4.2 Stämme, Plasmide und Oligonukleotide
4.2.2 Plasmide
Material
134
135
Plasmid Genotyp/Beschreibung Referenz
BHUM1178 (pYM1)
3HA.kanMX6, Ampr (Knop et al., 1999) BHUM1186 ACT1, Ampr
Vektor für die Herstellung einer ACT1-Sonde mit den Primern fw_ACT1 und rev_ACT1.
Stammsammlung AG Mösch
BHUM1300 3HA-kanMX6, Ampr
Die CaURA3-Kassette wurde mit BglII und EcoRV aus dem Vektor pKT209 (BHUM1098) geschnitten und über die gleichen Restriktionsschnittstellen in den Vektor pYM1 (BHUM1078) ligiert.
diese Arbeit
BHUM1243 (pLG312n)
PCYC1-lacZ, URA3, 2 μm, Ampr (Rothfels et al., 2005) BHUM1266
(pLG312n_2/1)
PCYC1-PFLO11
-[421-1]-lacZ, 2 μm, Ampr, URA3
Die Amplifikation des PFLO11-Fragments erfolgte mit Hilfe der Primer fw_ YEp24-lacZ und rev_ YEp24-lacZ aus FLO11-2/1-lacZ (Rupp et al., 1999). Das Promotorfragment wurde mittels homologer Rekombination in die XhoI geschnittene MCS des PCYC1 von pLG312n eingebracht. Überprüft durch PCR mit den Primern fw_seq_ YEp24lacZ und rev_seq_ YEp24lacZ.
Stammsammlung AG Mösch (Mark, 2008)
BHUM1267 (pLG312n_3/2)
PCYC1-PFLO11
-[620-182]-lacZ, 2 μm, Ampr, URA3 Die Amplifikation des PFLO11-Fragments erfolgte mit Hilfe der Primer fw_ YEp24-lacZ und rev_ YEp24-lacZ aus FLO11-3/2-lacZ (Rupp et al., 1999). Das Promotorfragment wurde mittels homologer Rekombination in die XhoI geschnittene MCS des PCYC1 von pLG312n eingebracht. Überprüft durch PCR mit den Primern fw_seq_ YEp24lacZ und rev_seq_ YEp24lacZ.
Stammsammlung AG Mösch (Mark, 2008)
BHUM1268 (pLG312n_4/3)
PCYC1-PFLO11
-[820-381]-lacZ, 2 μm, Ampr, URA3 Die Amplifikation des PFLO11-Fragments erfolgte mit Hilfe der Primer fw_ YEp24-lacZ und rev_ YEp24-lacZ aus FLO11-4/3-lacZ (Rupp et al., 1999). Das Promotorfragment wurde mittels homologer Rekombination in die XhoI geschnittene MCS des PCYC1 von pLG312n eingebracht. Überprüft durch PCR mit den Primern fw_seq_ YEp24lacZ und rev_seq_ YEp24lacZ.
Stammsammlung AG Mösch (Mark, 2008)
BHUM1269 (pLG312n_5/4)
PCYC1-PFLO11-[1018-591]-lacZ, 2 μm, Ampr, URA3 Die Amplifikation des PFLO11-Fragments erfolgte mit Hilfe der Primer fw_ YEp24-lacZ und rev_ YEp24-lacZ aus FLO11-5/4-lacZ (Rupp et al., 1999). Das Promotorfragment wurde mittels homologer Rekombination in die XhoI geschnittene MCS des PCYC1 von pLG312n eingebracht. Überprüft durch PCR mit den Primern fw_seq_ YEp24lacZ und rev_seq_ YEp24lacZ.
Stammsammlung AG Mösch (Mark, 2008)
BHUM1270 (pLG312n_5)
PCYC1-PFLO11-[1018-779]-lacZ, 2 μm, Ampr, URA3 Die Amplifikation des PFLO11-Fragments erfolgte mit Hilfe der Primer fw_ YEp24-lacZ und rev_ YEp24-lacZ aus pFLO11-5 (Braus et al., 2003). Das Promotorfragment wurde mittels homologer Rekombination in die XhoI geschnittene MCS des PCYC1 von pLG312n eingebracht. Überprüft durch PCR mit den Primern fw_seq_ YEp24lacZ und rev_seq_ YEp24lacZ.
Stammsammlung AG Mösch (Mark, 2008)
Material
136
Plasmid Genotyp/Beschreibung Referenz
BHUM1271 (pLG312n_6/5)
PCYC1-PFLO11
-[1220-779]-lacZ, 2 μm, Ampr, URA3 Die Amplifikation des PFLO11-Fragments erfolgte mit Hilfe der Primer fw_ YEp24-lacZ und rev_ YEp24-lacZ aus FLO11-6/5-lacZ (Rupp et al., 1999). Das Promotorfragment wurde mittels homologer Rekombination in die XhoI geschnittene MCS des PCYC1 von pLG312n eingebracht. Überprüft durch PCR mit den Primern fw_seq_ YEp24lacZ und rev_seq_ YEp24lacZ.
Stammsammlung AG Mösch (Mark, 2008)
BHUM1272 (pLG312n_6)
PCYC1-PFLO11-[1220-981]-lacZ, 2 μm, Ampr, URA3 Die Amplifikation des PFLO11-Fragments erfolgte mit Hilfe der Primer fw_ YEp24-lacZ und rev_ YEp24-lacZ aus pFLO11-6 (Braus et al., 2003). Das Promotorfragment wurde mittels homologer Rekombination in die XhoI geschnittene MCS des PCYC1 von pLG312n eingebracht. Überprüft durch PCR mit den Primern fw_seq_ YEp24lacZ und rev_seq_ YEp24lacZ.
Stammsammlung AG Mösch (Mark, 2008)
BHUM1273 (pLG312n_7/6)
PCYC1-PFLO11
-[1421-981]-lacZ, 2 μm, Ampr, URA3 Die Amplifikation des PFLO11-Fragments erfolgte mit Hilfe der Primer fw_ YEp24-lacZ und rev_ YEp24-lacZ aus FLO11-7/6-lacZ (Rupp et al., 1999). Das Promotorfragment wurde mittels homologer Rekombination in die XhoI geschnittene MCS des PCYC1 von pLG312n eingebracht. Überprüft durch PCR mit den Primern fw_seq_ YEp24lacZ und rev_seq_ YEp24lacZ.
Stammsammlung AG Mösch (Mark, 2008)
BHUM1274 (pLG312n_8/7)
PCYC1-PFLO11
-[1620-1182]-lacZ, 2 μm, Ampr, URA3 Die Amplifikation des PFLO11-Fragments erfolgte mit Hilfe der Primer fw_ YEp24-lacZ und rev_ YEp24-lacZ aus FLO11-8/7-lacZ (Rupp et al., 1999). Das Promotorfragment wurde mittels homologer Rekombination in die XhoI geschnittene MCS des PCYC1 von pLG312n eingebracht. Überprüft durch PCR mit den Primern fw_seq_ YEp24lacZ und rev_seq_ YEp24lacZ.
Stammsammlung AG Mösch (Mark, 2008)
BHUM1275 (pLG312n_9/8)
PCYC1-PFLO11
-[1820-1381]-lacZ, 2 μm, Ampr, URA3 Die Amplifikation des PFLO11-Fragments erfolgte mit Hilfe der Primer fw_ YEp24-lacZ und rev_ YEp24-lacZ aus FLO11-9/8-lacZ (Rupp et al., 1999). Das Promotorfragment wurde mittels homologer Rekombination in die XhoI geschnittene MCS des PCYC1 von pLG312n eingebracht. Überprüft durch PCR mit den Primern fw_seq_ YEp24lacZ und rev_seq_ YEp24lacZ.
Stammsammlung AG Mösch (Mark, 2008)
BHUM1276 (pLG312n_9)
PCYC1-PFLO11-[1820-1573]-lacZ, 2 μm, Ampr, URA3 Die Amplifikation des PFLO11-Fragments erfolgte mit Hilfe der Primer fw_ YEp24-lacZ und rev_ YEp24-lacZ aus pFLO11-9 (Braus et al., 2003). Das Promotorfragment wurde mittels homologer Rekombination in die XhoI geschnittene MCS des PCYC1 von pLG312n eingebracht. Überprüft durch PCR mit den Primern fw_seq_ YEp24lacZ und rev_seq_ YEp24lacZ.
Stammsammlung AG Mösch (Mark, 2008)
BHUM1277 (pLG312n_10/9)
PCYC1-PFLO11
-[2020-1573]-lacZ, 2 μm, Ampr, URA3 Die Amplifikation des PFLO11-Fragments erfolgte mit Hilfe der Primer fw_ YEp24-lacZ und rev_ YEp24-lacZ aus FLO11-10/9-lacZ (Rupp et al., 1999). Das Promotorfragment wurde mittels homologer Rekombination in die XhoI geschnittene MCS des PCYC1 von pLG312n eingebracht. Überprüft durch PCR mit den Primern fw_seq_ YEp24lacZ und rev_seq_ YEp24lacZ.
Stammsammlung AG Mösch (Mark, 2008)
137
Plasmid Genotyp/Beschreibung Referenz
BHUM1278 (pLG312n_10)
PCYC1-PFLO11
-[2020-1781]-lacZ, 2 μm, Ampr, URA3 Die Amplifikation des PFLO11-Fragments erfolgte mit Hilfe der Primer fw_ YEp24-lacZ und rev_ YEp24-lacZ aus pFLO11-10 (Braus et al., 2003). Das Promotorfragment wurde mittels homologer Rekombination in die XhoI geschnittene MCS des PCYC1 von pLG312n eingebracht. Überprüft durch PCR mit den Primern fw_seq_ YEp24lacZ und rev_seq_ YEp24lacZ.
Stammsammlung AG Mösch (Mark, 2008)
BHUM1279 (pLG312n_11/10)
PCYC1-PFLO11-[2220-1781]-lacZ, 2 μm, Ampr, URA3 Die Amplifikation des PFLO11-Fragments erfolgte mit Hilfe der Primer fw_ YEp24-lacZ und rev_ YEp24-lacZ aus FLO11-11/10-lacZ (Rupp et al., 1999). Das Promotorfragment wurde mittels homologer Rekombination in die XhoI geschnittene MCS des PCYC1 von pLG312n eingebracht. Überprüft durch PCR mit den Primern fw_seq_ YEp24lacZ und rev_seq_
YEp24lacZ.
Stammsammlung AG Mösch (Mark, 2008)
BHUM1280 (pLG312n_12/11)
PCYC1-PFLO11
-[2420-1981]-lacZ, 2 μm, Ampr, URA3 Die Amplifikation des PFLO11-Fragments erfolgte mit Hilfe der Primer fw_ YEp24-lacZ und rev_ YEp24-lacZ aus FLO11-12/11-lacZ (Rupp et al., 1999). Das Promotorfragment wurde mittels homologer Rekombination in die XhoI geschnittene MCS des PCYC1 von pLG312n eingebracht. Überprüft durch PCR mit den Primern fw_seq_ YEp24lacZ und rev_seq_
YEp24lacZ.
Stammsammlung AG Mösch (Mark, 2008)
BHUM1281 (pLG312n_13/12)
PCYC1-PFLO11-[2620-2181]-lacZ, 2 μm, Ampr, URA3 Die Amplifikation des PFLO11-Fragments erfolgte mit Hilfe der Primer fw_ YEp24-lacZ und rev_ YEp24-lacZ aus FLO11-13/12-lacZ (Rupp et al., 1999). Das Promotorfragment wurde mittels homologer Rekombination in die XhoI geschnittene MCS des PCYC1 von pLG312n eingebracht. Überprüft durch PCR mit den Primern fw_seq_ YEp24lacZ und rev_seq_
YEp24lacZ.
Stammsammlung AG Mösch (Mark, 2008)
BHUM1282 (pLG312n_14/13)
PCYC1-PFLO11
-[2820-2381]-lacZ, 2 μm, Ampr, URA3 Die Amplifikation des PFLO11-Fragments erfolgte mit Hilfe der Primer fw_ YEp24-lacZ und rev_ YEp24-lacZ aus FLO11-14/13-lacZ (Rupp et al., 1999). Das Promotorfragment wurde mittels homologer Rekombination in die XhoI geschnittene MCS des PCYC1 von pLG312n eingebracht. Überprüft durch PCR mit den Primern fw_seq_ YEp24lacZ und rev_seq_
YEp24lacZ.
Stammsammlung AG Mösch (Mark, 2008)
BHUM1283 (pLG312n_15/14)
PCYC1-PFLO11
-[2984-2581]-lacZ, 2 μm, Ampr, URA3 Die Amplifikation des PFLO11-Fragments erfolgte mit Hilfe der Primer fw_ YEp24-lacZ und rev_ YEp24-lacZ aus FLO11-15/14-lacZ (Rupp et al., 1999). Das Promotorfragment wurde mittels homologer Rekombination in die XhoI geschnittene MCS des PCYC1 von pLG312n eingebracht. Überprüft durch PCR mit den Primern fw_seq_ YEp24lacZ und rev_seq_
YEp24lacZ.
Stammsammlung AG Mösch (Mark, 2008)
BHUM1444 (pLG312n_FLO11-BS1)
PCYC1-PFLO11
-[2737-2702]-lacZ, 2 μm, Ampr, URA3 PFLO11-Fragment FLO11-BS1 (aus den Oligonukleotiden 1-1n_fw und 1-1n_rev generiert) über XhoI- und degenerierte Acc65I-Restriktionsschnitstelle in den Vektor pLG312n ligiert.
Stammsammlung AG Mösch (Schäfer, 2009)
Material
138
Plasmid Genotyp/Beschreibung Referenz
BHUM1447 (pLG312n_FLO11-BS2)
PCYC1-PFLO11
-[2131-2085]-lacZ, 2 μm, Ampr, URA3 PFLO11-Fragment FLO11-BS2 (aus den Oligonukleotiden 2-1n_fw und 2-1n_rev generiert) über XhoI- und degenerierte Acc65I-Restriktionsschnitstelle in den Vektor pLG312n ligiert.
Stammsammlung AG Mösch (Schäfer, 2009)
BHUM1448 (pLG312n_FLO11-BS3)
PCYC1-PFLO11
-[1646-1610]-lacZ, 2 μm, Ampr, URA3 PFLO11-Fragment FLO11-BS3 (aus den Oligonukleotiden 3-1n_fw und 3-1n_rev generiert) über XhoI- und degenerierte Acc65I-Restriktionsschnitstelle in den Vektor pLG312n ligiert.
Stammsammlung AG Mösch (Schäfer, 2009)
BHUM1450 (pLG312n_FLO11-BS3M)
PCYC1-PFLO11-[1646-1610]-lacZ, 2 μm, Ampr, URA3 PFLO11-Fragment FLO11-BS3M (aus den Oligonukleotiden 3-2n_fw und 3-2n_rev generiert) über XhoI- und degenerierte Acc65I-Restriktionsschnitstelle in den Vektor pLG312n ligiert.
Stammsammlung AG Mösch (Schäfer, 2009)
BHUM1452 (pLG312n_FLO11-BS4)
PCYC1-PFLO11
-[83-49]-lacZ, 2 μm, Ampr, URA3 PFLO11-Fragment FLO11-BS4 (aus den Oligonukleotiden 4-1n_fw und 4-1n_rev generiert) über XhoI- und degenerierte Acc65I-Restriktionsschnitstelle in den Vektor pLG312n ligiert.
Stammsammlung AG Mösch (Schäfer, 2009)
BHUM1454 (pLG312n_ENA1-BS1)
PCYC1-PFLO11
-[588-551]-lacZ, 2 μm, Ampr, URA3 PENA1-Fragment ENA1-BS1 (aus den Oligonukleotiden 5-1_fw und 5-1n_rev generiert) über XhoI- und degenerierte Acc65I-Restriktionsschnitstelle in den Vektor pLG312n ligiert.
Stammsammlung AG Mösch (Schäfer, 2009)
BHUM1542 (pFI1)
3HA-RIM101, LEU2, ADE3, pUCori, f1ori, CEN6, Ampr
(Hayashi et al., 2005)
BHUM1544
(pLG669Z∆_FLO11-BS1)
PCYC1(UAS∆)-PFLO11
-[2737-2702]-lacZ, 2 μm, Ampr, URA3 PFLO11-Fragment FLO11-BS1 aus BHUM1444 mit
flankierenden Bereichen über BamHI- und XhoI-Schnittstelle in pLG669Z∆ ligiert.
Stammsammlung AG Mösch (Schäfer, 2009)
BHUM1546
(pLG669Z∆_FLO11-BS2)
PCYC1(UAS∆)-PFLO11
-[2131-2085]-lacZ, 2 μm, Ampr, URA3 PFLO11-Fragment FLO11-BS1 aus BHUM1447 mit
flankierenden Bereichen über BamHI- und XhoI-Schnittstelle in pLG669Z∆ ligiert.
Stammsammlung AG Mösch (Schäfer, 2009)
BHUM1548
(pLG669Z∆_FLO11-BS3)
PCYC1(UAS∆)-PFLO11-[1646-1610]-lacZ, 2 μm, Ampr, URA3 PFLO11-Fragment FLO11-BS3 aus BHUM1448 mit
flankierenden Bereichen über BamHI- und XhoI-Schnittstelle in pLG669Z∆ ligiert.
Stammsammlung AG Mösch (Schäfer, 2009)
BHUM1550
(pLG669Z∆_FLO11-BS3M)
PCYC1(UAS∆)-PFLO11
-[1646-1610]-lacZ, 2 μm, Ampr, URA3 PFLO11-Fragment FLO11-BS3M aus BHUM1450 mit flankierenden Bereichen über BamHI- und XhoI-Schnittstelle in pLG669Z∆ ligiert.
Stammsammlung AG Mösch (Schäfer, 2009)
BHUM1552
(pLG669Z∆_FLO11-BS4)
PCYC1(UAS∆)-PFLO11-[83-49]-lacZ, 2 μm, Ampr, URA3 PFLO11-Fragment FLO11-BS4 aus BHUM1452 mit
flankierenden Bereichen über BamHI- und XhoI-Schnittstelle in pLG669Z∆ ligiert.
Stammsammlung AG Mösch (Schäfer, 2009)
139
Plasmid Genotyp/Beschreibung Referenz
BHUM1554 (pLG669Z∆_ENA1-BS1)
PCYC1(UAS∆)-PFLO11
-[588-551]-lacZ, 2 μm, Ampr, URA3 PFLO11-Fragment ENA1-BS1 aus BHUM1454 mit
flankierenden Bereichen über BamHI- und XhoI-Schnittstelle in pLG669Z∆ ligiert.
Stammsammlung AG Mösch (Schäfer, 2009)
BHUM1556 (pLG669Z∆_leer)
PCYC1(UAS∆)-PFLO11-lacZ, 2 μm, Ampr, URA3 Austausch der Region zwischen den Restriktionsschnittstellen BamHI- und XhoI durch die aus pLG669Z∆ (BHUM1243).
Stammsammlung AG Mösch (Schäfer, 2009)
BHUM1574 PPGK1-FLO11-TFLO11, , URA3, CEN
Der PPGK1 wurde mit den Primern fw-pPGK1-FLO11-45 und rev-pPGK1-FLO11-45 aus pHVX2-MUC1 (BHUM1043) amplifiziert und mittels homologer Rekombination in das XbaI/SalI geschnittene Plasmid aus BHUM0778 eingebracht.
Überprüft durch Sequenzierung mit den Primern fw_72-SalI-BHUM0778-9 und rev158bp_inclATG.
diese Arbeit
BHUM1628 PFLO11-Nrg1-BM III mut.-FLO11, CEN, URA3 Das Nrg1-BM III im PFLO11 im Plasmid aus BHUM0778 wurde mittels „Quick-change Mutagenese“ unter Verwendung der Primer fw_FLO11_BM3mut und rev_FLO11_BM3mut mutiert.
Überprüft durch Sequenzierung mit dem Primer seq_fw_BM3mut_101bp.
diese Arbeit
BHUM1631 (pLG312n_FLO11-BS5)
PCYC1-PFLO11
-[2330-2295]-lacZ, 2 μm, Ampr, URA3 PFLO11-Fragment FLO11-BS5 (aus den Oligonukleotiden bs5-1_fw und bs5-1n_rev generiert) über XhoI- und degenerierte Acc65I-Restriktionsschnitstelle in den Vektor pLG312n ligiert.
diese Arbeit
BHUM1633 (pLG312n_FLO11-BS6)
PCYC1-PFLO11-[1800-1765]-lacZ, 2 μm, Ampr, URA3 PFLO11-Fragment FLO11-BS6 (aus den Oligonukleotiden bs6-1_fw und bs6-1n_rev generiert) über XhoI- und degenerierte Acc65I-Restriktionsschnitstelle in den Vektor pLG312n ligiert.
diese Arbeit
BHUM1635 (pLG312n_FLO11-BS7)
PCYC1-PFLO11
-[1146-1111]-lacZ, 2 μm, Ampr, URA3 PFLO11-Fragment FLO11-BS7 (aus den Oligonukleotiden bs7-1_fw und bs7-1n_rev generiert) über XhoI- und degenerierte Acc65I-Restriktionsschnitstelle in den Vektor pLG312n ligiert.
diese Arbeit
BHUM1637 (pLG312n_FLO11-BS8)
PCYC1-PFLO11
-[163-128]-lacZ, 2 μm, Ampr, URA3 PFLO11-Fragment FLO11-BS8 (aus den Oligonukleotiden bs8-1_fw und bs8-1n_rev generiert) über XhoI- und degenerierte Acc65I-Restriktionsschnitstelle in den Vektor pLG312n ligiert.
diese Arbeit
BHUM1654
(pLG669Z∆_FLO11-BS5)
PCYC1(UAS∆)-PFLO11
-[2330-2295]-lacZ, 2 μm, Ampr, URA3 PFLO11-Fragment FLO11-BS5 aus BHUM1631 mit
flankierenden Bereichen über BamHI- und XhoI-Schnittstelle in pLG669Z∆ ligiert. Überprüft durch PCR mit den Primern Seq_pLG312n_fw und Seq_pLG312n_rev.
diese Arbeit
Material
140
Plasmid Genotyp/Beschreibung Referenz
BHUM1656
(pLG669Z∆_FLO11-BS6)
PCYC1(UAS∆)-PFLO11
-[1800-1765]-lacZ, 2 μm, Ampr, URA3 PFLO11-Fragment FLO11-BS6 aus BHUM1633 mit
flankierenden Bereichen über BamHI- und XhoI-Schnittstelle in pLG669Z∆ ligiert. Überprüft durch PCR mit den Primern Seq_pLG312n_fw und Seq_pLG312n_rev.
diese Arbeit
BHUM1658
(pLG669Z∆_FLO11-BS7)
PCYC1(UAS∆)-PFLO11
-[1146-1111]-lacZ, 2 μm, Ampr, URA3 PFLO11-Fragment FLO11-BS7 aus BHUM1635 mit
flankierenden Bereichen über BamHI- und XhoI-Schnittstelle in pLG669Z∆ ligiert. Überprüft durch PCR mit den Primern Seq_pLG312n_fw und Seq_pLG312n_rev.
diese Arbeit
BHUM1660
(pLG669Z∆_FLO11-BS8)
PCYC1(UAS∆)-PFLO11
-[163-128]-lacZ, 2 μm, Ampr, URA3 PFLO11-Fragment FLO11-BS8 aus BHUM1637 mit
flankierenden Bereichen über BamHI- und XhoI-Schnittstelle in pLG669Z∆ ligiert. Überprüft durch PCR mit den Primern Seq_pLG312n_fw und Seq_pLG312n_rev.
diese Arbeit