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Abbildung 19: Nach Induktion einer Sepsis weisen Nlrp3 KO Mäuse eine bessere systolische und diastolische Herzfunktion als Nlrp3 WT Mäuse auf. ... 83 Abbildung 20: Die CLP-induzierte Sepsis führt zu einem geringeren Körpergewichtsverlust in Nlrp3 KO im Vergleich zu Nlrp3 WT Mäusen. ... 84 Abbildung 21: Die CLP-induzierte Sepsis führt zu einer Reduktion des Herzgewichts in Nlrp3 WT Mäusen, nicht jedoch in Nlrp3 KO Mäusen. ... 85 Abbildung 22: Die CLP-induzierte Sepsis führt zu einer Reduktion des Leber-, Lungen und Nierengewichts in Nlrp3 WT, aber nicht in Nlrp3 KO Mäusen... 86 Abbildung 23: Die CLP-induzierte Sepsis zeigt 96h nach Operation (sham/CLP) keine histologischen Veränderungen des Herzgewebes in den Nlrp3 WT und Nlrp3 KO Mäusen. ... 89 Abbildung 24: Die CLP-induzierte Sepsis führt 96h nach Operation (sham/CLP) zu einer Erhöhung der Expression von Interleukin-1β (IL1b); Interleukin-6 (Il6) ist nur in Nlrp3 WT nach CLP-Operation erhöht. ... 90 Abbildung 25: Nppa und Nppb mRNA Expression 96h nach CLP-induzierter Sepsis (sham/CLP) in Nlrp3 WT und Nlrp3 KO Mäusen. ... 91 Abbildung 26: Die CLP-induzierte Sepsis führt 96h nach Operation (sham/CLP) zu einer veränderten mRNA Expression von Myosin heavy chain 6 (MyH6) und Myosin heavy chain 7 (MyH7) in Nlrp3 WT und Nlrp3 KO Mäusen... 92 Abbildung 27: Die CLP-induzierte Sepsis führt 96h nach Operation (sham/CLP) zu erhöhten Proteinmengen von Myosin slow in den Herzen von Nlrp3 WT und Nlrp3 KO Mäusen. ... 93 Abbildung 28: Die CLP-induzierte Sepsis verändert 96h nach Operation (sham/CLP) die mRNA Expression von Col1 und Ctgf in Nlrp3 WT und Nlrp3 KO Mäusen unterschiedlich. ... 94 Abbildung 29: Die CLP-induzierte Sepsis führt 96h nach Operation (sham/CLP) zu keiner Veränderung der mRNA Expression von Trim63 und Fbxo32 in Nlrp3 WT und Nlrp3 KO Mäusen. ... 95 Abbildung 30: Sepsis-induzierte Autophagie ist in Nlrp3 KO Herzen verringert. ... 97
11. Tabellenverzeichnis
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11. Tabellenverzeichnis
Tabelle 1: Ansätze zur Herstellung von Puffer und Lösungen ... 40
Tabelle 2: Western Blot Gel 1,5 mm ... 41
Tabelle 3: Agarosegel zur Genotypisierung von Mäusen ... 42
Tabelle 4: Primer für die quantitative Real-time PCR ... 42
Tabelle 5: Primer zur Erfassung des Genotyps ... 43
Tabelle 6: Primäre und sekundäre Antikörper zur Western Blot Analyse ... 43
Tabelle 7: Primäre und sekundäre Antikörper für Immunfluoreszenz ... 44
Tabelle 8: Ansatz für eine PCR: Wildtyp-Mäuse ... 50
Tabelle 9: Ansatz für eine PCR: Knockout-Mäuse ... 50
Tabelle 10: PCR-Zyklus zur Genotypisierung von Mäusen ... 51
Tabelle 11: Ansatz für eine PCR zur Herstellung von cDNA ... 53
Tabelle 12: PCR-Zyklus zur Herstellung von cDNA ... 53
Tabelle 13: Bestandteile für eine PCR Reaktion ... 54
Tabelle 14: verwendetes Programm für die quantitative Real-time PCR ... 55
Tabelle 15: Entwässerung und Einbettung von Gewebe in Paraffin ... 59
Tabelle 16: Entparaffinierung von Gewebe ... 59
Tabelle 17: Hämatoxylin-Eosin-Färbung ... 60
Tabelle 18: Trichrom-Färbung ... 61
I. Eidesstattliche Versicherung
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I. Eidesstattliche Versicherung
„Ich, Katharina Busch, versichere an Eides statt durch meine eigenhändige Unterschrift, dass ich die vorgelegte Dissertation mit dem Thema: „Die Rolle des angeborenen Immunsystems in der inflammations-vermittelten Kardiomyopathie“
selbstständig und ohne nicht offengelegte Hilfe Dritter verfasst und keine anderen als die angegebenen Quellen und Hilfsmittel genutzt habe.
Alle Stellen, die wörtlich oder dem Sinne nach auf Publikationen oder Vorträgen anderer Autoren beruhen, sind als solche in korrekter Zitierung kenntlich gemacht.
Die Abschnitte zu Methodik (insbesondere praktische Arbeiten, Laborbestimmungen, statistische Aufarbeitung) und Resultaten (insbesondere Abbildungen, Graphiken und Tabellen) entsprechen den URM und werden von mir verantwortet.
Meine Anteile an den ausgewählten Publikationen entsprechen denen, die in der untenstehenden gemeinsamen Erklärung mit dem Betreuer, angegeben sind.
Sämtliche Publikationen, die aus dieser Dissertation hervorgegangen sind und bei denen ich Autor bin, entsprechen den URM und werden von mir verantwortet.
Die Bedeutung dieser eidesstattlichen Versicherung und die strafrechtlichen Folgen einer unwahren eidesstattlichen Versicherung (§156, 161 des Strafgesetzbuches) sind mir bekannt und bewusst.“
____________________________ ____________________________
Ort / Datum Katharina Busch
II. Anteilserklärung an erfolgten Publikationen
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II. Anteilserklärung an erfolgten Publikationen
Katharina Busch hat aktiv an der praktischen experimentellen Durchführung und der theoretischen Vorbereitung des Tierversuches mitgearbeitet.
I. Publikation:
Huang N, Kny M, Riediger F, Busch K, Schmidt S, Luft FC, Slevogt H, Fielitz J.
Deletion of Nlrp3 protects from inflammation-induced skeletal muscle atrophy.
Intensive Care Med Exp. 2017; 5:3. doi: 10.1186/s40635-016-0115-0.
Aus meiner statistischen Auswertung ist Abbildung 18 unter 7.2.1. Überlebensrate entstanden.
Beitrag im Einzelnen:
- Durchführung der CLP-Operation, Versorgung und Überwachung der Nlrp3 WT und Nlrp3 KO Tiere nach Operation
- Täglich mehrfache Zählung der überlebenden und gestorbenen Tiere sowie tabellarische Auflistung mit Tag und Uhrzeit
- Abtötung der überlebten Nlrp3 WT und Nlrp3 KO Tiere sowie Entnahme der Skelettmuskulatur (m. gastrocnemius, m. plantaris, m. tibialis anterior)
- Genotypisierung der Nlrp3 WT und Nlrp3 KO Tiere
- Literaturrecherche, graphische Bearbeitung, statistische Auswertung - Erstellen des Manuskriptes und Diskussion der Ergebnisse
II. Publizierte Abstracts:
Vortrag auf der 83. Jahrestagung der Deutschen Gesellschaft für Kardiologie - Herz- und Kreislaufforschung e.V. in Mannheim, 04/2017.
Kny M, Busch K, Huang N, Schmidt S, Klassert T, Stock M, Butter C, Slevogt H, Fielitz J. Deletion of Nlrp3 protects from inflammation-induced cardiac failure.
Beitrag im Einzelnen:
- Durchführung zellbiologischer Experimente - Analyse und Auswertung der Daten
- Graphische Darstellung der Daten - Diskussion der Ergebnisse
II. Anteilserklärung an erfolgten Publikationen
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III. Weitere Mitarbeiten an publizierten Abstracts:
a. 83. Jahrestagung der Deutschen Gesellschaft für Kardiologie - Herz- und Kreislaufforschung e.V. in Mannheim, 04/2017.
Kny M, Huang N, Busch K, Schmidt S, Butter C, Riediger F, Luft FC, Slevogt H, Fielitz J. Deletion of Nlrp3 protects from inflammation-induced skeletal muscle atrophy.
Beitrag im Einzelnen:
- Durchführung zellbiologischer Experimente - Analyse und Auswertung der Daten
- Graphische Darstellung der Daten - Diskussion der Ergebnisse
b. Leopoldina Symposium „The Evolution of Intensive Care Medicine”, 02/2017.
Huang N, Kny M, Riediger F, Busch K, Schmidt S, Butter C, Luft FC, Slevogt H, Fielitz J. Deletion of Nlrp3 protects from inflammation-induced skeletal muscle atrophy.
Beitrag im Einzelnen:
- Durchführung zellbiologischer Experimente - Analyse und Auswertung der Daten
- Graphische Darstellung der Daten - Diskussion der Ergebnisse
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Ort / Datum Katharina Busch
III. Curriculum vitae
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III. Curriculum vitae
Mein Lebenslauf wird aus datenschutzrechtlichen Gründen in der elektronischen Version meiner Arbeit nicht veröffentlich.
III. Curriculum vitae
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IV. Publikationsliste
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IV. Publikationsliste
I. Publikation:
Huang N, Kny M, Riediger F, Busch K, Schmidt S, Luft FC, Slevogt H, Fielitz J.
Deletion of Nlrp3 protects from inflammation-induced skeletal muscle atrophy.
Intensive Care Med Exp. 2017; 5:3. doi: 10.1186/s40635-016-0115-0.
II. Publikation in Bearbeitung:
Kny M, Csalyi KD, Klaeske K, Busch K, Dworatzek E, Fliegner D, Regitz-Zagrosek V, Luft FC, Panakova D, Fielitz J. Ninjurin1 regulates striated muscle growth and differentiation.
III. Publizierte Abstracts:
Vortrag auf der 83. Jahrestagung der Deutschen Gesellschaft für Kardiologie - Herz- und Kreislaufforschung e.V. in Mannheim, 04/2017.
Kny M, Busch K, Huang N, Schmidt S, Klassert T, Stock M, Butter C, Slevogt H, Fielitz J. Deletion of Nlrp3 protects from inflammation-induced cardiac failure.
IV. Weitere Mitarbeiten an publizierten Abstracts:
a. 83. Jahrestagung der Deutschen Gesellschaft für Kardiologie - Herz- und Kreislaufforschung e.V. in Mannheim, 04/2017.
Kny M, Csalyi KD, Klaeske K, Busch K, Dworatzek E, Fliegner D, Regitz-Zagrosek V, Panakova D, Fielitz J. Ninjurin1 regulates myocyte growth and differentiation.
b. 83. Jahrestagung der Deutschen Gesellschaft für Kardiologie - Herz- und Kreislaufforschung e.V. in Mannheim, 04/2017.
Kny M, Huang N, Busch K, Schmidt S, Butter C, Riediger F, Luft FC, Slevogt H, Fielitz J. Deletion of Nlrp3 protects from inflammation-induced skeletal muscle atrophy.
c. Leopoldina Symposium „The Evolution of Intensive Care Medicine”, 02/2017.
Huang N, Kny M, Riediger F, Busch K, Schmidt S, Butter C, Luft FC, Slevogt H, Fielitz J. Deletion of Nlrp3 protects from inflammation-induced skeletal muscle atrophy.