ICS 07.100.30
Deutsche Fassung
Mikrobiologie der Lebensmittelkette - Horizontales Verfahren zum Nachweis, zur Zählung und zur Serotypisierung von Salmonellen - Teil 3: Leitfaden für die Serotypisierung von
Salmonella spp. (ISO/TR 6579-3:2014)
Microbiology of the food chain - Horizontal method for the detection, enumeration and serotyping of Salmonella - Part
3: Guidelines for serotyping of Salmonella spp. (ISO/TR 6579-3:2014)
Microbiologie de la chaîne alimentaire - Méthode horizontale pour la recherche, le dénombrement et la sérotypie des Salmonella - Partie 3: Lignes directrices pour
la sérotypie des Salmonella spp. (ISO/TR 6579-3:2014)
Dieser Technische Bericht wurde vom CEN am 28. Oktober 2013 angenommen. Er wurde vom Technischen Komitee CEN/TC 275 erstellt.
CEN-Mitglieder sind die nationalen Normungsinstitute von Belgien, Bulgarien, Dänemark, Deutschland, der ehemaligen jugoslawischen Republik Mazedonien, Estland, Finnland, Frankreich, Griechenland, Irland, Island, Italien, Kroatien, Lettland, Litauen, Luxemburg, Malta, den Niederlanden, Norwegen, Österreich, Polen, Portugal, Rumänien, Schweden, der Schweiz, der Slowakei, Slowenien, Spanien, der Tschechischen Republik, der Türkei, Ungarn, dem Vereinigten Königreich und Zypern.
E U R O P Ä I S C H E S K O M I T E E F Ü R N O R M U N G EUROPEAN COMMITTEE FOR STANDARDIZATION C O M I T É E U R O P É E N D E N O R M A L I S A T I O N
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© 2014 CEN Alle Rechte der Verwertung, gleich in welcher Form und in welchem Verfahren, sind weltweit den nationalen Mitgliedern von CEN vorbehalten.
Ref. Nr. CEN ISO/TR 6579-3:2014 D
CEN ISO /TR 6579 -3 :2014 - Pr ev ie w o nl y C op y vi a ILN A S e- Sh op
Inhalt
Seite
Vorwort ...3
Einleitung ...4
1 Anwendungsbereich ...5
2 Normative Verweisungen ...5
3 Begriffe ...5
4 Kurzbeschreibung ...5
5 Nährmedien und Seren ...6
6 Geräte ...6
7 Probe ...6
8 Taxonomie von Salmonellen ...7
9 Verfahren zur Salmonella-Serotypisierung ... 12
10 Qualitätskontrolle ... 16
11 Untersuchungsbericht ... 17
Anhang A (informativ) Zusammensetzung und Herstellung von Nährmedien und Reagenzien... 18
Anhang B (informativ) Beispiele für Verfahren zur Serotypisierung eines unbekannten Salmonella-Isolats ... 25
Anhang C (informativ) Biochemische Tests ... 29
Anhang D (informativ) Schematischer Überblick zur Serotypisierung von fünf humanmedizinisch bedeutsamen Salmonella-Serovaren ... 31
Anhang E (informativ) Mikrotiterplatten-Verfahren für die Serotypisierung von Salmonella spp. ... 32
Anhang F (informativ) Beispiele zu Verfahren für die Phaseninversion ... 34
Literaturhinweise ... 37
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Vorwort
Dieses Dokument (CEN ISO/TR 6579-3:2014) wurde vom Technischen Komitee ISO/TC 34 „Food products“
in Zusammenarbeit mit dem Technischen Komitee CEN/TC 275 „Lebensmittelanalytik — Horizontale Verfahren“ erarbeitet, dessen Sekretariat vom DIN gehalten wird.
Es wird auf die Möglichkeit hingewiesen, dass einige Elemente dieses Dokuments Patentrechte berühren können, ohne dass diese vorstehend identifiziert wurden. CEN [und/oder] CENELEC sind nicht dafür verantwortlich, einige oder alle diesbezüglichen Patentrechte zu identifizieren.
Anerkennungsnotiz
Der Text von ISO/TR 6579-3:2014 wurde vom CEN als CEN ISO/TR 6579-3:2014 ohne irgendeine Abänderung genehmigt.
CEN ISO /TR 6579 -3 :2014 - Pr ev ie w o nl y C op y vi a ILN A S e- Sh op
Einleitung
Der vorliegende Teil von ISO 6579 enthält Angaben zur Taxonomie von Salmonella spp. und einen Leitfaden zur Serotypisierung von Salmonella-Serovaren auf der Grundlage des White-Kauffmann-Le Minor-Schemas (siehe Literaturhinweis [9]).
WARNUNG — Um die Gesundheit des Laborpersonals sicherzustellen, ist es wichtig, dass Tests zum Nachweis und zur Typisierung von Salmonellen nur in entsprechend ausgestatteten Laboratorien unter Aufsicht eines erfahrenen Mikrobiologen vorgenommen werden und dass das gesamte bebrütete Material mit größter Sorgfalt unschädlich beseitigt wird.
WICHTIG — Personen, die dieses Dokument anwenden, sollten mit der üblichen Laborpraxis vertraut sein. Dieses Dokument behandelt nicht alle mit der Anwendung des Dokuments verbundenen Sicherheitsaspekte, sofern vorhanden. Es liegt in der Verantwortung des Anwenders, die angemessenen Maßnahmen zur Sicherheit und zum Gesundheitsschutz zu treffen und die Einhaltung jeglicher gesetzlicher Bestimmungen sicherzustellen.
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aus der sie isoliert werden.2 Normative Verweisungen
Die folgenden Dokumente, die in diesem Dokument teilweise oder als Ganzes zitiert werden, sind für die Anwendung dieses Dokuments erforderlich. Bei datierten Verweisungen gilt nur die in Bezug genommene Ausgabe. Bei undatierten Verweisungen gilt die letzte Ausgabe des in Bezug genommenen Dokuments (einschließlich aller Änderungen).
ISO 6579-1, Microbiology of the food chain — Horizontal method for the detection, enumeration and serotyping of Salmonella — Part 1: Horizontal method for the detection of Salmonella spp.
ISO 7218, Microbiology of food and animal feeding stuffs — General requirements and guidance for microbiological examinations
ISO 11133, Microbiology of food, animal feed and water — Preparation, production, storage and performance testing of culture media
3 Begriffe
Für die Anwendung dieses Dokuments gelten die folgenden Begriffe.
3.1 Salmonella
gramnegative, oxidase-negative, fakultativ anaerobe, nicht sporenbildende, stäbchenförmige Bakterien, die auf festen Selektivmedien im Allgemeinen Kolonien mit einem Durchmesser von 2 mm bis 4 mm bilden und bei der Untersuchung nach dem in diesem Teil von ISO 6579 festgelegten Verfahren die beschriebenen biochemischen und serologischen Eigenschaften besitzen
3.2 Serotypisierung von Salmonellen
Feststellung der Anwesenheit oder Abwesenheit von spezifischen O-Antigenen, H-Antigenen und Vi-Anti- genen in einem als Salmonellen (3.1) bestätigten Isolat
3.3 Antigenformel
Kombination von Zahlen und Buchstaben, die die O-, H- und Vi-Antigene eines als Salmonellen (3.1) bestätigten Isolats wiedergeben
4 Kurzbeschreibung
Zur Serotypisierung von Salmonella spp. werden folgende Antigene für biochemisch als Salmonella spp.
bestätigte Isolate bestimmt:
O-Antigene, H-Antigene und Vi-Antigene.
ANMERKUNG Um zu bestätigen, dass es sich beim Isolat um Salmonella spp. handelt, können alternative Verfahrens- weisen angewendet werden, vorausgesetzt, die Eignung der alternativen Verfahren ist verifiziert (siehe ISO 7218).
CEN ISO /TR 6579 -3 :2014 - Pr ev ie w o nl y C op y vi a ILN A S e- Sh op
5 Nährmedien und Seren 5.1 Allgemeines
Zur derzeit üblichen Laborpraxis siehe ISO 7218.
Für die Leistungsprüfung der Medien ist den Empfehlungen von ISO 11133 zu folgen.
5.2 Nährmedien und Reagenzien
Siehe Anhang A.5.3 Antiseren
O-Antiseren, H-Antiseren und Vi-Antiseren sind im Handel über verschiedene Lieferanten beziehbar.
Informationen über relevante polyvalente Antiseren und monovalente Antiseren sind in Anhang B enthalten.
6 Geräte
Einwegartikel stellen eine annehmbare Alternative zu wiederverwendbaren Glasgeräten dar, wenn ihre Spezifikationen ähnlich sind.
Übliche Ausstattung eines mikrobiologischen Laboratoriums und insbesondere Folgendes:
6.1 Brutschrank für Salmonella-Isolate mit einem Betriebsbereich von 34 °C bis 38 °C.
ANMERKUNG In diesem Teil von ISO 6579 stellt die Bebrütungstemperatur keinen Unterscheidungsparameter dar. Die Isolate werden kultiviert, um ausreichend Material für die Durchführungen der Tests an einer Reinkultur zu erhalten. Aus diesem Grund wird der Kultivierungsschritt bei einer optimalen Wachstumstemperatur durchgeführt. Bei Salmonellen ist dies im Allgemeinen eine Temperatur zwischen 34 °C und 38 °C.
6.2 Wärmeschrank (für die Trockensterilisation) oder Autoklav (für die Dampfsterilisation). Siehe ISO 7218.
6.3 Kühlschrank (zur Aufbewahrung der hergestellten Medien), der bei (5 ± 3) °C betrieben werden kann.
6.4 Objektträger.
6.5 Sterile Beimpfungsgeräte, z. B. Nadeln, Drähte, Holzstäbchen, Impfösen (z. B. 1 µl).
6.6 Sterile Kulturröhrchen und -kolben mit geeignetem Volumen. Es dürfen Kolben oder Flaschen und Kulturröhrchen mit ungiftigem Metall- oder Kunststoff-(Schraub-)Verschluss verwendet werden.
