Der Abbau des Nicotins bei der Fermentation des Tabaks

Der Abbau des Nicotins bei der Fermentation des Tabaks

Doctoral Thesis Author(s):

Weber, Werner Publication date:

1935

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2>

Der Abbau des Nicotins

bei der Fermentation ^{des Tabaks}

Von der Eidgenössischen Technischen Hochschule ⁱⁿ Zürich

zur

Erlangung ^{der Würde}

eines Doktors ^der Naturwissenschaften

genehmigte Promotionsarbeit, vorgelegt

^von

WERNER WEBER, dipl. Naturwissenschafter,

^aus

^Zürich

f?3

Referent: Herr Prof. Dr. E. Winterstein

Korreferent: ^Herr Prof.Dr.M.

Düggeli

BUCHDRUCKEREI ^UND VERLAG ZIMMERMANN & CIE. AG. BERN 1935

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Herrn Prof.Dr. E. Winterstein

bin ich für die wertvollen Anregungen ^{und das} stete grosseInteresse,^{welcheserfürdieArbeit} bekundete, ^zu grösstem ^Dank verpflichtet.

Grossen Dank schulde ich auch Herrn Prof. Dr. M.

Düggeii

für die zahlreichen Ratschläge ^{und für}Überlassung der bakteriologischen Gerätschaften.

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Geschichtliches. ^Seite Allgemeiner ^Teil.

I. Die

praktische

Ausführung der Fermentation 13 II. Die chemischen Veränderungen während der Tabakfermentation .... 14

1. Die Kohlenhydrate ¹⁴

2. Das Pektin 15

3. Die

organischen

^{Säuren 16}

4. Die Stickstoffkörper ¹⁷

III. ZurTheorie der Tabakfermentation ¹⁸

IV. Ursache der Nicotinverminderung ^{nach den bisher} erschienenen Arbeiten . 20

Spezieller ^Teil.

I. Versuche mit Tabak 25

1. Behandlung ^{von Tabak mit Wasser und Luft 25}

2. Behandlung ^von Tabak mit feuchter Luft 30

3. DieFlüchtigkeit ^{desNicotins 30}

4. Untersuchung ^der Wirkung ^von Luft auf Nicotin 31

II. Versuche mitTabaklauge ³²

1. Behandlung ^vonTabaklauge ^mit durchströmender Luft 32 2. VersuchemitTabaklauge ⁱⁿFetri-Schalen mit

antiseptischen

^{Znsätzen . 35}

III. Versuchemit Bakterienkulturen ^{.... 37}

1. Züchtung ^{von Kulturen 37}

2. Impfung ^steriler Tabaklange ^mit Bakterienkultnren 37 3. Abhängigkeit ^desNicotinabbaus vonder Konzentration 39

4. Ueber die

Abbaugeschwindigkeit

³⁹

5. Züchtung ^von Bakterien in künstlichen Nährlösungen ⁴¹

IV. Untersuchung ^der Nährsubstrate auf Fermentgehalt ^und -Wirkung ^{... 45}

1. Untersuchung ^von Tabaklauge ⁴⁵

2. Untersuchung künstlicher Nährlösung ⁴⁷

3. Versuche mit Trockenferment ⁴⁸

V. Einige Faktoren des bakteriellen Nicotinabbanes ⁵¹

1. Die Bolle des Sauerstoffes ⁵¹

2. Prüfung ^auf

Pyridin

^als

Abbauprodukt

⁵⁴

3. Nachweis von

Methylamin

⁵⁵

VI. Zur Methodik der Nicotinbestimmungen ⁵⁶

Zusammenfassung ⁵⁷

Literaturverzeichnis ⁵⁹

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Mit der

Entdeckung

^Amerikas

beginnt

^{auch die Geschichte} des Tabaks.

Nachdem

spanische

^{Seefahrer nach ihrer Heimkehr nach}

^Europa

^{über das}

Tabakskraut berichtet

hatten,

^{wurden erstmals am}

spanischen

^{Hofe aus den} kleinen Samen

Tabakpflanzen

gezogen, die

jedoch

^{nur als}

Zierpflanzen

ge¬

pflegt

oder etwa als Heilmittel verwendet

wurden,

^{obschon der Mönch}

Pano,

welcher Kolumbus auf seiner zweiten Reise

begleitet hatte, berichtete,

^dass die

Eingeborenen

^{der neu entdeckten Welt die}

zusammengerollten

^Tabak¬

blätter als

sogenannte

«Tabaccos» in Röhren

verglimmen ^Hessen,

^{wobei sie}

den Rauch durch den Mund

einsogen.

^Die

Bezeichnung

«Tabacco» ist bald auf die Pflanze selbst

übertragen ^worden,

^{und die}

Tatsache,

dass dieser Name in den

Sprachen

^der

^meisten,

die Sitte des Rauchens

pflegenden

^Völ¬

ker noch erkennbar

ist,

^bietet

einigermassen

^{die Gewähr}

^dafür,

^{dass die}

Pflanze tatsächlich ihre Urheimat in Zentralamerika hat. Das schliesst nun

allerdings

^nicht aus, dass schon vor der

Entdeckung

^{Amerikas in}

gewissen

Gebieten der Alten Welt

geraucht

^worden

^ist,

^aller

Wahrscheinlichkeit

^nach aber kein Tabak.

Die

Tabakpflanze

^{soll in}

Spanien

^als Medikament Wunder

gewirkt ^haben,

was den französischen Gesandten ^am

portugiesischen ^Hofe,

^Jean

^Nicot,

^be-

wog,

einige

^{Pflanzen seinem}

^Herrn,

^{Franz IL von}

Frankreich,

^zu

^schicken,

dessen

Mutter,

^{Katharina von}

Medici,

^das

Schnupfen

^zur

hoffähigen

^Sitte erhob. Das

Verdienst,

den ersten Schritt ^zur

Verbreitung

des Tabaks in

Europa

unternommen ^zu

haben,

^{fällt also Jean Nicot zu,} welchem dadurch ein bleibendes Denkmal

gesetzt ^wurde,

dass das «wirksame

Prinzip»

^des

Tabaks,

^ein

ausserordentlich giftiges ^Alkaloid,

^von den Entdeckern Posselt und Reimann Nicotin

genannt

^wurde.

Glaubte man

anfänglich

^{auch in}

Frankreich,

^das Wunderkraut als Heil¬

mittel für

körperliche

Leiden verwenden ^zu

können,

^so stellte sich bald

heraus,

^{dass es sowohl}

geschnupft

^wie

geraucht

^weit mehr ein Brecher der

Sorgen

^und ein Sinnbild der

Gemütlichkeit

und des Friedens ist. Trotz be¬

hördlichen Verboten ^{und hohen} Strafen für das Verbrechen des Rauchens machte der Tabak seinen

Siegeszug

^{durch die}

^Welt,

und sein Anbau wurde allenthalben

begonnen,

^der Landwirtschaft neue

Verdienstmöglichkeiten

^bie¬

tend. Amerika

jedoch

^{blieb das klassische Land} des Tabakbaus. Sowohl ⁱⁿ

zum

grössten

^{Teil an Ort und}

Stelle verbraucht werden.

In

Europa

^{sind es}

zur

Hauptsache

^die

Balkanstaaten,

^welche

intensiven Tabakbau betreiben

und den

übrigen

^Erdteilmit

Zigarettentabaken

_versorgen.

Zigarren-

und Pfei¬

fentabake werden auch in

Mitteleuropa produziert,

^{und besonders} in Deutsch¬

land werden

gegenwärtig

grosse

Anstrengungen gemacht, hochwertige ^Tabak¬

sorten durch

Züchtung anbaufähig

^{zu machen.}

Vom

geernteten

^{Tabak bis zum} rauchbaren Produkt ist

jedoch

noch ein

langer Weg.

^{Von einem}

Genuss beim

Rauchen könnte wahrlich nicht

gesprochen werden,

^wenn nicht durch die

Aufbereitung

^der

^Blätter

weit¬

gehende ^chemische Veränderungen

eintreten würden. Im

allgemeinen

^Teil

dieser Arbeit

wird nun eine

Zusammenfassung

^der

bisherigen Ergebnisse

^der

Erforschung

^der

^chemischen Veränderungen gegeben,

welche bei der soge¬

nannten

Tabakgärung

^oder

Fermentation,

welche ebenfalls kurz

beschrieben wird,

^vor sich

gehen.

^Der

spezielle

Teil ist dem

Schicksal

des Nicotins ge¬

widmet,

dessen Gehalt während der

Fermentation abnimmt.

Allgemeiner

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Trocknung

^und Fermentation der

geernteten

Tabakblätter ^sind die bei¬

den

wichtigsten Vorgänge

^{bei der}

Aufbereitung

^{des Tabaks zum rauchbaren} Produkt. Ausser den äusseren

Wachstumsbedingungen,

^wie

Standort, Klima, Düngung

usw., ist es vor allem die

Fermentation,

welche einer bestimm¬

ten Sorte

Qualität

^und

gleichsam

^das

«Bouquet»

verleiht. Kein Wunder

also,

^{wenn auf diesen}

Vorgang

^die

grösste Sorgfalt

verwendet wird. ^Der

Fermentationsprozess

^{bewirkt zur}

Hauptsache folgende Veränderungen

^im Tabakblatt:

1.

Ausgleich

^{der Farbe.}

2.

Verminderung

^des

Wassergehaltes.

3.

Verminderung

^des

Nicotingehaltes.

4.

Entwicklung

des Aromas.

Die

praktische ^Ausführung geschieht

^{in den einzelnen}

Tabakbaugebie¬

ten in verschiedener Weise. Im

allgemeinen

^{wird der}

geerntete

^Tabakzuerst

in besonderen

Trockenschuppen,

seltener infreier

Luft, getrocknet

^{und dann}

der

Fermentation

unterworfen. ^In

gewissen

Gebieten Nordamerikas werden direkt die

grünen

^Blätter fermentiert und ^{erst dann}

getrocknet, gewöhnlich

in künstlich

geheizten

Trockenräumen. Die

gebräuchlichen Fermentations¬

methoden lassen sich ⁱⁿ

folgende

^vier

Gruppen einteilen2)*:

1.

Fermentation

ⁱⁿ

Stapeln.

2. Fermentation in Kisten.

3. Fermentation ^{in Ballen.}

4.

Fermentation

der

grünen

^Blätter.

/. Die Formentation in

Stapeln.

Die durch den

Trooknungsprozess

^{schon braun}

gefärbten

^{Blätter werden}

zu

Stapeln

^{von 5 bis 6 m}

Länge,

^{2 m} Breite und bis 2m Höhe

aufeinander gelegt.

^Nach

einiger

^Zeit

beginnt

sich das Innere der

Stapel

^{zu erwärmen.}

Ist eine

Temperatur

^{von ca. 40°}

^erreicht,

^{so wird der Haufen,}

umgestapelt,

sodass die inneren ^Blätter nach aussen und die äusseren nach innen zu lie¬

gen kommen. Dieses

Umstapeln ^wird

oft mehrmals vorgenommen. ^Je

grös¬

ser der

Wassergehalt

^der

^Blätter,

^{um so höher}

steigt

^die

Temperatur.

^Bei

hellen Sorten darf diese

jedoch

nie über 40°

steigen.

Bei dunkeln Tabaken lässt man die

Temperatur

^{bis auf 60°} oder gar 70°

steigen.

^Hohe

Tempera¬

tur

erzeugt

^eine

dunkle,

^oft fast schwarze Farbe der Blätter. Die Dauer

* Herrn Prof.^Dr.A.Sprecher^v.Bernegg danke ich für die Bereitwilligkeit, mit welcher

er mir das Manuskript ^{des Bandes}VI, ^{«Tabak» des} grossen Werkes ^«

Tropische

^{und sub¬}

tropische Weltwirtschaftspflanzen^{» zur} Verfügung

gestellt

^hat.

der

Fermentation

ist sehr verschieden. Während sie bei den meisten Taba¬

ken

nach 3 Monaten _zu Ende

ist,

dauert sie beim

Kuba-Tabak

auf

Florida

fast 1

Jahr2). Selbstverständlich

werden alle

möglichen Modifikationen

die¬

ses

Stapelverfahrens angewandt.

2. Die Fermentation in Kisten.

Der Tabak

wird

in Kisten von ca. 1 m3 Inhalt

verpackt

^und darin

fermentiert. Dieses

in

Nordamerika

zum Teil

verwendete Verfahren

liefert

jedoch ^einen

^{in Farbe} und

Aroma

sehr

ungleichen ^Tabak.

3. Die Fermentation in Ballen.

Die

Blätter

werden zu Ballen

zusammengeschnürt,

ⁱⁿ

^welchen

nach

einiger

^Zeit

Erwärmung

^{eintritt. Da auf} diese

Weise besonders orientalische Zigarettentabake fermentiert werden,

^{so wird dafür}

gesorgt,

^{dass die}

Tempe¬

ratur sich zwischen 35^° und 37^°

bewegt.

^Nach 1 bis 2 Monaten ist die Fer¬

mentation zu Ende.

4. Die Fermentation der

grünen

^Blätter.

In

besonderen Trockenkammern

_{werden die}

grünen Tabakblätter

auf¬

gehängt

^unddurch Heizen des Raumes auf 25^° bis 30^° wird die

Fermentation eingeleitet.

^Die

Temperatur

wird zur

Erzielung

^von hellen Sorten bis auf

ca.

40°,

^{für dunkle}

Sorten

bis auf 60°

langsam gesteigert.

^Die

vollständige Trocknung

der Blätter

geschieht

durch rasche

Erwärmung

^auf

^hohe _Tempe¬

raturen,

^{oft bis} 90°. _{Der ganze}

Gärungs-

^und

Trocknungsprozess

^dauert

etwa 4 bis 5

Tage.

^Die Trockenräume werden entweder mit Heissluft oder oft auch mit

kleinen

Feuern

geheizt.

^Oft werden bis 20 solcher Feuer auf

dem

Boden des Raumes

angelegt.

Ausser diesen

angeführten Methoden gibt

^es noch eine ganze Reihe weiterer

spezieller

Verfahren. So werden z. B.

Virginia-, Kentucky-, Mary¬

land-Tabake

und andere mehr auf

besondere

Weise

fermentiert.

II. Die chemischen

Veränderungen

während

der Tabakfermentation.

/. Die

Kohlenhydrate.

An Zuckern wurden bis

jetzt

^im

grünen Tabakblatt Fructose

und

Glucose

mit

einiger ^Sicherheit festgestellt3'4). ^Während

die

Stärke

bei der

Dachreife,

d. h. der

langsamen Trocknung

^der

Blätter,

^zum

_grössten

Teil

langsam abgebaut

^{und für die} immer noch

fortdauernden,

^von

Smirnow5)

^als

Hungerstoffwechsel bezeichneten Lebensvorgänge gebraucht wird,

erleiden sowohl Zucker _{als auch} das Pektin erst während der

Fermentation

weit¬

gehende Veränderungen.

Wohl nimmt der

Zuckergehalt

während der Trock¬

nung nach

anfänglichem Steigen langsam ab,

während der

Fermentation je¬

doch sinkt er ausserordentlich stark unter

Bildung

^von

Kohlensäure.

_Eine eventuelle

Entstehung

^von

Kohlensäure

aus dem

Uronsäureanteil der

Pek-

tine oder aus im Tabak nur in kleinsten

Mengen

vorhandenen

Oxy-

^und

Ketosäuren fällt nach Th.

Andreadis6)

^{kaum ins Gewicht. Für den Ab¬}

bau der

Kohlenhydrate

^macht

Behrens1) Mikroorganismen verantwortlich, gelang

^{es ihm}

^doch,

^vom Tabakblatte Hefezellen zu isolieren. Ueber einen

gleichen

^{Befund teilen}

Neuberg

und Kobel in ihren

eingehenden

^«Unter¬

suchungen

^über

Vorgänge

^{bei der}

Tabakfermentation»8)

^nichts

mit, hingegen

ist e3 ihnen

gelungen,

^{im Tabakblatt}

folgende

^{bei der}

Zuckerspaltung

^mit¬

wirkende Fermente einwandfrei nachzuweisen:

1.

Hexose-di-phosphatase.

2.

Ketonaldehydmutase.

3. Saccharase.

Amylase

^{wurde von den} Forschern ebenfalls

vorgefunden.

Die Anwesenheit von Di- und

Polysaccharide spaltenden

^{Fermenten im}

grünen

^{Tabakblatt stellten} schon J. du P. Oosthuizen und 0. M.

Schedd9)

fest. Als

Abbauprodukte

^der

Kohlenhydrate

^fanden

Neuberg

und Kobel neben Kohlensäure auch

Methylglyoxal

^und

Acetaldehyd10'11).

^{Die von An¬}

dreadis

ausgedrückte Befürchtung,

^{dass die}

desmolytischen Enzyme

^den

Trockenprozess

^nicht

überstehen,

^{wurde durch}

Neubergs

^{Versuche entkräf¬}

tigt,

^welche

zeigten,

^{dass die}

Wirkung

der Fermente in auf 100° erhitztem trockenem Tabak nicht

aufgehoben

^war.

2. Das Pektin.

Als

wichtiger

Bestandteil des Tabakblattes ist das Pektin erkannt

worden12).

^{Nach 8.}

Eashirin15)

schwankt der

Pektingehalt

zwischen 11 und

19%,

und steht in einem

umgekehrten

^{Verhältnis zur}

Qualität

des Tabaks.

Die

Veränderungen

^des Tabak-Pektins ^wurden von

Neuberg

und Mitarbeitern

eingehend studiert8»10'14).

Die Forscher kamen zu

folgenden Ergebnissen:

Bei der Fermentation der

Zigarrentabake

^{wird der an} die Pektinsäure

esterartig gebundene Methylalkohol

^fast

vollständig abgespalten.

^Bei

Zigarettentabaken hingegen

^{ist die}

Methoxylverminderung

^viel

geringer,

^wäh¬

rend sie bei Pfeifentabaken eine mittlere

Stellung

^einnimmt.

Auf Grund von

Methoxylbestimmungen

im frischen und fermentierten Tabakblatt kamen Gabel und

SchmucklowsJcaja15)

^zum

Schluss,

^{dass aus dem}

Pektin,

welches ein

Dimethylester

^sein

soll,

während der Fermentation nur

1 Molekül

Methylalkohol abgespalten

^{wird. Eine}

Decarboxylierung

^{der ent¬}

stehenden Galacturonsäure ist nach

Andreadis6)

^sehr unwahrscheinlich.

Die

Pektinspaltung

^{wird nach}

Neuberg

^zur

Hauptsache

durch ein im Tabakblatt vorhandenes

Ferment,

^{welches er Pektase}

nennt, vollzogen,

deren

Wirkung

^{er an leicht zu}

gewinnendem Zitronenpektin verfolgte.

^Die

Gegenwart

^{von Pektase im} fermentierenden Tabak wurde auch von Andrea¬

dis

6)

^{und von van}

Dillen16) festgestellt. Eigenartigerweise

^{fand 8. Kas-}

hirin15)

^keine

Veränderung

^des

Pektingehaltes

während der Fermentation.

Bodnar und

Barta11)

konnten mit fortschreitender Fermentation eine Er-

höhung

^der Wasserstoffionenkonzentration

verfolgen,

welche sie auf die Ent¬

stehung

^von Pektinsäure zurückführen. Bemerkenswert ist der

Vorschlag

von Gabel und

Kiprianow18),

den Ablauf der Fermentation an der

Abgabe

von

Methylalkohol

^zu messen, ^was

jedoch

^{für die} Praxis kaum in Betracht kommen dürfte.

3. Die

organischen

^Säuren.

Bekanntlich tritt das Nicotin in den Zellen des Tabakblattes nicht in freiem Zustande

auf,

^{sondern es ist an}

organische

^Säuren

gebunden.

^Nach

Angaben

verschiedener Autoren19>

20>21)

ist der Gehalt der frischen Blät¬

ter an

Aepfelsäure

^am

grössten,

^{ca. 3 bis}

7o/o.

^Es

folgt

die Zitronen¬

säure,

^deren

Menge

^bis

4% betragen

^{kann. Oxalsäure ist nur in}

kleinen,

immerhin noch leicht

bestimmbaren Mengen

^vorhanden

(Spuren

^bis

2,5%).

Vickery

^und

Mitarbeitern21) gelang

es, auch

Spuren

^{von Fumar- und Bern¬}

steinsäure nachzuweisen. Die ausserordentlich

gründlichen

Untersuchun¬

gen ^von

Vickery

^und

Pucher22>2*)

^an

frischen, getrockneten

^und

gebrauchs¬

fertigen

Tabakblättern

ergaben folgendes

^{über das Schicksal der}

organischen

Säuren während der

Fermentation (Trocknung

^und Fermentation nach dem in Nordamerika mit

«curing»

bezeichneten

Verfahren):

Der Gehalt an

Aepfelsäure zeigt

^{während des}

Gärungsvorganges

^eine

geringe

^Abnahme. Unwesentlich kleiner wird auch der Gehalt an

Oxalsäure,

was sehr verständlich

ist,

^{da diese zum} grossen Teil in Form von

unlös¬

lichen, anorganischen,

insbesondere Calciumsalzen vorhanden ist. Der Ge¬

halt an

Zitronensäure steigt

^{um das 6fache des}

ursprünglichen

^{Wertes. Diese}

gewaltige

Zunahme erklären die

genannten

Forscher durch eine

Bildung

^von Zitronensäure aus den

Kohlenhydraten

^des

Tabaks,

welche während der Fer¬

mentation verschwinden. Die

Entstehung

^aus Aminosäuren durch Desaminie- rung und

Oxydation

ist sehr unwahrscheinlich. Da der Gehalt an unbekann¬

ten mehrbasischen

organischen

Säuren ebenfalls stark

abnimmt,

^{ist viel¬}

leicht auch darin die Ursache der

Zitronensäurebildung

^zu suchen. Ueber das Verhalten weiterer unbekannter Säuren lässt sich natürlich nichts _aussagen.

Obwohl die totale

organische Säuremenge

annähernd unverändert

bleibt,

^so ist innerhalb dieser

Körperklasse

^nach der Fermentation doch eine weit¬

gehende Vereinfachung

^der

Zusammensetzung

feststellbar. Im frischen Tabak¬

blatt machen

Aepfel-,

Zitronen- und Oxalsäure 64 o/o der

gesamten

^Säure¬

menge ^{aus. Der Rest} sind unbekannte Säuren. Im

gebrauchsfertigen

^Tabak

bilden diese drei Säuren

81%

^der

Gesamtsäuremenge,

^{was auf das Ver¬}

schwinden der unbekannten mehrbasischen Säuren und die grosse Zunahme des

Zitronensäuregehaltes

zurückzuführen ist.

Ob die

Veränderungen,

welche diese

organischen

^Säuren

erleiden,

^als rein chemische

Vorgänge

^{betrachtet werden}

dürfen,

^ist

fraglich.

^{Das An¬}

wachsen des

Zitronensäuregehaltes

könnte auch auf die

Wirkung

^{von Mikro¬}

organismen

zurückzuführen

sein, gibt

^{es doch eine}

grössere

^{Zahl von Pil¬}

zen, die die

Fähigkeit besitzen,

^{Zucker in}

Zitronensäure

umzubilden. Aller-

dings

^{wurde bis}

^jetzt

^{noch von} keiner Seite über ein Vorkommen solcher

Pilze,

insbesondere

Aspergillus niger,

^berichtet.

4. Die

Stickstoffkörper.

Im frischen Tabak ist der Stickstoff in

folgenden Bindungsarten

^vor¬

handen:

a)

^als

Amid-Stickstoff;

b)

^als

Amino-Stickstoff;

c)

^als

Nitrat-Stickstoff;

d)

^als

Ammoniak-Stickstoff;

e)

^als

Alkaloid-Stickstoff;

f)

Reststickstoff.

Bei der

Untersuchung

^des

Eiweisskomplexes

^{im Tabak}

gelang

^es

O.

Iljin2i) Albumin,

Globulin und Gluteninzuisolieren. Oawrilow und

Koperina25)

weisen darauf

hin,

^{dass der nach Barnstein} bestimmte Stick¬

stoff nur zum Teil aus Eiweiss

stammt,

^zum andern Teil von

Purin-Körpern geliefert wird,

^{von denen bis}

jetzt

^Adenin

aufgefunden

^werden

konnte19).

Dass die

Veränderungen

^der

stickstoffhaltigen

Bestandteile

je

^{nach Art}

und Weise der

Fermentation,

^{sowie auch}

je

nach der Sorte verschieden sein

können,

^ist selbstverständlich. So finden Bodnar und

Barta2e)

^{keine Ver¬}

änderung

^des Gesamtstickstoffs bei der

Gärung

^von

Kapa-Tabak,

^{was da¬}

durch erklärt

ist,

^{dass auch keine}

Bildung

^{von Ammoniak beobachtet wor¬}

den

ist,

^im

Gegensatz

^zu anderen Tabaksorten.

Wiederum sind es

Yickery

^und

PwcÄer27»28»29),

welche die Verände¬

rung der

Stickstoffkörper

^{bei dem}

«curing» genannten Fermentationspro-

zess

eingehend

studiert haben. Die

Ergebnisse

^ihrer

Untersuchungen

^seien

kurz

festgehalten:

Der

Gesamtstickstoffgehalt

des Tabaks nimmt während des ganzen Vor¬

ganges

ab,

^am raschesten beim

Uebergang

^der

gelben

^Farbe der Blätter in die braune. Diese Abnahme kommt zustande durch

Verflüchtigung

^{von sich}

bildendem

Ammoniak,

ⁱⁿ minimalem Masse durch Verdunsten ^von Nicotin.

Schon in den ersten Stadien der

Trocknung geht

ein Teil des in Wasser unlöslichen Eiweisses in eine lösliche Form über. Die beiden Forscher ver¬

muten darin einen

enzymatischen Vorgang,

^was

jedoch

^{nicht von vorne¬}

herein anzunehmen

ist,

^{da diese}

Aenderung

der Löslichkeit auch die Wir¬

kung

^anderer kolloidchemischer

Bedingungen

^sein kann. Ein grosser Teil des Blatteiweisses wird

hydrolytisch gespalten

ⁱⁿ

Aminosäuren,

^die ihrerseits zum Teil eine

oxydative Desaminierung

erfahren. Das sich dabei bildende Ammoniak entweicht zur

Hauptsache,

ein kleiner Teil wird auf¬

gebraucht

^zur

^Bildung

^von Säure-Amiden. ^Auf diese Weise lassen sich die Abnahme des Amino-Stickstoffes und die

anfängliche

Zunahme des Amid- Stickstoffes erklären. ^Der letzte nimmt

jedoch

gegen Ende der Fermentation stark

ab,

^wofür

Yickery

und Pucher wiederum ein

Enzym

verantwortlich machen.

Ein anderer Teil des Blatteiweisses bildet bei der

Hydrolyse

ⁱⁿ

Gegen¬

wart von

Kohlenhydraten huminartige

^Stoffe.

Nach älteren

Untersuchungen

^{verändert sich der}

Nitratgehalt

^wäh¬

rend der

Trocknung

und Fermentation nicht. In neuerer Zeit wurde

gefun¬

den,

^{dass auch er}

Schwankungen

^erleidet.

Smirnow und

Izwoschikow30)

kommen auf Grund der

Vorgänge

^{in den}

ersten

Tagen

^der

Trocknung

^zum

Schluss,

^dass sich im Tabakblatt zwei

Typen

^von

Eiweiss-Körpern befinden,

^{ein durch}

Enzyme

^leicht

zerlegbares Reserveprotein

^{und ein}

widerstandsfähigeres Plasmaprotein

anderer Zusam¬

mensetzung.

Auch sie stellen eine Abnahme des Eiweiss-Stickstoffes und Zunahme des Amino- und Amid-Stickstoffes fest.

Sicher

spielen

^{bei der}

Eiweiss-Spaltung

^{Fermente die}

grösste

^Rolle.

Im

Glyzerin-Extrakt

frischer Tabakblätter fand Traetta

Mosca31) prote¬

olytische

Fermente. Fodor und

Reifenberg52) gelang

es, im Mazerations¬

saft frischer Blätter ein

Pepton spaltendes

Ferment nachzuweisen. Dass bei schlecht

geleiteter,

^zu feuchter Fermentation durch überhandnehmende

Wirkung

^von

Mikroorganismen

Fäulnis der Eiweiss-Stoffe

eintritt,

^ist

jedem Tabakpraktiker

^bekannt.

Die Abnahme des

Nicotingehaltes

während der Fermentation ist eine feststehende Tatsache. Die

Verminderung beträgt je

^{nach Art und Weise des}

Gärungsvorganges

^{5 bis}

25%.

Ueber ihre Ursache

jedoch gehen

die Meinun¬

gen weit

auseinander,

^{sodass es sich}

rechtfertigt,

in einem besonderen Ab¬

schnitt die verschiedenen

Auffassungen

miteinander zu

vergleichen.

Der

Uebergang

^der

grünen

Farbe der Blätter in Gelb und Braun ist mit einer

Umwandlung

^des

Chlorophylls

^verbunden. Einen Einblick in diese

Vorgänge

^{konnte man}

jedoch

^bis

jetzt

noch nicht erhalten.

III. Zur Theorie der Tabakfermentation.

Obschon die Fermentation der

wichtigste Vorgang

^{bei der}

Aufbereitung

des Tabaks

ist,

ist seine Natur noch sehr

wenig geklärt,

^was einmal darauf zurückzuführen

ist,

^{dass die} verschiedenen nebeneinander verlaufenden Reak¬

tioner. die

Untersuchung

ausserordentlich

erschweren,

^{dann aber auch dar¬}

auf,

^{dass es sehr}

schwierig ist,

^eine Fermentation in einem

durchsichtigen Laboratoriumsexperiment

auszuführen. Immerhin hat es an

Erklärungen

nicht

gefehlt,

^die

jedoch

oft in grossem

Gegensatz

zueinander stehen.

Grundsätzlich unterscheiden

Schmidt33), Andreadis6)

^und

Sprecher2) folgende

^drei

Anschauungen:

1. Die

Fermentation,

^{ein reiner chemischer Prozess.}

2. Die

Fermentation,

^eine

Wirkung

^von

Mikroorganismen.

3. Die

Fermentation,

^ein

enzymatischer

^Prozess.

Die erste Theorie vertreten Boekhout und 0. de

Vries3i),

^{indem sie in}

der Fermentation eine reine

Oxydation sehen,

bei welcher

hauptsächlich

die

Kohlenhydrate angegriffen werden,

^wobei

Eisenverbindungen

^{eine kata-}

lytische Wirkung

ausüben sollen.

Fesca35) glaubt,

dass der in den Blättern vorhandene Sauerstoff diese

Oxydationsvorgänge

unterhalte. Diese etwas

einseitige

^{Theorie konnte}

späteren Untersuchungen

nicht mehr standhalten.

Auf Grund der zweiten

Anschauung schlug Suchsland56)

^eine soge¬

nannte Edelfermentation _vor, die darin

besteht,

dass die auf einer hervor¬

ragenden Tabakqualität

vorkommenden

Mikroorganismen ^isoliert,

^{in Rein¬}

kulturen

gezüchtet

^und

minderwertigen

^Tabaken

zugesetzt

werden. Der For¬

scher ist der

Ansicht,

^dass Geschmacks- und

Geruchsveränderung

^durch diese Lebewesen bewirkt werden.

Bakteriologische Untersuchungen

^{über die} Fermentation des Tabaks wurden weiter von

Behrens31), Vernhout38)

^und

Koning39) ausgeführt,

welch letzter eine ganze Anzahl ^von bei der Fer¬

mentation wahrscheinlich wirksamen

Mikroorganismen fand,

die nach sei¬

nen

Beobachtungen

^{Aroma und}

Qualität

beeinflussen. Zu wesentlichen Er¬

kenntnissen führten

jedoch

^diese

bakteriologischen

Studien bisher nicht.

Die

Theorie,

^{dass die} Fermentation ein reiner

enzymatischer

^Prozess

sei,

wurde zuerst von

.Loew40»41)

verfochten. Nach seiner Ansicht ist die

Feuchtigkeit

^{in den} fermentierenden Blättern zu

gering,

als dass ein Ge¬

deihen der

Mikroorganismen möglich

^{wäre. Das}

spezifische

Tabakaroma ent¬

wickelt sich

auch,

^wenn gar keine Bakterien

gedeihen

können. Loew unter¬

suchte den

Fermentgehalt

^{frischer und} fermentierter Tabakblätter und konnte im frischen Blatt

Oxydase, Peroxydase

und Katalase nachweisen.

Diese Befunde wurden in vielen

späteren Untersuchungen

^von anderen For¬

schern

bestätigt.

^An

jüngeren

Arbeiten seien

diejenigen

^von

Smirnowi2)

und von Fodor und

Reifenberg i3) genannt,

^die die Fermentation mit der

Selbsterhitzung

^{des Heus}

vergleichen,

^{die ebenfalls als ein}

enzymatischer Vorgang angesprochen

^worden ist. Die grosse

Bedeutung

der Fermente bei der

Gärung

^des Tabaks wird auch durch verschiedene Arbeiten von Neu¬

berg hervorgehoben.

Im

folgenden

^{ist eine}

Zusammenstellung

der in Tabakextrakten oder Pressaft

nachgewiesenen

^Fermente

gegeben:

Oxydase

^{(Loew u. a. m.)}

Peroxydase ^(Loew

^{u. a. mj}

Katalase

(Loew

^{u. a.}

m.)

Peptidase

^{. .}

^(Smirnow,

^{Fodor und}

Eeifenberg)

Protease

(Traetta Mosca)

Hexose-di-phosphatase

^{. . .}

(Neuberg) Keton-Aldehydmutase.... (Neuberg)

Saccharase ^{... ...}

(Neuberg)

Invertase

(Neuberg)

Amylase (Neuberg

^undvan

Dillen)

Carboxylatische Wirkung

^{wurde von Fodor und}

Reifenberg

konstatiert.

Eine Brücke zwischen der

Auffassung

^einer ausschliesslich bakteriel¬

len

Tätigkeit

^und

Wirkung

^beim

Fermentationsprozess

^{einerseits und} den

Wirkungen

^der

Enzyme

anderseits hat in neuester Zeit

Johnson^) geschla¬

gen. Er beobachtete in Dewar-Flaschen die bei der

Gärung

entstehende

Temperaturerhöhung

^und

fand,

^{dass Zusätze} von

antiseptischen Stoffen,

^wie

Chloroform, Sublimat,

^{Toluol und}

anderen,

^die

Bildung

^von

^Wärme

^verhin¬

dern,

obschon sie

Peroxydase

^und andere Fermente nicht zerstören. Fodor und

Beifenbergi2)

^stellten

allerdings

^{auch in}

Gegenwart

^von Sublimat eine

Temperaturzunahme

fest. Auf hohe

Temperatur

erhitzter Tabak

gibt

^nach

Johnson keine

Wärmeentwicklung,

^wohl

aber,

^{wenn er mit} einem mittels Filtration durch Porzellanfilter von Bakterien befreiten Extrakt von nicht¬

erhitztem,

^die

Enzyme

^noch enthaltendem Tabak versetzt wird. Diese Er¬

gebnisse zeigen,

^{dass die}

Tätigkeit

^{von Bakterien für} einen Teil der Fer¬

mentationsvorgänge höchstwahrscheinlich

nicht

nötig ist,

^{dass sie aber}

den

Gärungsvorgang

durch ihre Anwesenheit und

Wirkung

^{wesentlich be¬}

schleunigen.

Es wäre höchst

sonderbar,

^{wenn alle}

Vorgänge,

^die sich bei der Fer¬

mentation

abspielen,

^{auf eine} Ursache

zurückgeführt

^werden

könnten,

hat man es doch nicht mit toter

Materie,

sondern mit

immer

noch leben¬

den Zellen und Zellverbänden zu tun.

Allerdings

^{tritt die}

Auffassung

^von

der reinen chemischen

Oxydationswirkung

^des Sauerstoffs ohne

organische Katalysatoren

stark in den

Hintergrund

^{seit der}

Auffindung

^von

Oxydatioas-

enzymen in frischen und

fermentierten Tabakblättern.

Die

Bedeutung

^der

übrigen

^im Zellsaft vorhandenen

Fermente

ist nach dem oben

Gesagten

^nicht

weiter zu betonen. Ob

hingegen

^sämtliche

Erscheinungen

^auf

Enzymwirkun¬

gen

zurückgeführt

^werden

können,

ist zweifelhaft. Der

Wirkung

der auf dem Tabakblatt vorkommenden

Mikroorganismen

^kommt

_gewiss

eine

Bedeutung

zu. Ob sie aber für die

Entstehung

der Aromastoffe verantwortlich

gemacht

werden

können,

^{kann bis}

jetzt

^nicht

gesagt

^werden.

IV. Ursache der

Nicotinverminderung

^{nach den bisher} erschienenen Arbeiten.

Dass bei der

Fermentation

der

Nicotingehalt abnimmt,

hatte schon

Suchsland36) festgestellt.

^Er

vermutete,

^{dass es sich dabei} um die Ueber-

führung

^{von Nicotin in Nicotianin} oder

Tabakcampher

^handelt. Ein solcher

mysteriöser Körper

^konnte

jedoch

^nie

gefunden

werden.

Auf Grund der

Entdeckung

^von

Behrensi5>iG),

^{dass der}

Schimmelpilz Botrytis

^{cinerea seinen}

Stickstoffbedarf

mit Nicotin

decken kann,

sowie dass

gewisse

^{Bakterien in} einer

Nährlösung ausgezeichnet gedeihen,

^{welche als}

einzige Stickstoffquelle

^Nicotin

enthält,

^{das dabei}

vollständig verschwindet, liegt

^die

Vermutung nahe,

^{dass die}

Nicotinabnahme

bei der

Fermentation

auf dieselbe Ursache

zurückzuführen

ist. In neuerer Zeit war es Faite-

lowitzi7>i8),

^der die Abnahme des

Nicotingehalts

^der

Tätigkeit

^{von Bakte¬}

rien zuschrieb. Tabakbrei oder

wässrige

^{Extrakte von} Tabak

zeigten

^nach

vierundzwanzigstündigem

^{Stehen eine starke}

Verminderung

^{des Nicotins}

unter

gleichzeitiger ^Erhöhung

der Alkalität der

Flüssigkeit.

Beide Erschei¬

nungen unterbleiben bei Zusatz von Chloroform. Als

Zersetzungsprodukte

sollen sich nach Faitelowitz leicht

flüchtige organische

^Basen

^bilden,

^die

jedoch

^{aus den Extrakten} verdunsten. Da mit dem Abbau des Nicotins eine

Vervielfachung

^der Katalase-Aktivität

eintritt,

sei der bakterielle Charakter dieser Reaktion erwiesen. Die

Vermehrung

der Katalase wird von Faite¬

lowitz

jedoch

^{nicht mit Versuchen}

belegt.

^{Dass bei seiner}

Versuchsanordt-

nung auch Fäulnisbakterien zur

Wirkung

^kommen

können,

^{ist nicht ver¬}

wunderlich. Sowohl Fodor und

Beifenbergi9)

wie auch Bodnar und

Barta50)

beanstanden die Versuche von Faitelowitz. Die beiden

letztgenannten

^führen

die Nicotinabnahme bei seinen Versuchen auf die

Flüchtigkeit

des Nicotins

zurück,

^{was sie aber an Hand von} Blindversuchen zu beweisen unterlassen.

Für die bei der Fermentation eintretende

Nicotinverminderung

^macht

LoewiX)

^{die von ihm erstmals im Tabakblatt}

gefundene Peroxydase

^verant¬

wortlich,

^welche das Nicotin unter

Bildung

^von Ammoniak zersetzen soll.

Die

Wirkung

^der

Oxydationsenzyme

^{auf Nicotin wurde auch von}

Behrens^) untersucht, jedoch

^mit

negativem Erfolg.

^Die

enzymatische Zersetzung

^von Nicotin bei der Fermentation scheint durch die Versuche von Fodor und

Reifenberg 32>i3)

^an Wahrscheinlichkeit zu

gewinnen.

^{Es wurde}

gefunden,

dass Tabakextrakte imstande

sind,

^{unter sterilen}

Bedingungen

^{in Lösun¬}

gen ^von reinem Nicotin einen Teil desselben^zu

zersetzen,

^{wobei sich}

ergab,

dass bei zunehmender

nicotinspaltender Wirkung

eines solchen Tabakextrak¬

tes auch seine

Fähigkeit,

^Sauerstoff

aufzunehmen, steigt,

^{sodass in der}

Nicotinzersetzung

^ein

enzymatischer Oxydationsprozess

vermutet wird. Die Forscher unterlassen

jedoch,

^{in ein und} demselben Versuch neben der Mes¬

sung der Sauerstoff-Aufnahme ^die

gleichzeitige Verminderung

des Nicotin¬

gehaltes

^{an Hand von}

Nicotinbestimmungen

^zu

beobachten;

schliesslich kann der

aufgenommene

^{Sauerstoff auch noch zur}

Oxydation

anderer Stoffe Ver¬

wendung

finden. Was den

Zusammenhang

^zwischen

Peroxydase-

^und

Oxy- genasegehalt

eines Tabaks und der bei der Fermentation eintretenden Nico¬

tinverminderung ^betrifft,

^{so fand L.}

Barta61)

^keine

Beziehungen,

^{wohl aber} scheint ein

grösserer

^{Gehalt von} Katalase auch eine vermehrte Nicotin¬

abnahme zu

bewirken*).

Auf Grund des chemischen Verhaltens des Nicotins beim

oxydativen

Abbau halten es Fodor und

Reifenberg43)

^für

wahrscheinlich,

^{dass bei die¬}

ser

enzymatischen Oxydation Pyridin, Methylamin

^und Ammoniak entsteht.

Ein

eindeutiger

Nachweis dieser

Verbindungen

^wird

jedoch

^nicht

gegeben.

Bodnar und

Barta26)

^{können keine}

Bildung

^von

Pyridin

^und

Methylamin

feststellen.

Zusammengefasst ergeben

^die

^bisherigen Forschungen,

^{dass ein} enzy¬

matischer Abbau des Nicotins

möglich

^{und bei der} Fermentation sehr wahr-

*) Ueber die Fermente im Tabak siehe die zahlreichen

ausgezeichneten

^{Arbeiten von}

C. Neuberg und Mitarbeitern in der Biochem. Zeitschrift.

scheinlich ist. Die

Tätigkeit

^und

Wirkung

^von

Mikroorganismen

^{kann nicht}

endgültig

^verneint

werden,

^{wird aber in} den

Hintergrund gedrängt.

^Der

Nicotinabbau scheint ein

Oxydationsvorgang

^{zu sein. Aus der}

zugänglichen

Literatur konnte

jedoch

nicht ersehen

werden,

^welche

Umwandlungen

^das

Nicotin während der

Fermentation

erleidet. Auch in den zahlreichenmuster¬

gültigen

^{Arbeiten aus} dem unter der

Leitung

^{von A.} Schmuck stehenden Institut für

Tabakforschung

ⁱⁿ Krasnodar wird darüber nichts

mitgeteilt.

Angesichts

^dieser

Ergebnisse,

^sowie der eventuellen

Möglichkeit,

^den

Gang

^der

Fermentation

künstlich so zu

beeinflussen, dass die Nicotinver- minderung

^noch beträchtlicher

wird,

^{ist es}

gerechtfertigt,

^{Ursache und Fort¬}

gang dieser

Nicotinverminderung

weiter aufzuklären.

Spezieller

Leer Vide Empty

Als

Grundlage

^dieser Versuche wurde ein

patentiertes

Entnicotinisie-

rungsverfahren52)

^vonTabak

benutzt,

^{welches zumTeil} auf den Untersuchun¬

gen und

Ergebnissen

^von

Faitelowitz^1)

beruht und darin

besteht,

^{dass der}

Tabak mit viel Wasser versetzt und die entstehende

Lauge

^{mit Luft durch¬}

strömt wird. Nach

einiger

^Zeit verschwindet das Nicotin in der

Lauge,

^was

vom Erfinder durch die

Tätigkeit

^von

Mikroorganismen

^{erklärt wird. Die in}

der

Lauge

auftretende alkalische Reaktion wird durch Säurezusatz zurück¬

gedrängt.

^Nach

erfolgter Behandlung

^{wird die}

Lauge

auf den Tabak

gesprüht

und auf diesem

eingedunstet.

/.

Behandlung

^{von Tabak mit} Wasser und Luft.

Versuch A

a)

^{^^ ^usa^z von}

organischen

^Säuren.

40 g eines amerikanischen Tabaks

(Nicotingehalt 2,4o/o)

werden ange¬

feuchtet,

die Blätter

ausgeglättet

^und in einen grossen

Glaszylinder gehängt,

Apparatur:

der in einem Thermostaten von 40°

Badtemperatur

steht. In den

Zylinder

werden 300 cm3 Wasser

gegeben

^und mittels einer

Wasserstrahlpumpe

^durch

drei Tonverteiler Luft durch die

Flüssigkeit geblasen,

^{welche nach}

einiger

Zeit stark zu schäumen

beginnt.

^{Der im}

Zylinder

^{nicht mehr} Platz findende Schaum wird in einer

nachgeschalteten

^Flasche

aufgefangen.

Die abströ¬

mende Luft wird durch zwei mit Schwefelsäure und Kieselwolframsäure versetzte Waschflaschen

geleitet,

^um

abgeblasenes

^Nicotin zurückzuhalten.

Nach 12 Stunden

reagiert

^{der Schaum} gegen Lakmus stark alkalisch.

Um die Alkalität etwas

abzuschwächen,

werden 2 cm3

\

Zitronensäure zu¬

gegeben.

Weitere Säurezusätze:

nach 14 Stunden 4 cm3

^

Zitronensäure

» 16 ^» 4 ^{» »}

» 17 ^» 5 ^{» »}

» 18 ^» 5 ^{» »}

» 19 ^» 10 ^» »

» 20 ^» 10 ^{» >}

» 21 ^» 10 ^» >

» 22 ^» 10 ^{» >}

> 36 ^» 10 » »

» 37 ^» 10 ^{> »}

» 38 ^» 10 » »

» 39 ^» 10 ^» »

» 40 ^» 20 ^{» »}

» 42 ^> 20 » ^»

» 43 ^» 20 ^{» »}

» 44 ^» 20 ^{» »}

Nach 60 Stunden Abbruch des Versuchs.

Gesamte

zugesetzte Säuremenge:

180 cm3. Die

Flüssigkeit reagiert

^am

Ende des Versuchs immer noch alkalisch.

Gesamte

Flüssigkeitsmenge

^{am Ende des Versuchs} 450 cm3. Mit dem

Ausspülen

^des

Zylinders ergeben

^{sich zusammen 500 cm3. In einem}

aliquo¬

ten Teil wird das Nicotin bestimmt durch

Wasserdampfdestillation

^{und Fäl¬}

lung

^mit Kieselwolframsäure.

50 cm3

Lauge

^enthalten

0,0239

g Nicotin

500 ^{» » »}

0,239

^{» >}

Gewicht des wasserfreien Tabaks nach dem Versuch

30,5

g

Nicotingehalt: ^0,43%

Im Tabak verbliebenes Nicotin:

0,131

g

Waschflaschenflüssigkeit:

^{Der Inhalt der ersten} Waschflasche ist durch

abgeblasenes

^Nicotin

getrübt

^worden.

Verdunstetes Nicotin:

0,007

g

In beiden Waschflaschen lassen sich mit Nessler's

Reagens

^bedeutende

Mengen

^von Ammoniak nachweisen.

Bilanz:

Gesamte

Nicotinmenge

^zu

Beginn

des Versuches .

0,825

g (40 g Tabak, "Wassergehalt ¹⁴

°/o,

Nicotingehalt 2,4 %)

Nicotin in der

Lauge

^{0,239 g}

Nicotin im Tabak nach dem Versuch 0,131 g

Abgeblasenes

^{Nicotin 0,007 g}

Nicotinabnahme 0,448 g

=

54,4 % Analoge Ausführung

^der

folgenden

^Versuche.

Versuch

A2.

Angewandt:

50 g Sorte

«Grossblättrig,

^{Nr. 2».}

Nicotingehalt: ^2,0o/0.

Wassergehalt:

^{6 o/0.}

Zugesetzte Menge

^{Wasser: 300cm3.}

Versuchsdauer:

43 Stunden.

Nach 12 Stunden wird ^dem

alkalisch reagierenden

^{Schaum von Stunde}

zu Stunde ^~ Zitronensäure

zugesetzt,

im ganzen 145 cm3.

Flüssigkeitsmenge

nach dem Versuch 560 ^cm3.

Nicotinbestimmung

ⁱⁿ einem

aliquoten

^Teil.

50 cm3 enthalten

0,0102

g Nicotin

560 ^{» »}

0,114

g ^»

Gewicht des wasserfreien Tabaks ^{nach dem} Versuch: 36 _g.

Nicotingehalt: ^0,22o/o.

Im Tabak

verbliebenes

^Nicotin:

0,072

g.

Die

Waschflaschenflüssigkeit

^{enthält kein}

abgeblasenes ^Nicotin,

^hin¬

gegen

gibt

^Nessler's

Reagens

eine dicke braune

Fällung.

Bilanz:

Gesamte

Nicotinmenge

^zu

Beginn

^{des Versuches .}

^0,940

^g

Nicotin in der

Lauge

^{0,114 g}

Nicotin im Tabak nach dem Versuch 0,072 g

Nicotinabnahme 0,754 g

=

80,5 $

Versuch

A3.

Angewandt:

50 g Marke

Kentucky.

Nicotingehalt: ^6o/o.

Wassergehalt: ^9o/o.

Zugesetzte Menge

Wasser: 300 cm3.

Dauer des

Versuchs:

56 Stunden.

Während

des

Versuchs zugesetzte Menge £

Zitronensäure: ^{140 cm3.}

Menge

^der

Lauge

^{nach dem}

^Versuch:

^{500 cm3.}

50 cm3 enthalten

0,133

_g Nicotin

500 » »

1,33

g ^» Gewicht des wasserfreien Tabaks nach dem Versuch: 32 g.

Nicotingehalt: 0,5o/o.

Im Tabak verbliebenes Nicotin:

0,16

g.

Abgeblasenes Nicotin: 0,005

g.

Bilanz:

Gesamte

Nicotinmenge

^zu

Beginn

^{des Versuches .}

2,701

_g

Nicotin in der

Lauge

^.

1,335

_g

Nicotin im Tabak nach dem Versuch

0,167

g

Abgeblasenes

^Nicotin

_0,005

_g

Nicotinabnahme

1,194

_g

=

44,2%

Versuch

A±.

Angewandt:

³⁰ _g Marke Kio

Grande.

Nicotingehalt: 2,4<y0.

Wassergehalt:

¹⁴ o/o.

Zugesetzte Menge

Wasser: 300 cm3.

Dauer des Versuchs: 40

Stunden.

Da nach 15 Stunden die

Flüssigkeit

^{noch nicht}

_schäumt,

wird eine

Spur Saponin zugefügt.

Im _ganzen

zugesetzte Säuremenge:

^{30 cm3}

|-

Zitronensäure.

Menge

^der

Lauge

^{nach dem} Versuch: 350 cm3.

Um das

Saponin,

welches bei der

Nicotinbestimmung

^die

Wasserdampf¬

destillation

durch starkes Schäumen

verunmöglicht,

^zu

zerstören,

^{wird die}

für die

Bestimmung

^verwendete

_Lauge

mit

einigen Tropfen

Salzsäure _ange¬

säuert und

aufgekocht.

40 cm3

Lauge

^enthalten

_0,0041

_g Nicotin

350 ^» » »

0,036

_g ^»

Gewicht

des wasserfreien Tabaks nach dem

Versuch:

_{21 g.}

Nicotingehalt: 0,1 o/o.

Im

Tabak verbliebenes

Nicotin:

0,021

_g.

Abgeblasenes Nicotin:

0.

Bilans:

Gesamte

Nicotinmenge

^zu

Beginn

^{des Versuches .}

_0,618

_g

Nicotin in der

Lauge _0,036

_g

Nicotin im Tabak nach dem Versuch

0,021

_g

Nicotinabnahme

_0,561

g

=

91%

Versuch

Ab.

Angewandt:

500 g Marke

Kentucky.

Nicotingehalt: 4,8o/0.

Wassergehalt: 6,5o/o.

Zugesetzte Menge

^{Wasser: 1500 cm3.}

Dauer des Versuchs: 150 Stunden.

Nach 3

Tagen

^{werden die Blätter}

umgekehrt aufgehängt,

^{sodass sie}

nach und nach

vollständig ausgelaugt

^werden.

Im ganzen

zugesetzte Säuremenge:

^{250 cm3}

-f

Zitronensäure.

Menge

^der

Lauge

^{nach dem} Versuch: 1500 cm3.

50 cm3

Lauge

^enthalten

0,256

g Nicotin

1500 ^{» » »} 7,68 g ^>

Gewicht des wasserfreien Tabaks ^{nach dem} Versuch: 280 _g.

Nicotingehalt: ^2,95o/o.

Im Tabak verbliebenes Nicotin:

7,61

g.

Abgeblasenes

^Nicotin:

0,034

g.

Bilanz:

Gesamte

Nicotinmenge

^zu

Beginn

^{des Versuches .}

^22,44

^g

Nicotin in der

Lauge ^7,68

^g

Nicotin im Tabak nach dem Versuch

7,61

g

Abgeblasenes

^{Nicotin 0,03 g}

Nicotinmenge

^{nach dem Versuch}

^15,32

^g

Nicotinabnahme

7,12

g

=

ifl,tj %

Versuch A

^)

^{Ohne Zusatz von}

organischen

^Säuren.

Angewandt:

50 g Marke

Kentucky.

Nicotingehalt: 3,3o/0.

Wassergehalt: 6,8o/o.

Zugesetzte Menge

Wasser: 100 cm3.

Dauer des Versuchs: 40 Stunden.

Trotz

steigender

Alkalität wird keine Säure

zugesetzt.

Menge

^der

Lauge

^{nach dem Versuch: 100 cm3.}

30 cm3

Lauge

^{enthalten 0,059 g Nicotin}

100 ^{» » »}

0,197

g

Gewicht des wasserfreien Tabaks nach ^dem Versuch: 39 _g.

Nicotingehalt: ^0,8o/o.

Abgeblasenes

^{Nicotin: 0.}

Bilanz:

Gesamte

Nicotinmenge

^zu

Beginn

^{des Versuches .}

^1,535

^g

Nicotin in der

Lauge 0,197

g

Nicotin im Tabak nach dem Versuch

0,281

g

Nicotinabnahme 1,057 _g

=

68,8 %