4 Material und Methoden
4.1 Material
4.1.9 Synthetische Oligonukleotide
TAP-Tags (mit pBS1479 als Matrize) NOC1
178
TAATTTACAACACCGAAGTGTTTAGT TAATGTATTATTATTTTTACGACTCA CTATAGGG
PCR zur genomischen Integration des
TAP-Tags (mit pBS1479 als Matrize) NOC1
638
GCCAAACAAAAAGCTAAACTGAATA AACTAGATTCCAAGAAATCCATGGA AAAGAGAAG
PCR zur genomischen Integration des
TAP-Tags (mit pBS1479 als Matrize) NOP7
639
AGACAAAATTTTTGAGAGGCTATTG GAAAAGAAGAGAAAATACGACTCAC TATAGGG
PCR zur genomischen Integration des
TAP-Tags (mit pBS1479 als Matrize) NOP7
---
AAATCTAAAAATGGATAAACTAGGAA ACTATATACTAGAGTCCATGGAAAA GAGAAG
PCR zur genomischen Integration des
TAP-Tags (mit pBS1479 als Matrize) RIO2
---
TTGATTATTTGCGGCCATTTATGCAG TCGTCTAAACTAAATACGACTCACTA TAGGG
PCR zur genomischen Integration des
TAP-Tags (mit pBS1479 als Matrize) RIO2
646
CGAATTAAGTGATGACGAAGAGGAG GAGGAAGAAGGAGAATCCATGGAAA AGAGAAG
PCR zur genomischen Integration des
TAP-Tags (mit pBS1479 als Matrize) RIX1
647
TCTAGTCGAAATATAACCAAACAAAA TCTGGTTGATATTATACGACTCACTA TAGGG
PCR zur genomischen Integration des
TAP-Tags (mit pBS1479 als Matrize) RIX1
648
TGAGACATCAAATGGCGGAGTTGAA GAAACCATGAAAATGTCCATGGAAA AGAGAAG
PCR zur genomischen Integration des
TAP-Tags (mit pBS1479 als Matrize) ARX1
649
TATATTATTTATATACTAGCTTTAGAA ATGATGAAGTTTCTACGACTCACTAT AGGG
PCR zur genomischen Integration des
TAP-Tags (mit pBS1479 als Matrize) ARX1
---
TCCACAGGAAGCTAATGATGATTTA ATGATTGATGTCAATTCCATGGAAAA GAGAAG
PCR zur genomischen Integration des
TAP-Tags (mit pBS1479 als Matrize) ENP1
---
CCGAGCGATATAAAATTGATGAAAA ATTGATATTACAGCATACGACTCACT ATAGGG
PCR zur genomischen Integration des
TAP-Tags (mit pBS1479 als Matrize) ENP1
205 CATGGCTTAATCTTTGAGAC Radioaktiv markierte Sonde zur
Hybridisierung in 18S–Sequenz rDNA
212 CTCCGCTTATTGATATGC Radioaktiv markierte Sonde zur
Hybridisierung in 25S-Sequenz rDNA
Promotor in pGEMT (T7-Pr_5.8S-B1_f) rDNA
1883 AAATGACGCTCAAACAGGCATGCC Klonierung von rDNA–Fragmenten mit T7–
Promotor in pGEMT (5.8S-E_rev) rDNA
1884 ACCGTACTTGCATTATACCTCAAG Klonierung von rDNA-Fragmenten mit T7–
Promotor in pGEMT (7S-C2_rev) rDNA
1885 TAATACGACTCACTATAGGGGTTTG ACCTCAAATCAGGTAGGAGT
Klonierung von rDNA–Fragmenten mit T7–
Promotor in pGEMT (T7-Pr_25S-DomI_f) rDNA
1886 CCGTGTTTCAAGACGGGCGGCATA Klonierung von rDNA–Fragmenten mit T7–
Promotor in pGEMT (25S-DomI_rev) rDNA
1887 TAATACGACTCACTATAGGGACCAA GGAGTCTAACGTCTATGCGA
Klonierung von rDNA–Fragmenten mit T7–
Promotor in pGEMT (T7-Pr_25S-DomII_f) rDNA
1888 CTACTACCACCAAGATCTGCACTA Klonierung von rDNA–Fragmenten mit T7–
Promotor in pGEMT (25S-DomII_rev) rDNA
1889 TAATACGACTCACTATAGGGCAAAT ATTCAAATGAGAACTTTGAA
Klonierung von rDNA–Fragmenten mit T7–
Promotor in pGEMT (T7-Pr_25S-DomIII_f) rDNA
1890 CAACTAGAGGCTGTTCACCTTGGA Klonierung von rDNA–Fragmenten mit T7–
Promotor in pGEMT (25S-DomIII_rev) rDNA
1891 TAATACGACTCACTATAGGGATAGA ATAATGTAGATAAGGGAAGT
Klonierung von rDNA-Fragmenten mit T7–
Promotor in pGEMT (T7-Pr_25S-DomIV_f) rDNA
1892 TGCCAAGCCCGTTCCCTTGGCTGT Klonierung von rDNA–Fragmenten mit T7–
Promotor in pGEMT (25S-DomIV_rev) rDNA
1893 TAATACGACTCACTATAGGGGAATC AGCGGGGAAAGAAGACCCTG
Klonierung von rDNA–Fragmenten mit T7–
Promotor in pGEMT (T7-Pr_25S-DomV_f) rDNA
1894 ATTCATCAGTAGGGTAAAACTAAC Klonierung von rDNA–Fragmenten mit T7–
Promotor in pGEMT (25S-DomV_rev) rDNA
1895 TAATACGACTCACTATAGGGGTTAC CGCAATAGTAATTGAACTTA
Klonierung von rDNA–Fragmenten mit T7–
Promotor in pGEMT (T7-Pr_25S-DomVI_f) rDNA
1896 ACAAATCAGACAACAAAGGCTTAA Klonierung von rDNA–Fragmenten mit T7–
Promotor in pGEMT (25S-DomVI_rev) rDNA
1897 TAATACGACTCACTATAGGGTGCCT GTTTGAGCGTCATTTCCTTC
Klonierung von rDNA–Fragmenten mit T7–
Promotor in pGEMT (T7-Pr_ITS2_for) rDNA
1898 TACCTGATTTGAGGTCAAACTTTA Klonierung von rDNA–Fragmenten mit T7–
Promotor in pGEMT (ITS2_rev) rDNA
1899 TAATACGACTCACTATAGGGGCTCG TGTAGCTCAGTGGTTAGAGC
Klonierung von rDNA–Fragmenten mit T7–
Promotor in pGEMT (T7-Pr_Ile-tRNA_f) rDNA
1900 TGCTCGAGGTGGGGTTTGAACCCA Klonierung von rDNA–Fragmenten mit T7–
Promotor in pGEMT (Ile-tRNA_rev) rDNA
1952 TAATACGACTCACTATAGGGTATCT GGTTGATCCTGCCAGTAGTC
Klonierung von rDNA–Fragmenten mit T7–
Promotor in pGEMT (T7-P_18S-DomI_f) rDNA
1953 CTTTAATATACGCTATTGGAGCTG Klonierung von rDNA–Fragmenten mit T7–
Promotor in pGEMT (18S-DomI_rev) rDNA
1954 TAATACGACTCACTATAGGGTTGTT GCAGTTAAAAAGCTCGTAGT
Klonierung von rDNA–Fragmenten mit T7–
Promotor in pGEMT (T7-P_18S-DomII_f) rDNA
1955 CTTTAAGTTTCAGCCTTGCGACCA Klonierung von rDNA–Fragmenten mit T7–
Promotor in pGEMT (18S-DomII_rev) rDNA
1956 TAATACGACTCACTATAGGGGAATT GACGGAAGGGCACCACCAGG
Klonierung von rDNA–Fragmenten mit T7–
Promotor in pGEMT (T7-P_18S-Dom3_f) rDNA
1957 TAATGATCCTTCCGCAGGTTCACC Klonierung von rDNA–Fragmenten mit T7–
Promotor in pGEMT (18S-DomIII_rev) rDNA
1958 GTTGTATTGAAACGGTTTTAATTG Klonierung von rDNA–Fragmenten mit T7–
Promotor in pGEMT (18S-DomIII+A2_r) rDNA
1959 TTGTTACCTCTGGGCCCCGATTGC Klonierung von rDNA–Fragmenten mit T7–
Promotor in pGEMT (18S-DomIII+A3_r) rDNA
1960 TAATACGACTCACTATAGGGGGATC ATTAAAGAAATTTAATAATT
Klonierung von rDNA–Fragmenten mit T7–
Promotor in pGEMT (T7-Prom_ITS1_for) rDNA
1961 GCGAGAACCAAGAGATCCGTTGTT Klonierung von rDNA–Fragmenten mit T7–
Promotor in pGEMT (ITS1_rev) rDNA
1962 TAATACGACTCACTATAGGGGGTTG CGGCCATATCTACCAGAAAG
Klonierung von rDNA–Fragmenten mit T7–
Promotor in pGEMT (T7-Prom_5S_for) rDNA
1963 ATTGCAGCACCTGAGTTTCGCGTA Klonierung von rDNA–Fragmenten mit T7–
Promotor in pGEMT (5S_rev) rDNA
2152 GGCGAATTGGGCCCGACG Sequenzierung der rDNA–Fragmente in
pGEMT (pGEMT-seq-for) pGEMT
1964
TCGACGAGGGATCCGGCGCCCTGA AAATACAGGTTTTCCAGGATCTTATC GTCGTCATCCTTGTAATCCATA
Einbau des Flag-Epitops in die MCS2 der Multibac-Plasmide mittels Primer-Annealing
Einbau des Flag-Epitops in die MCS2 der Multibac-Plasmide mittels Primer-Annealing
Einbau des 6xHis-Tags in die MCS2 der Multibac-Plasmide mittels Primer-Annealing (6xHis_for)
His-Tag
1967 TCGACGAGGGATCCGTAATCGTGAT GGTGATGGTGATGCATA
Einbau des 6xHis-Tags in die MCS2 der Multibac-Plasmide mittels Primer-Annealing (6xHis_rev)
His-Tag
1968 TTTTTTGTCGACATGGGTAAAGTTTC TAAATC
Klonierung des jeweiligen ORFs in MCS2
der Multibac-Vektoren (Noc2-SalI_for) Noc2
1969 TTTTTTCTGCAGTTAAGCGTCTGACA TTTCAA
Klonierung des jeweiligen ORFs in MCS2
der Multibac-Vektoren (Noc2-PstI_for) Noc2
1970 TTTTTTGTCGACATGGCTAAGAGAAA TAGATC
Klonierung des jeweiligen ORFs in MCS2
der Multibac-Vektoren (Noc3-SalI_for) Noc3
1971 TTTTTTCTGCAGCTATTTAGAACACT CTTTAG
Klonierung des jeweiligen ORFs in MCS2
der Multibac-Vektoren (Noc3-PstI_for) Noc3
1972 TTTTTTGGATCCATGGTAGCTTCCAC CAAAAG
Klonierung des jeweiligen ORFs in MCS2
der Multibac-Vektoren (Rrp5-BamHI_for) Rrp5
1973 TTTTTTCTGCAGTTATTCGTCTGCTT TTTGAG
Klonierung des jeweiligen ORFs in MCS2
der Multibac-Vektoren (Rrp5-PstI_for) Rrp5
1974 TTTTTTGTCGACATGAGTGAGAACAA CGGCAA
Klonierung des jeweiligen ORFs in MCS2
der Multibac-Vektoren (Noc1-SalI_for) Noc1
1975 TTTTTTTCTAGATTAGTCTGAATCTT GATCTA
Klonierung des jeweiligen ORFs in MCS2
der Multibac-Vektoren (Noc1-XbaI_rev) Noc1
1978 TTTTTTGTCGACATGAAATTGGATAC TTCTCA
Klonierung des jeweiligen ORFs in MCS2
der Multibac-Vektoren (Rio2-SalI_for) Rio2
1979 TTTTTTCTGCAGCTACTCTAGTATAT AGTTTC
Klonierung des jeweiligen ORFs in MCS2
der Multibac-Vektoren (Rio2-PstI_rev) Rio2
1980 TTTTTTGTCGACATGTCGAAGAAATT TAGCTC
Klonierung des jeweiligen ORFs in MCS2
der Multibac-Vektoren (Ltv1-SalI_for) Ltv1
1981 TTTTTTCTGCAGCTAAAATTTTAAGC TGCTTA
Klonierung des jeweiligen ORFs in MCS2
der Multibac-Vektoren (Ltv1-PstI_rev) Ltv1
1982 TTTTTTGTCGACATGGCAGGTCATTC ACACAG
Klonierung des jeweiligen ORFs in MCS2
der Multibac-Vektoren (Tsr1-SalI_for) Tsr1
1983 TTTTTTCTGCAGTTACATACCATTCC AAGGTA
Klonierung des jeweiligen ORFs in MCS2
der Multibac-Vektoren (Tsr1-PstI_rev) Tsr1
1984 TTTTTTGTCGACATGGCCAGAGCAT CCTCTAC
Klonierung des jeweiligen ORFs in MCS2
der Multibac-Vektoren (Enp1-SalI_for) Enp1
1985 TTTTTTCTGCAGTCAATTGACATCAA TCATTA
Klonierung des jeweiligen ORFs in MCS2
der Multibac-Vektoren (Enp1-PstI_rev) Enp1
1986 TTTTTTGTCGACATGGACTTAAGAGT AGGAAG
Klonierung des jeweiligen ORFs in MCS2
der Multibac-Vektoren (Hrr25-SalI_for) Hrr25
1987 TTTTTTCTGCAGTTACAACCAAATTG ACTGGC
Klonierung des jeweiligen ORFs in MCS2
der Multibac-Vektoren (Hrr25-PstI_rev) Hrr25
1988 TTTTTTGTCGACATGGGAAAGGCTG CGAAAAA
Klonierung des jeweiligen ORFs in MCS2
der Multibac-Vektoren (Dim1-SalI_for) Dim1
1989 TTTTTTCTGCAGTCATGAAAAATGGA TACCAA
Klonierung des jeweiligen ORFs in MCS2
der Multibac-Vektoren (Dim1-PstI_rev) Dim1
1990 TTTTTTGTCGACATGGTGTCTACACA TAACAG
Klonierung des jeweiligen ORFs in MCS2
der Multibac-Vektoren (Krr1-SalI_for) Krr1
1991 TTTTTTCTGCAGCTAATTTTGGTTTG GCTTGT
Klonierung des jeweiligen ORFs in MCS2
der Multibac-Vektoren (Krr1-PstI_rev) Krr1
2153 ACCTATAAATATTCCGGA For–Sequenzierung der MCS2 von Multibac–
Vektoren (MultibacMCS2-seq)
MCS2 (Multib ac)
2154 CTCTACAAATGTGGTATG Rev–Sequenzierung der MCS2 von Multibac–Vektoren (Bac_SV40-rev_seq)
4x Proteinprobenpuffer (SDS-PAGE) 0,25 M Tris/HCl pH 6,8 40 % Glycerin