Stolpersteine in der serologischen
Routinediagnostik des Rindes im
peripartalen Zeitraum
❙ Einführung – wie sind wir auf das Thema gestoßen
❙ Versuchsgruppe mit Ergebnissen
❙ Einzeltierergebnisse
❙ Fragen und Literatur
Einführung
“ we observed seroconversion or seronegativization events in a total of 34.3% of the multiparous
cows under investigation and a significant decline of the antibody score during dry period.”
Einführung
Da ist was falsch
❙ Laborfehler oder Chargenwechsel ?
❙ Telefonate mit kompetenten Personen „Ein Rind kann es sich nicht leisten, seine eigene humorale Abwehr im peripartalen Zeitraum aufzugeben“
❙ Suche nach Literatur
Wiederholung des Versuchsansatzes
Versuchsgruppe
❙ 10 Tiere aus einer endemisch Coxiellen–durchseuchten, nicht Coxiella–geimpften Herde selektiert nach Reaktivität im indirekten Q–Fieber–ELISA
❙ 4 über 100% ber. OD - starkreaktiv
❙ 4 zwischen 30 und 100% ber. OD - mittelreaktiv
❙ 2 Tiere waren negativ.
❙ Alle Tiere BVDV geimpft.
❙
Die Cox. - negativen Tiere blieben negativ – (wahrscheinlich keine zusätzliche Infektion in der Gruppe)
❙
Interessant für spätere Analysen sind die Coxiella – mittelreaktiven Tiere
❙
Starkreaktive liegen außerhalb des Linearitätsbereiches des ELISA, so dass qualitative Änderungen geringer
ausfallen
Versuchsgruppe
Versuchsgruppe
LOM
Versuchsgruppe
Externkennung
Tieralter in
Monaten Kalbung Kalbedatum
91468 49.19 3. 07.08.
91632 47.18 3. 07.08.
00677 73.18 5. 09.08.
88537 87.29 5. 09.08.
64754 32.27 2. 10.08.
64645 34.15 2. 18.08.
42122 67.29 4. 09.08.
64454 36.28 2. 09.08.
91750 46.11 3. 10.08.
42254 66.08 4. 14.08.
64496 36.09 2. 15.08.
i.d. Regel 1 x wöchentlich beprobt vom 23.06.2016 bis zum 13.09.2016 Blutungsabstand 20.07. – 03.08. 14d , ab 13.09. 14d
Die Proben wurden im Rahmen des herdenspezifischen Stoffwechselmonitorings
genommen.
Verwendete Diagnostika
❙ IDEXX Q-Fever Antibody
❙ IDEXX BVDV Total Ab
❙ IDEXX IBR gB X3
❙ IDEXX Trachitest Serum screening
❙ ID Screen Schmallenberg Virus Indirekt
❙ ID Screen BVD p80
❙ SNT BVDV auf MDBK mit Paplitz
❙ SNT Schmallenberg auf BHK21 mit FLI-Isolat BH80/11-4
Q-Fieber – Antikörperkinetik
Untersuchungen in der Tagesroutine – nahe am Entnahmezeitpunkt
LOM
Cut off cox
Geburtszeitraum
Q-Fieber – Antikörperkinetik
im Mittel
Ber.
OD
BVDV – Antikörperkinetik
Untersuchungen in der Tagesroutine – nahe am Entnahmezeitpunkt
LOM
Cut off BVDV
Geburtszeitraum
BVDV – Antikörperkinetik
im Mittel
Ber.
OD
Einzeltierergebnisse Q – Fieber und BVDV
Einzeltieruntersuchungen erfolgten als WDH in einer Extraserie – alle Verlaufsproben in einem Ansatz
Tier 64645 mit Änd. der qualitativen Bewertung
BVDV positiv – negativ- positiv Q- Fieber positiv – grenzwertig- positiv
Einzeltierergebnisse Q – Fieber und BVDV
Tier 91750 mit Änd. der qualitativen Bewertung
Q- Fieber positiv – negativ- positiv
❙ 3-5 Wochen präpartal diagnostischer Peak im indirekten ELISA
❙ Danach deutlicher Reaktivitätsabfall bis zur Kalbung
❙ Erholungsphase 3-4 (5) Wochen postpartal
❙ Individuelle Unterschiede – Verkürzung oder Verlängerung der Phasen, Stärke des Abfalls sind wahrscheinlich
Wie sind die Zeitfenster?
Wie sind die Zeitfenster?
Externkenn
ung Kalbedatum Max Q F Wochen
a.p. max BVD Wochen a.p.
Q-Fieber normal
Wochen
p.p. BVD normal Wochen p.p.
91468 07.08. 13. Jul. 3,5 20. Jul. 2,5 23. Aug. 2,5 31. Aug. 3,5 91632 07.08. 20. Jul. 2,5 13. Jul. 3,5 16. Aug. 2 6. Sep. 4
64754 10.08. 20. Jul. 3 20. Jul. 3 23. Aug. 2 6. Sep. 4
64645 18.08. 13. Jul. 5 13. Jul. 5 6. Sep. 3 20. Sep. 5
42122 09.08. 20. Jul. 3 20. Jul. 3 13. Sep. 4 6.9. 4
64454 09.08. 20. Jul. 3 6. Sep. 4
91750 10.08. 20. Jul. 3 20. Jul. 3 13. Sep. 5 31. Aug. 3
42254 14.08. 20. Jul. 3,5 20. Jul. 3,5 23. Aug. 1,5 31. Aug. 2,5
64496 15.08. 20. Jul. 3,5 6. Sep. 4
Einzeltierergebnisse BVDV - Tests
Tier 64645 mit Änd. der qualitativen Bewertung
BVDV positiv – negativ - positiv p80 – Blocking ELISA Serumverd. 1/4
Einzeltierergebnisse BVDV - Tests
Tier 91632 mit Änd. der qualitativen Bewertung
BVDV positiv – negativ - positiv p80 – Blocking ELISA Serumverd. 1/4
Einzeltierergebnisse Indirekte ELISA
Tier 42254 (BHV1- Impftier) in 3 indirekten ELISA mit ähnlichem Verlauf
Serumverdünnung im BHV1 –ELISA 1/70
Einzeltierergebnisse BHV1 -Tests
Tier 42254 in BHV1 Vollvirus indirekt und gB- Blocking ELISA
Serumverdünnung 1/70
Einzeltierergebnisse indirekte ELISA
Tier 42122 (BHV1- Impftier) in 3 indirekten ELISA mit ähnlichem Verlauf
Serumverdünnung im BHV1 –ELISA 1/70
Einzeltierergebnisse BHV1 -Tests
Tier 42122 in BHV1 Vollvirus indirekt und gB- Blocking ELISA
Serumverdünnung 1/70
Einzeltierergebnisse Schmallenberg
Tier 42122 im indirekten Schmallenberg ELISA und SNT
Und was ist mit der Q-Fieber –KBR?
Wo liegt die Ursache ?
Marco Herr / Promotion Gießen 2009
Was zeigen die Konjugate an?
❙ «Das Konjugat, das wir im Q-Fieber Test verwenden, hat die höchste Affinität zu IgG1, erkennt aber auch alle anderen IgG-Klassen beim Rind. IgM und IgA werden nicht erkannt. »
❙ «Das Konjugat im BVDV Total Ab Test erkennt nur bovines IgG und
nicht IgG vom Schaf oder von der Ziege. Innerhalb der bovinen IgG-
Klassen wird wieder IgG1 sehr gut erkannt.»
Literatur
❙ Beschreibung des Phänomens durch Bachofen et al. 2013 für BVDV
❙ 2005 Kyaw et al. für Neospora caninum
❙ Detilleux et al.1995 Untersuchungen zu IgG peripartal
❙ Marco Herr – Gießen 2009 – Promotion zu Ig Konzentration peripartal
❙ Larson, Kendall 1957 - Verschiebung der Serumproteine peripartal
•
Abnahme von y1 und β2 im Serum sechs Wochen a.p. bis zur Geburt, dabei Erhöhung im Eutersekret (Larson)
•
Reduktion des humoralen IgG1 um 62% ab 5. Woche a.p. (Detilleux)
•
IgG im Kolostrum - IgG1 zu 81% , präpartal 31,6 mg/ml im Eutersekret – 10,7 mg/ml im Serum (
nach Herr 2009)
Fragen? Hinweise?
❙ Der peripartale Zeitraum des Rindes ist ein kritischer Zeitpunkt - auch in der serologischen Diagnostik
❙ Die Abnahme der IgG1 – Konzentration im Serum ist beachtenswert
❙ Bei Bestandsuntersuchungen sollte möglichst auf die Untersuchung von TS – Gruppen verzichtet werden
❙ Indirekte ELISA`s mit starker Ausrichtung auf IgG1 sind in dieser Zeit kontrainduziert
❙ Besonders zu beachten sind geringe oder mittlere Antikörperkonzentrationen, die zu einer Änderung der qualitativen Bewertung führen
❙ Vorsicht bei Serumpaaruntersuchungen - in diesem Zeitraum sind innerhalb von 14d erhebliche Verschiebungen möglich
❙ Die Wahl des richtigen Diagnoseverfahrens lässt uns nicht „stolpern“
❙ Ist der Rückgang der AK IgG 1 im Blut mit einem Protektivitätsverlust verbu nden ?
Vielen Dank für Ihre Aufmerksamkeit
Quelle: Masterrind
