% Inhibition durch (CyA 333 ng/ml)
4.12. NK-Zellen dominieren bei der Xenoreaktion
Auf Grund hyperakuter und akut humoraler Abstoßung von Xenotransplantaten, die zur Zeit noch die größte Hürde einer Xenotransplantation darstellen, ist die akute zelluläre Abstoßung nur wenig beleuchtet worden. Dies ist jedoch wichtig, da es relevant ist, welche Immunzellen bei einer Xenotransplantation gehemmt werden müssen.
Anhand eines für eine Alloreaktion von PBMC in vitro etablierten Assays galt es zu klären, ob xenoreaktive humane PBMC sich mittels durchflußzytometrischer Analyse nachweisen lassen und welche Zellen vornehmlich daran beteiligt sind. Dazu wurden zwei Modelle untersucht. Zum einen wurde eine direkte Xenoreaktion simuliert, indem humane und intakte Schweine PBMC vermischt wurden. Zum anderen eine indirekte Xenoreaktion durch Aktivierung humaner PBMC mittels Zelllysat von Schweine-PBMC durchgeführt.
Mit der hier vorgestellten Xenoreaktion in vitro und der anschließenden FACS-Analyse konnte gezeigt werden, dass sich xenoreaktive Zellen durchflußzytometrisch nachweisen lassen und dass CD8- und NK-Zellen auf der zellulären Ebene eine bedeutende Rolle spielen.
Die Aktivierung der humanen NK-Zellen findet bereits in den ersten Stunden nach Exposition mit sowohl intakten porcinen PBMC als auch mit Zellysat statt.
In vivo wird eine Aktivierung der NK-Zellen unter anderem durch Bindung xenoreaktiver Antikörper an den FCγR III hervorgerufen (YIN et al., 2004). Dies kann hier jedoch nicht der Fall sein, da Antikörper bei der Isolierung der PBMC weitestgehend entfernt werden. Die Aktivierung der NK-Zellen findet folglich auf rein zellulärer Ebene statt. Des Weiteren besitzen Zellen von Schweinen keine HLA-Moleküle, sondern sogenannte Schweine-Leukozytenantigen-Moleküle (SLA) an der Zelloberfläche. Man konnte nachweisen, dass bestimmte Untergruppen der HLA-Moleküle NK-Zellen supprimieren bzw. dafür verantwortlich sind, dass sie nicht aktiviert werden. So konnte an aortalen Epithelzellen von Schweinen, die mit DNA für HLA-E und HLA-G transfiziert wurden, eine Aktivierung der NK-Zellen verhindert werden (SASAKI et al., 1999). Sind diese Oberflächensignale nicht vorhanden, werden Zellen aktiviert. Folglich werden Zellen von Schweinen durch NK-Zellen attackiert und lysiert. Unter anderem werden auf diese Weise auch entdifferenzierte Tumorzellen, die kein HLA exprimieren, ebenfalls bekämpft.
In der Literatur wird die Rolle der NK-Zellen kontrovers beschrieben (SCHUURMAN et al., 2003), (ELSEN et al., 1993). Zumindest scheinen NK-Zellen im Blut zum Zeitpunkt der hyperakuten Xenotransplantat-Abstoßung eine Rolle zu spielen (ELSEN et al., 1993). Hierbei werden die NK-Zellen nicht nur durch xenoreaktive Antikörper aktiviert, sondern, wie wir zeigen konnten, auch durch direkten zellulären Kontakt. In der akuten zellulären Xenotransplantat-Abstoßung, die bereits viel später stattfindet, befinden sich die NK-Zellen bereits im Parenchym. NK-Zellen sind also an beiden Abstoßungsreaktionen beteiligt.
Im in vitro Ansatz konnten wir zeigen, dass CD4 und CD8 T Zellen im Rahmen der hyperakuten Abstoßung eher eine untergeordnete Stellung einzunehmen scheinen. Die Frequenzen einer präformierten CD4 und CD8 Xenoreaktivität scheint jedoch vom Konsum von Schweinefleisch abzuhängen. Interessanterweise stellte eine Arbeitsgruppe fest, dass Menschen, die mit Schweineantigenen noch keinen Kontakt hatten (Neugeborene und Menschen, die auf Grund religiöser/kultureller Hintergründe kein Schweinefleisch konsumieren), eine geringere Rate an xenoreaktiven T-Gedächtniszellen hatten, als solche, die Schweinefleisch verzehrten (HARTIG et al., 2000). Im Rahmen der Xenotransplantationmüssen also Strategien entwickelt werden, die außer NK-Zellen auch die bestehenden xenoreaktiven T Zellen inhibieren. Sicherlich werden dabei bereits verwendete Immunsuppressiva zu Einsatz kommen.
Des Weiteren konnte festgestellt werden, dass sich die Stärke der Reaktivität erwartungsgemäß individuell unterschied (Daten nicht gezeigt). Interessanterweise zeigte sich eine gute Korrelation hinsichtlich des Ausmaß der Aktivierung der NK-Zellen und den
einzelnen Schweinen. So gab es Schweine auf die mit einer geringen NK-Zellaktivierung reagiert wurde und Schweine, die eine hohe Aktivierung von NK-Zellen zur Folge hatten. Es scheint also Schweine zu geben, auf deren Zellen humane PBMC bzw. NK-Zellen stärker reagieren. Am ehesten sind bestimmte xenogene Epitope oder SLA-Moleküle dafür verantwortlich. Dies herauszufinden wäre für die Herstellung transgener Schweine wichtig.
4.13. Ausblicke
Die Entwicklung der Transplantationsmedizin unterliegt einem steten Wandel. Es werden ständig neue Möglichkeiten der Immunsuppression gefunden. Da jedoch jedes Individuum eine genetische Variabilität besitzt, ist ein individuell angepasster Einsatz von Immunsuppressiva bedeutsam und wichtig für die Verbesserung der Langzeitprognose transplantierter Patienten.
Es konnte ein Assay vorgestellt werden, der die individuelle Empfindlichkeit auf Immunsuppressiva schnell, zuverlässig und im klinisch relevanten Spiegelbereich misst. Auch die Kombination von immunsuppressiven Medikamenten ließ sich quantifizieren.
Zusammenfassend sind die hier vorgestellten Ergebnisse vielversprechend und werden bei der individuellen Dosisanpassung von Immunsuppressiva hilfreich sein.
Sicherlich wird die Xenotransplantation mittelfristig nur schwer möglich sein. Es gibt zum Beispiel Ansätze mit transgenen Schweinen, bei denen die Expression der Galaktosylepitopen unterdrückt werden konnte. Des Weiteren sind Versuche die Komplementregulation über transgene Expression humaner Komplementregulationsproteinen auf Endothelzellen des Schweins zu beeinflussen recht vielversprechend. Dass natürliche Killerzellen maßgeblich an der xenoreaktiven Abstoßung beteiligt sind, konnte in dieser Arbeit mit Hilfe einer gemischten Lymphozytenkultur durchflusszytometrisch nachgewiesen werden. Die gemischten Lymphozytenkultur bestand aus humanen und porcinen PBMC. Sollte in der Zukunft eine Xenotransplantation gelingen, kann dieser Assay bei der individuellen Bestimmung der Xenoreaktivität der NK-Zellen vor Transplantation hilfreich sein.
5. Literaturverzeichnis
1. Ahmed M, Venkataraman R (2001) Quantitation of Immunosuppression by Tacrolimus Using Flow Cytometric Analysis of Interleukin-2 and Interferon-g
Inhibition in CD8- and CD8+ Peripheral Blood T Cells. Ther Drug Monit 23:354-362 2. Almawi WY (2001) Molecular Mechanisms of Glucocorticoid Effects. Modern
Aspects of Immunobiology 2:78-82
3. Almawi WY, Melemedjian OK (2000) Clinical and mechanistic differences between FK506 (tacrolimus) and cyclosporin A. Nephrol Dial Transplant 15:1916-1918.
4. Andersson J, Nagy S, Groth CG, Andersson U (1992) FK 506 and cyclosporine inhibit antigen- or mitogen-induced monokine and lymphokine production in vitro.
Transplant Proc 24:321-325
5. Batiuk TD, Pazderka F, Halloran PF (1995) Calcineurin activity is only partially inhibited in leukocytes of cyclosporine-treated patients. Transplantation 59:1400-1404 6. Beysens AJ, Wijnen RM, Beuman GH, van der Heyden J, Kootstra G, van As H
(1991) FK 506: monitoring in plasma or in whole blood? Transplant Proc 23:2745-2747
7. Borel JF, Feurer C, Magnee C, Stahelin H (1977) Effects of the new anti-lymphocytic peptide cyclosporin A in animals. Immunology 32:1017-1025
8. Brehm MA, Markees TG, Daniels KA, Greiner DL, Rossini AA, Welsh RM (2003) Direct visualization of cross-reactive effector and memory allo-specific CD8 T cells generated in response to viral infections. J Immunol 170:4077-4086
9. Bucher P, Morel P, Buhler LH (2005) Xenotransplantation: an update on recent progress and future perspectives. Transpl Int 18:894-901
10. Burke JF, Jr., Pirsch JD, Ramos EL, Salomon DR, Stablein DM, Van Buren DH, West JC (1994) Long-term efficacy and safety of cyclosporine in renal-transplant recipients.
N Engl J Med 331:358-363
11. Christiaans M, van Duijnhoven E, Beysens T, Undre N, Schafer A, van Hooff J (1998) Effect of breakfast on the oral bioavailability of tacrolimus and changes in
pharmacokinetics at different times posttransplant in renal transplant recipients.
Transplant Proc 30:1271-1273
12. Crabtree GR (1999) Generic signals and specific outcomes: signaling through Ca2+, calcineurin, and NF-AT. Cell 96:611-614
13. Dambrin C, Klupp J, Morris RE (2000) Pharmacodynamics of immunosuppressive drugs. Curr Opin Immunol 12:557-562.
14. De Bosscher K, Vanden Berghe W, Haegeman G (2003) The interplay between the glucocorticoid receptor and nuclear factor-kappaB or activator protein-1: molecular mechanisms for gene repression. Endocr Rev 24:488-522
15. Deschamps JY, Roux FA, Sai P, Gouin E (2005) History of xenotransplantation.
Xenotransplantation 12:91-109
16. Dinter A, Berger EG (1998) Golgi-disturbing agents. Histochem Cell Biol 109:571-590
17. Einecke G, Mai I, Fritsche L, Slowinski T, Waiser J, Neumayer HH, Budde K (2004) The value of C2 monitoring in stable renal allograft recipients on maintenance immunosuppression. Nephrol Dial Transplant 19:215-222
18. Elsen M, Soares M, Latinne D, Cornet A, Bazin H (1993) Role of activated natural killer and CD4+, CD8+ cells in the cellular rejection of a discordant xenograft.
Transplant Proc 25:447-449
19. Flanagan WM, Corthesy B, Bram RJ, Crabtree GR (1991) Nuclear association of a T-cell transcription factor blocked by FK-506 and cyclosporin A. Nature 352:803-807 20. Fleischer B, Gerardy-Schahn R, Metzroth B, Carrel S, Gerlach D, Kohler W (1991)
An evolutionary conserved mechanism of T cell activation by microbial toxins.
Evidence for different affinities of T cell receptor-toxin interaction. J Immunol 146:11-17
21. Fleischer B, Schrezenmeier H (1988) T cell stimulation by staphylococcal
enterotoxins. Clonally variable response and requirement for major histocompatibility complex class II molecules on accessory or target cells. J Exp Med 167:1697-1707 22. Gorantla VS, Barker JH, Jones JW, Jr., Prabhune K, Maldonado C, Granger DK
(2000) Immunosuppressive agents in transplantation: mechanisms of action and current anti-rejection strategies. Microsurgery 20:420-429
23. Goto T, Kino T, Hatanaka H, Nishiyama M, Okuhara M, Kohsaka M, Aoki H, Imanaka H (1987) Discovery of FK-506, a novel immunosuppressant isolated from Streptomyces tsukubaensis. Transplant Proc 19:4-8.
24. Group TUSMFLS (1994) A comparison of tacrolimus (FK 506) and cyclosporine for immunosuppression in liver transplantation. N Engl J Med 331:1110-1115.
25. Gummert JF, Ikonen T, Morris RE (1999) Newer immunosuppressive drugs: a review.
J Am Soc Nephrol 10:1366-1380.
26. Halloran PF (2001) Mechanism of action of the calcineurin inhibitors. Transplant Proc 33:3067-3069
27. Halloran PF (2004) Immunosuppressive drugs for kidney transplantation. N Engl J Med 351:2715-2729
28. Halloran PF, Melk A Immunosuppressive Agents used in Transplantation. In I.
29. Harlan DM, Kirk AD (1999) The future of organ and tissue transplantation: can T-cell costimulatory pathway modifiers revolutionize the prevention of graft rejection?
JAMA 282:1076-1082.
30. Hartig CV, Haller GW, Sachs DH, Kuhlenschmidt S, Heeger PS (2000) Naturally developing memory T cell xenoreactivity to swine antigens in human peripheral blood lymphocytes. J Immunol 164:2790-2796
31. Heeger PS (2003) T-cell allorecognition and transplant rejection: a summary and update. Am J Transplant 3:525-533
32. Henry ML (1999) Cyclosporine and tacrolimus (FK506): a comparison of efficacy and safety profiles. Clin Transplant 13:209-220.
33. Janeway C, Travers P (1999) Immunobiology -
The Immun System in Health and Disease, fourth edition edn, Heidelberg Berlin Oxford, Spektrum akademischer Verlag).
34. Johnson RJ, Freehally J (2000) Comprehensive Clinical Nephrology, First edn, Mosby).
35. Johson R, J., Feehally J (2000) Comprehensive Clinical Nephrology, 1 edn, Elsevier).
36. Kaufman DB, Shapiro R, Lucey MR, Cherikh WS, R TB, Dyke DB (2004) Immunosuppression: practice and trends. Am J Transplant 4 Suppl 9:38-53 37. Kiani A, Rao A, Aramburu J (2000) Manipulating immune responses with
immunosuppressive agents that target NFAT. Immunity 12:359-372
38. Klein J, Sato A (2000) The HLA system. First of two parts. N Engl J Med 343:702-709.
39. Kuinose M, Iwagaki H, Morimoto Y, Kohka H, Kobashi K, Sadamori H, Inagaki M, Urushihara N, Yagi T, Tanaka N (2000) Calcineurin antagonists inhibit interferon-gamma production by downregulation of interleukin-18 in human mixed lymphocyte reactions. Acta Med Okayama 54:201-209
40. Lemaire M, Tillement JP (1982) Role of lipoproteins and erythrocytes in the in vitro binding and distribution of cyclosporin A in the blood. J Pharm Pharmacol 34:715-718 41. Machida M, Takahara S, Ishibashi M, Hayashi M, Sekihara T, Yamanaka H (1991)
Effect of temperature and hematocrit on plasma concentration of FK 506. Transplant Proc 23:2753-2754
42. Marrack P, Kappler J (1990) The staphylococcal enterotoxins and their relatives.
Science 248:1066
43. Martinez-Valdez H, Madrid-Marina V, Cohen A (2002) Phorbol esters and cAMP differentially regulate the expression of CD4 and CD8 in human thymocytes. BMC Immunol 3:1
44. Medzhitov R, Janeway C, Jr. (2000) Innate immunity. N Engl J Med 343:338-344.
45. Mehta BA, Maino VC (1997) Simultaneous detection of DNA synthesis and cytokine production in staphylococcal enterotoxin B activated CD4+ T lymphocytes by flow cytometry. J Immunol Methods 208:49-59
46. Nashan B, Cole E, Levy G, Thervet E (2002) Clinical validation studies of Neoral C(2) monitoring: a review. Transplantation 73:S3-11
47. Neye H (2000) [Immunophilins: having immunosuppressive activity and physiological function]. Pharm Unserer Zeit 29:297-302
48. Parkin J, Cohen B (2001) An overview of the immune system. Lancet 357:1777-1789.
49. Pfitzmann R., Neuhaus P, Hetzer R (2001) Organtransplantation, first edition edn, de Gruyter Berlin; New York).
50. Picker LJ, Singh MK, Zdraveski Z, Treer JR, Waldrop SL, Bergstresser PR, Maino VC (1995) Direct demonstration of cytokine synthesis heterogeneity among human memory/effector T cells by flow cytometry. Blood 86:1408-1419
51. Refojo D, Liberman AC, Holsboer F, Arzt E (2001) Transcription factor-mediated molecular mechanisms involved in the functional cross-talk between cytokines and glucocorticoids. Immunol Cell Biol 79:385-394.
52. Richie ER, McEntire B, Phillips J, Allison JP (1988) Altered expression of lymphocyte differentiation antigens on phorbol ester-activated CD4+8+ T cells. J Immunol 140:4115-4122
53. Rummel F, Henschler, Starke (1993) Allgemeine und spezielle Pharmakologie und Toxikologie, 6th edn, B.I. Wissenschaftsverlag).
54. Ruzicka T, Assmann T, Homey B (1999) Tacrolimus: the drug for the turn of the millennium? Arch Dermatol 135:574-580.
55. Sasaki H, Xu XC, Mohanakumar T (1999) HLA-E and HLA-G expression on porcine endothelial cells inhibit xenoreactive human NK cells through
CD94/NKG2-dependent and -inCD94/NKG2-dependent pathways. J Immunol 163:6301-6305
56. Sayegh MH (1999) Why do we reject a graft? Role of indirect allorecognition in graft rejection. Kidney Int 56:1967 - 1979
57. Sayegh MH, Turka LA (1998) The role of T-cell costimulatory activation pathways in transplant rejection. N Engl J Med 338:1813-1821
58. Schmidt T (1997) Physiologie des Menschen, 27th edn, Springer Verlag).
59. Schuurman HJ, Cheng J, Lam T (2003) Pathology of xenograft rejection: a commentary. Xenotransplantation 10:293-299
60. Sester M, Sester U, Alarcon Salvador S, Heine G, Lipfert S, Girndt M, Gartner B, Kohler H (2002a) Age-related decrease in adenovirus-specific T cell responses. J Infect Dis 185:1379-1387
61. Sester M, Sester U, Gartner B, Heine G, Girndt M, Mueller-Lantzsch N, Meyerhans A, Kohler H (2001) Levels of virus-specific CD4 T cells correlate with
cytomegalovirus control and predict virus-induced disease after renal transplantation.
Transplantation 71:1287-1294
62. Sester M, Sester U, Gartner B, Kubuschok B, Girndt M, Meyerhans A, Kohler H (2002b) Sustained high frequencies of specific CD4 T cells restricted to a single persistent virus. J Virol 76:3748-3755
63. Sester U, Gartner BC, Wilkens H, Schwaab B, Wossner R, Kindermann I, Girndt M, Meyerhans A, Mueller-Lantzsch N, Schafers HJ, Sybrecht GW, Kohler H, Sester M (2005) Differences in CMV-specific T-cell levels and long-term susceptibility to CMV infection after kidney, heart and lung transplantation. Am J Transplant 5:1483-1489
64. Sester U, Thijssen S, van Bentum K, Neumann F, Kubuschok B, Sester M, Kohler H (2004) Rapid identification of preformed alloreactive T cells for use in a clinical setting. Transplantation 78:607-614
65. Shaw KT, Ho AM, Raghavan A, Kim J, Jain J, Park J, Sharma S, Rao A, Hogan PG (1995) Immunosuppressive drugs prevent a rapid dephosphorylation of transcription factor NFAT1 in stimulated immune cells. Proc Natl Acad Sci U S A 92:11205-11209 66. Sojka DK, Bruniquel D, Schwartz RH, Singh NJ (2004) IL-2 secretion by CD4+ T
cells in vivo is rapid, transient, and influenced by TCR-specific competition. J Immunol 172:6136-6143
67. Stalder M, Birsan T, Holm B, Haririfar M, Scandling J, Morris RE (2003)
Quantification of immunosuppression by flow cytometry in stable renal transplant recipients. Ther Drug Monit 25:22-27
68. Starzl TE, Klintmalm GB, Weil R, 3rd, Porter KA, Iwatsuki S, Schroter GP,
Fernandez-Bueno C, MacHugh N (1981) Cyclosporin A and steroid therapy in sixty-six cadaver kidney recipients. Surg Gynecol Obstet 153:486-494.
69. Suni MA, Picker LJ, Maino VC (1998) Detection of antigen-specific T cell cytokine expression in whole blood by flow cytometry. J Immunol Methods 212:89-98 70. Taupin JP, Merville P, McBride T, Potaux L, Moreau JF (2001) Functional
quantification of cyclosporine A and FK506 in human whole blood by flow cytometry, using the green fluorescent protein as an interleukin-2 reporter gene. J Immunol
Methods 256:77-87
71. Thijssen S (2006) Durchflußzytometrische Analyse der T-zellulären
Zytokinproduktion zur Quantifizierung der Wirkstärke von Calcineurin-Inhibitoren und zur identifikation präformierter Alloreaktivität. Innere Med IV Klinik für Nieren- und Hochdruckkrankheiten, Universitätsklinikum des Saarlandes, Homburg/Saar 72. van den Berg AP, Twilhaar WN, van Son WJ, van der Bij W, Klompmaker IJ, Slooff
MJ, The TH, de Leij LH (1998) Quantification of immunosuppression by flow cytometric measurement of intracellular cytokine synthesis. Transpl Int 11 Suppl 1:S318-321
73. Waldrop SL, Davis KA, Maino VC, Picker LJ (1998) Normal human CD4+ memory T cells display broad heterogeneity in their activation threshold for cytokine synthesis.
J Immunol 161:5284-5295
74. Yin D, Zeng H, Ma L, Shen J, Xu H, Byrne GW, Chong AS (2004) Cutting Edge: NK cells mediate IgG1-dependent hyperacute rejection of xenografts. J Immunol
172:7235-7238
75. Zimmermann C, Prevost-Blondel A, Blaser C, Pircher H (1999) Kinetics of the response of naive and memory CD8 T cells to antigen: similarities and differences.
Eur J Immunol 29:284-290
6. Dank
An dieser Stelle möchte ich mich bei Herrn Prof. Dr. med. H. Köhler für das interessante und vielseitige Thema sowie die Möglichkeit diese Arbeit im Labor der Nephrologie durchführen zu dürfen bedanken. Ebenso gab er mir die Möglichkeit Ergebnisse dieser Arbeit auf verschiedenen Fachkongressen zu präsentieren. Des Weiteren gilt mein Dank Urban Sester für die exzellente Betreuung und Motivation sowie die stetige Bereitschaft zu Fragen und Diskussionen. Mein Dank ist auch an seine liebe Frau Martina Sester gerichtet, die mir vieles anschaulich und ausführlich erklärt hat sowie sich für die Korrektur viel Zeit genommen und mich bei der Fertigstellung tatkräftig unterstützt hat.
Für die Einarbeitung im Labor und die Einführung am FACS-Gerät sowie die gute und hilfreiche Unterstützung während der Arbeit bedanke ich mich sehr bei Candida Guckelmus.
Des Weiteren möchte ich mich bei Norbert Zuschlag aus dem immunologischen Labor der Inneren Medizin I für die Tips und Tricks am FACS-Gerät bedanken sowie bei allen Mitarbeitern des nephrologischen Labors für die nette Aufnahme und die unterstützende Zusammenarbeit sowie die zahlreichen Blutspenden.
Außerdem möchte ich mich bei den Schülern der MTA-Schule vom Jahr 2000 für die bereitwilligen Blutspenden bedanken.
Mein Dank gilt auch meinem Vater sowie meinen Schwiegereltern für das intensive und kritische Korrekturlesen. Des Weiteren bedanke ich mich bei Bianca Hettlich für die Korrektur der englischen Zusammenfassung.
Zum Schluß, jedoch nicht als letztes, möchte ich mich bei meiner lieben Frau Gritta für Ihre Geduld und Unterstützung herzlich bedanken. Sie hat sich für Diskussionen immer Zeit genommen und mit Ihrer konstruktiven Kritik zum Gelingen dieser Arbeit beigetragen.
7. Lebenslauf
Kai Wilhelm van Bentum
geboren am 16. Juli 1973 in Kranenburg Familienstand: Verheiratet, 3 Kinder Konfession: Römisch-katholisch Schulischer Werdegang
1980 – 1984 Luther-Schule in Kleve am Niederrhein
1984 – 1993 Besuch des Johanna-Sebus Gymnasium in Kleve mit Abschluss der allgemeinen Hochschulreife
1993 – 1994 Zivildienst beim Deutschen Roten Kreuz (Sozialstation, Rettungshelfer, Behindertenfahrdienst)
Beruflicher Werdegang
1994 – 1997 Ausbildung zum Elektromechaniker (Deutsche Post AG in Düsseldorf)
Juni 1997 Gesellenprüfung
Juli – Okt. 1997 Geselle bei der Firma Fleuren
Okt. 1997 Beginn des Studiums der Humanmedizin an der Universität des Saarlandes Homburg
März 1998 Krankenpflegepraktikum auf einer neurologischen Station des Universitätsklinikums des Saarlandes
Aug. 1998 Krankenpflegepraktikum auf der Herz-Thorax-Intensivstation des Universitätsklinikums des Saarlandes
Aug. 1999 Ärztliche Vorprüfung
Feb. 2000 Beginn der experimentellen Doktorarbeit in der Medizinischen Klinik, Abteilung für Nephrologie an der Universität des Saarlandes bei Prof. Dr. Hans Köhler
März 2001 Erster Abschnitt der ärztlichen Prüfung
Juli / Aug. 2001 Famulatur in der Unfallchirurgie der Universität des Saarlandes in Homburg
Aug. / Sep. 2001 Famulatur in der Neurologie der Universität des Saarlandes in Homburg
Sept. / Okt. 2001 Famulatur bei einem niedergelassenen Facharzt für Innere und Nephrologie in einer Dialyse Praxis in Kleve am Niederrhein.
März 2002 Famulatur in der Anästhesie des St. Johannis Krankenhauses in Landstuhl
Aug. / Sep. 2002 Zweiter Abschnitt der ärztlichen Prüfung Okt. 2002 – Okt. 2003 Praktisches Jahr
1. Tertial (Wahlfach) Neurologische Klinik des Universitätsklinikums des Saarlandes 2. Tertial (Chirurgie) Ennis General Hospital im County Clare, Irland.
3. Tertial (Innere) Kliniken für Innere Medizin I und IV des Universitätsklinikums des Saarlandes
Okt. 2003 Dritter Abschnitt der Ärztlichen Prüfung
Jan. – Sep. 2004 AiP in der Klinik für Innere Medizin IV des Universitätsklinikums des Saarlandes
Seit Okt. 2004 Arzt in Weiterbildung in der Klinik für Innere Medizin IV der Universitätsklinikums des Saarlandes
Zusätzliche Informationen
1998 – 2000 Sitzwache auf der Herz-Thorax-Intensivstation des Universitäts-klinikums des Saarlandes.
Juli 2000 – Dez. 2004 Perfusionist bei der Deutschen Stiftung Organtransplantation (DSO).
Jan. 2001 – Juli 2001 Studienkoordinator in einer FDA-Studie über die Wirkung von Etanercept bei Herzinsuffizienz (Wyeth Pharma GmbH).