferase: regulation and importance in the response to alkylating carcinogenic and therapeutic agents. Cancer Research 50: 6119-6129, 1990.

Plowman J, Waud WR, Koutsoukos AD, Rubinstein LV, Moore TD, Grever MR. Pre-clinical antitumor activity of Temozolomid in mice, efficacy against human brain tumor xenografts an synergism with BCNU. Cancer Research 54: 3793-3799, 1994.

Pupa SM, Bufalino R, Invernizzi AM. Macrophage infiltrate and prognosis in c-erbB-2-overexpressing breast carcinomas. J Clin Oncol 14:85-94, 1996.

Sakayama K, Masuno H, Miyazaki T, et al.: Existence of lipoprotein lipase in human sarcomas and carcinomas. Jpn J Cancer Res 85: 515-521, 1994.

Salvati M, et al., Long-term survival in patients with supratentorial glioblastoma. J Neurooncol 36(1):61-4, 1998. Review.

Stevens MFG, Hickman JA, Langdon SP, et al.. Antitumor activity in mice of 8-carbamoyl-3-methylimidazo(1-d)-1,2,3,5-terazin-4(3H)-one: A novel drug as an alternative to dacarbazine.

Cancer Research 47: 5846-5852, 1987.

Stubbs M, Bhujwalla ZM, Tozer GM, et al. An assesment of 31P MRC as a method of measuring pH in rat tumors. NMR Biomed 5:351-359, 1992.

Stupp R, Dietrich PY, Ostermann Kraljevic S, et al.. Promising survival for patients with newly diagnosed glioblastoma multiforme treated with concomitant radiation plus temozolomide followed by adjuvant temozolomide. J Clin Oncol 20(5):1375-82, 2002.

Stupp R, Mason WP, van den Bent MJ, Weller M, Fisher B, Taphoorn MJ, Belanger K, Brandes AA, Marosi C, Bogdahn U, Curschmann J, Janzer RC, Ludwin SK, Gorlia T, Allgeier A, Lacombe D, Cairncross JG, Eisenhauer E, Mirimanoff RO; European Organisation for Research and Treatment of Cancer Brain Tumor and Radiotherapy Groups; National Cancer Institute of Canada Clinical Trials Group. Radiotherapy plus concomitant and adjuvant temozolomide for glioblastoma. N Engl J Med. 352(10):987-96, 2005.

Hau Version 4.0 vom 15.06.05 Page 49 of 67

Vaage J, Barbera-Guillem E, Abra R, Huang A, Working P. Tissue distribution and therapeutic effect of intravenous free or encapsulated liposomal doxorubicin on human prostate carcinoma xenografts. Cancer 73(5):1478-84, 1994.

Vaage J, Donovan D, Uster P, et al. Tumor uptake of DOX in polyethylene glycolcoated liposomes and therapeutic effect against xenografted pancreatic carcinoma. Brit. J. Cancer 75: 482-486, 1997.

Wolff JE, Trilling T, Molenkamp G, Egeler RM, Jurgens H. Chemosensitivity of glioma cells in vitro:

a meta analysis. J Cancer Res Clin Oncol 125(8-9):481-6, 1999.

Wong ET, Hess KR, Gleason MJ, et al.. Outcomes and prognostic factors in recurrent glioma patients enrolled onto phase II clinical trials. J Clin Oncol 17(8):2572, 1999.

Yung WKA, Albright RE, Olson J, et al. A phase II study of temozolomide vs. procarbazine in patients with glioblastoma multiforme at first relapse. Br J Cancer 83(5):588-93,2000.

Hau Version 1.0 vom 15.12.01 50/53