656 NOTIZEN Nachweis einer lysozymempfindlichen Stütz
membran der Endocyanellen von C y a n o p h o r a P a r a d o x a Korschikoff
Ha i n f r i e d E. A. Sc h e n k
Institut für Chemische Pflanzenphysiologie der Universität Tübingen
(Z. Naturforsch. 25 b, 656 [1970] ; eingegangen am 11. A pril 1970)
Durch schonenden Aufschluß des Flagellaten Cyano
phora paradoxa Korschikoff 1 in einem abgewandelten Homogenisator nach P o t t e r und E l v e h j e m , dif
ferentielle Zentrifugation des Homogenates 2 und damit Gewinnung der durch Ha l l und Cl a u s3 mit dem Namen Cyanocyta korschikoffiana belegten Endocyanel
len 4 und deren nachfolgende Behandlung mit Na- triumdodecylsulfat-Lösung, Ultraschall und Pronase- Verdauung 5 lassen sich rundliche Sacculi 6 (s. Abb. 1 *) von der Größe der oben genannten Endocyanellen ge
winnen. (Die Flagellaten-Membran wird im Verlaufe dieser Präparation z. T. stufenweise, jedoch vollständig abgebaut.)
Diese Sacculi, nach der Agar-Filtrationstechnik 7 prä
pariert, können nach Besprühen mit einem Lysozym
enthaltenden Puffer (s. Tab. 1!) und ca. 20 Min. Inku
bation bei Raumtemperatur elektronenmikroskopisch nicht mehr nachgewiesen werden. Auch ein anderer Ver
such weist auf die Lysozymempfindlichkeit der Cyanel- lenmembran. Läßt man auf die isolierten, noch intak
ten und durch Schütteln in Suspension gehaltenen Endo
cyanellen eine gepufferte Lösung von Lysozym (s.
Tab. 1) einwirken, so beobachtet man schon nach 5 Min. gegenüber dem Blindversuch eine wesentlich stärkere Blaufärbung des Überstandes (Austritt von C-Phycocyanin und Allophycocyanin8 in das Suspen
sionsmedium) , was durch einen zeitabhängigen Reihen
versuch noch verdeutlicht wird (s. Tab. 1).
Die Versuche weisen darauf hin, daß die Endo
cyanellen von Cyanophora paradoxa K. eine dem Mureinsacculus von Bakterien und gewissen Blaualgen ähnlich gebaute Stützmembran besitzen müssen. An der chemischen Strukturaufklärung dieser Membranen wird gearbeitet.
Herrn Dr. H. F r a n k im Max-Planck-Institut für Virusfor
schung, Tübingen, bin ich für die elektronenmikroskopischen Durchmusterungen der einzelnen, präparativ gewonnenen Membranfraktionen und anregende Diskussionen zu besonde
rem Dank verpflichtet, der Deutschen Forschungsgemeinschaft für die Förderung dieser Arbeit.
Versuchs-Nr. 1 2 3 4 5 6 7 8
Inkubationszeit [Min.] 0 3 6 9 12 15 18 18
Extinktion bei 620 nm des durch Zentrifugation
geklärten Überstandes 0,020 0,057 0,066 0,071 0,076 0,080 0,085 0,020
Tab. 1. Übertritt der Phycochromoproteide von Cyanocyta korschikoffiana in das Suspensionsmedium bei Lysozyminkubation (25 °C ). Mengenangaben für Versuchs-Nr. 2 — 7: Jeder Ansatz enthielt 5 ml 0,0025 M Phosphatpuffer. pH 7,0 (0,035 M KCl/
0,001 M MgCl2) , 2 mg Lysozym 9 und Cyanellen (17 fig Chlorophyll a)10. Mengenangaben für Versuchs-Nr. 1 und 8: wie bei den Versuchs-Nr. 2 — 7, jedoch ohne Lysozym-Zusatz.
* Abbn. 1 s. Tafel S. 640 b.
1 Sammlung von Algenkulturen, Pflanzenphysiologisches Institut der Universität Göttingen, BRD.
2 M. E d e l m a n , D. S w i n t o n , J. A. S c h i f f , H. T. E p s t e i n
u. B. Z e l d i n , Bacteriol. Rev. 31, 315 [1967].
3 W. T. H a l l u . G. C l a u s , J. C e ll B io l. 19. 551 [1963].
4 A. P a s c h e r . Jb. wiss. Bot. 71, 386 [1929].
5 Persönliche Mitteilung von Dr. U. S c h w a r t z , F. Miescher- Laboratorium der Max-Planck-Gesellschaft, Tübingen.
6 W. W e i d e l u . H. P e l z e r , Advances in Enzymol. 26, 194 [1964].
7 E. K e l l e n b e r g e r u . W. A r b e r , Virology 3, 245 [1957].
8 D. J. C h a p m a n , Arch. Mikrobiol. 55, 17 [1966].
9 Lysozym (aus Hühnereiweiß) der Firma Boehringer- Mannheim.
10 Chlorophyll a-Bestimmung nach R. Z i e g l e r u . K . E g l e ,
Beitr. Biol. Pflanzen 41. 11 [1965].
Univ.-BibliotheJi Regensburg
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H. E. A. S c h e n k , Nachweis einer lysozymempfindlichen Stützmembran der Endocyanellen von Cyanophora Paradoxa Korschi- koff (S. (S. 656)
Abb. 1. Isolierter Membransacculus von Cyanocyta korschi- koffiana im späten Teilungsstadium nach Behandlung mit Natriumdodecylsulfat und Ultraschall. 24000-fach (Aufnahme H. F r a n k , Max-Planck-Institut für Virusforschung, Tübin
gen).
Zeitsdirift für Naturforschung 23 b. Seite 640 b.